Imunologické vyšetření na neplodnost

Imunologická vyšetření neplodnosti zahrnují mužskou antim spermatickou autoimunitní neplodnost, ženskou alogenní neplodnost proti spermiím a ženskou neplodnost proti Zona pellucida. Kontrolní strava: 1, většina testovaných položek vyžaduje odběry krve na lačný žaludek ráno, měla by být na lačno káva, silný čaj, nápoje s vysokým obsahem cukru a coly; 2, funkce jater, krevní lipidy, koagulace krve a další položky vyžadují půst po dobu 12-16 hodin, a Večeře jeden den předem by se měla vyvarovat pití alkoholu, zakázat dietu s vysokým obsahem tuků a bílkovin; 3, strava má významný vliv na krevní lipidy, nejméně do 3 dnů před odběrem krve, aby byla věnována pozornost udržování normální stravy. Základní informace Odborná klasifikace: klasifikace eugeniky a nadřazenosti: vyšetření tělesnou tekutinou Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: půst Výsledky analýzy: Pod normální: Normální hodnota: Ne Nad normální: Negativní: Výsledek negativního testu by měl být normální. Pozitivní: Pozitivní test ukazuje na onemocnění, které může být neplodné. Tipy: Zastavte pohlavní styk na 4 až 7 dní. Testosteron propionát, testosteron fenylacetát a nantrolon fenylpropionát nelze použít 1 týden před testem. Normální hodnota Výsledky různých imunologických testů byly normální a negativní. Klinický význam Abnormální výsledky Mnoho imunologických testů naznačuje neplodnost. Pacienti s mužskou neplodností a pacientky s neplodností je třeba vyšetřit. Pozitivními výsledky mohou být nemoci: neplodnost, mužská neplodnost, ženský pseudohermafroditismus, preventivní opatření proti malformaci mužských pohlavních orgánů Nevhodní lidé: dosud neznámí. Tabu před kontrolou: Nejprve při sběru spermatu: 1. Před opuštěním spermatu by měl pacient zastavit pohlavní styk po dobu 4 až 7 dnů. Testosteron propionát, testosteron fenylacetát a nantrolon fenylpropionát nelze použít 1 týden před testem. Pití by mělo být zastaveno do 1 měsíce před testem. 2, při odběru spermatu, měkkého mýdla nebo parafínového oleje lze použít k masáži penisu, vzorky se shromažďují ve sterilních zkumavkách, mohou se používat kondomy (omývané čisté, bez spermicidních léků) nebo sperma lze odebrat pohlavním stykem, ale tímto způsobem Shromážděné množství je často malé. 3. Pokud sperma není získáno výše uvedenou metodou, je možné pomocí konečníku masírovat semenný váček a konec vas deferens a moči lze odebrat, aby se ověřilo, zda v sedimentu není sperma. 4. Nevystavujte sperma přehřátému a chladnému prostředí. Odevzdejte to lékaři pro informaci, ne déle než 30 minut. Chraňte se za chladného počasí v teple a při odeslání ji držte v kapse spodního prádla. 5. Má-li být provedena bakteriální kultura, měl by se močový otvor opláchnout a dezinfikovat a sperma by se mělo odebrat do sterilní zkumavky. Za druhé, před požadavky na odběr séra: (1) Kontrola stravy 1. Většina kontrolovaných položek vyžaduje ráno odběr krve na lačný žaludek. Káva, čaj, vysoký cukr a cola nápoje by měly být nalačno. 2, funkce jater, krevní lipidy, krevní srážlivost a další předměty vyžadují půst po dobu 12-16 hodin, a jeden den před večeří by se mělo vyvarovat pití, zákazu stravy s vysokým obsahem tuků a bílkovin. 3, strava má významný vliv na testování lipidů v krvi, nejméně do 3 dnů před odběrem krve, aby byla věnována pozornost udržování normální stravy. (B) vyhnout se účinkům léků Účinky léčiv na biochemické testy a bakteriální kultury jsou komplexní. Proto by pokud možno měl subjekt přestat užívat všechny léky 1-2 dny před testem. Pokud je k léčbě nutná medikace, je třeba při analýze výsledků testu zvážit účinky léku. (3) Zamezení dopadu cvičení 1, namáhavé cvičení může změnit mnoho krevních složek, a to i po dobu delší než 24 hodin, takže po intenzivním cvičení by neměla být okamžitě odebrána krev a chůze rychle, alespoň 10-15 minut po odpočinku, poté odebrat krev. 2, měl by být v klidném stavu odebírat krev, aby se zabránilo emocionální vzrušení. Požadavky na kontrolu: 1. Aby se zajistilo, že po lékařském vyšetření budete moci přesně porozumět svým výsledkům fyzického vyšetření, vyplňte před lékařským vyšetřením pečlivě formulář lékařské prohlídky a každý testovací list. Písmo by mělo být jasné, zejména jméno. 