slzná laktátdehydrogenáza

LDH (EC 1.1.1.27) a MDH (EC 1.1.1.37) v slzách pocházejí hlavně z rohovkového epitelu oka. Jejich koncentrace v slzách je asi 20krát vyšší než koncentrace enzymu v séru. Odtrhávací LDH obsahuje hlavně podjednotku M, s nejvyšším obsahem LDH5 a LDH4. Izoenzym MDH slz lze elektroforézou v octové membráně oddělit od MDH a MDHm. Slzy zdravých lidí jsou hlavně MDH. Základní informace Kategorie specialisty: Oftalmologie Klasifikace: Biochemické vyšetření Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: ne půst Výsledky analýzy: Pod normální: Bakteriální vřed rohovky a chemické poškození keratokonjunktiv. Normální hodnota: Slzy laktátdehydrogenáza: 1,29-9,02 U / l Nad normální: Poškození epitelu rohovky spojovky. Negativní: Pozitivní: Tipy: Otřete si oči rukama, způsobí to infekce očí, zhorší stav a ovlivní výsledky inspekce. Normální hodnota LDH1,29 ~ 9,02 U / l; Isoenzym LDH LDH10,66 ± 0,51%; MDH aktivita je 0,25 ~ 2,2 U / l; MDH isoenzym MDHs 80% ~ 98,1%; MDHm> 20% je abnormální; LDH / MDH <69 let je 3,96 ± 0,7; > 70 let 4,55 ± 0,51. Klinický význam Abnormální výsledky U chemického poškození bakteriálních vředů rohovky a keratokonjunktivy došlo k poklesu aktivity slzných LDH a MDH. Poměr LDH isoenzymu H / M a MDHm byly zvýšeny v různých stupních, ale MDHm mohl odrážet poškození rohovky a stupeň léze. Například u vředů rohovky a podezření na suchou keratokonjunktivitidu (KCS) se MDHm zvýšila a poměr H / M slzného LDH se významně nezměnil. Stanovení poměru izoenzymu LDH a LDH / MDH v slzách přispívá k diferenciální diagnostice trachomu a chronické konjunktivitidy. Poměr H / M LDH v obou slzách se významně snížil, ale v trachomu se poměr slz v LDH / MDH nezměnil a M podjednotka LDH se významněji zvýšila. Potřeba zkontrolovat diagnózu onemocnění rohovky v populaci. Nízké výsledky mohou být nemoc: preventivní opatření proti bakteriálním vředům rohovky Nevhodné osoby: obecně žádná zvláštní populace. Tabu před vyšetřením: třením si rukama rukama, způsobí to infekci očí, zhorší stav a ovlivní kontrolní účinek. Požadavky na prohlídku: Ověřte podle pokynů lékaře. Proces inspekce 1, kolorimetrická metoda: (1) Laktát draselný a laktát sodný lze také použít jako substráty LDH, ale protože jsou to vodné roztoky, jejich obsah není dostatečně přesný a nesprávné skladování může způsobit, že keto kyseliny inhibují enzymatické reakce. Laktát lithný je pevný, stabilní a snadno vážitelný. (2) Kromě diethanolaminového pufru lze také použít Tris nebo pyrofosfátový pufr, aby se zabránilo inhibici LDH glycinovým pufrem v původní metodě Jinshi a zvýšila se pozitivní rychlost detekce. (3) Kolorimetrie by měla být dokončena do 5 až 15 minut, jinak se absorbance sníží. (4) Pokud je výsledek> 500 U, lze vzorek zředit fyziologickým roztokem chloridu sodného a poté změřit a výsledek se vynásobí ředicím faktorem. 2. Metoda nepřetržitého sledování: (1) Vzorek by neměl být hemolyzován. Když hladina hemolýzy dosáhne 0,8 g / l, aktivita LDH může být zvýšena o 58%. (2) Vzorky byly skladovány při pokojové teplotě (25 ° C), enzymatická aktivita byla stabilní do 2 dnů, enzymatická aktivita v chladničce byla snížena a LDH3 a LDH4 byly všechny inaktivovány při -20 ° C přes noc. (3) Uspokojivé výsledky u plazmy séra nebo heparinu antikoagulované plazmy může oxalát inhibovat aktivitu LDH. (4) Po rekonstituci se roztok zakalí nebo by měla být počáteční absorbance> 0,5 odstraněna. (5) Aktivita laktátdehydrogenázy může být měřena pozitivní i negativní obousměrnou reakcí, ale referenční interval se liší v závislosti na reakční teplotě, substrátu a koncentraci pufru. Za použití kyseliny mléčné a NAD jako substrátů byla monitorována rychlost zvyšování absorbance při 340 nm jako pozitivní reakce, vyjádřena jako LD-L; jako substráty byly použity pyruvát a NADH a rychlost snižování absorbance při 340 nm byla monitorována jako reverzní reakce, vyjádřena jako LD-P. Ve srovnání se dvěma způsoby pozitivní a negativní reakce jsou hlavními výhodami metody LD-L: A. Stabilita kapaliny pro substrát pro pozitivní reakci je větší než stabilita reverzní reakce. První chladničku lze skladovat déle než 6 měsíců, zatímco druhá je pouze několik dní; Lineární rozsah rychlostní odezvy (absorbance vynesené proti monitorovací době t) je širší; C. opakovatelnost je lepší než LD-P. Protože rychlost zpětné reakce je rychlejší než rychlost vpřed, její referenční hodnota je asi dvakrát vyšší než u LD-L. Nevhodné pro dav Ne. Nežádoucí účinky a rizika Ne.