2, po odebrání séra byste měli sedět 15-20 minut. Proces inspekce - kontrola imunitní neplodnosti proti spermatu Imunita proti antispypu zahrnuje humorální imunitu proti spermatu (protilátky proti spermatu) a imunitu buněk proti spermatu. (1) Detekce protilátek proti spermatu 1. Test po pohlavním styku: Vezměte si hlen děložního hrdla do 6 ~ 24 hodin po pohlavním styku a sledujte počet spermií počítaných pod mikroskopem s vysokým výkonem. V každém vysokovýkonném poli existuje ≥ 21 extrémně živých faktorů specifických pro spermie. Pokud je sérový titr ≥1: 32, lze jej považovat za protilátku spermatu. Jiní mají kapilární aglutinaci a aglutinaci destiček, které jsou méně využívány. 2. Test na cytotoxicitu závislý na komplementu a test na brzdění spermatem: Spermální protilátka se váže na spermiový antigen, aktivuje komplementový systém a způsobuje poškození permeability a integrity buněčné membrány. Pokud se jedná o brzdovou protilátku, ztrácí svou aktivitu a brzdí. Hodnota ≥ 2 je pozitivní, jedná-li se o cytotoxickou protilátku, je pozitivně obarvena určitými barvivy, což vyžaduje pohyblivost spermií> 70%. Mikro metoda potřebuje pouze několik mikrolitrů vzorku. U vzorků s nízkou mírou aktivity spermií lze živé sperma extrahovat metodou upstream a míra přežití může dosáhnout více než 90%. V praxi lze detekovat pouze protilátky, které působí na sperma. Silná specifičnost, špatná citlivost a vysoká falešně negativní míra. 3. Metoda pasivní hemaglutinace: Ošetřené červené krvinky jsou senzibilizovány extraktem spermatu a semennou plazmou a senzibilizované červené krvinky reagují se zředěným sérem, které se má testovat, na mikrotitrační destičce a aglutinace červených krvinek je pozitivní. Tato metoda není ovlivněna životaschopností spermií, počítáním, mikrobiálními nebo tkáňovými fragmenty v spermatozoech. Vědci se domnívají, že tato metoda je specifická a citlivá, ale existuje jen málo zpráv a její spolehlivost a praktičnost musí být ještě potvrzena. 4. Enzymově vázaný imunosorbentový test (ELISA) a biotin-avidinový enzymový imunosorbentový test (BA-ELISA): aplikace intaktního nosiče pevné fáze spermatu nebo spermatu s membránou, testované a kultivované protilátky ve vzorku Poté se může vázat na povrch antigenu. Následně se druhá protilátka enzymové značky může také vázat na povrch, poté se přidá enzymatický substrát a výsledek se posuzuje podle vývoje barvy substrátu. Lze jej pozorovat pouhým okem, lze jej také měřit pomocí čtečky mikrodestiček, která je objektivní a přesná, obecně více než skupina záporné optické hustoty séra plus dvojnásobek standardní odchylky je pozitivní. Protože intaktní spermie jsou snadno nespecificky adsorbovány, je-li potažena rozpustným spermatickým membránovým antigenem, je metoda citlivá, specifická, objektivní a kvantitativní a může určit typ protilátky a je snadno ovladatelná. BA-ELISA je nová generace kvantitativního testu vyvinutého na základě konvenční ELISA, která má větší citlivost a specificitu než běžné metody. 5. Imunobath test (1mmunbeadTest, IBT): Polyakrylamidové mikrokuličky potažené anti-lidskou imunoglobulinovou protilátkou se mohou vázat na povrch spermií navázaný na spermatickou protilátku a imunobálky lze vidět se spermatem pod mikroskopem s fázovým kontrastem nebo elektronovým mikroskopem. Spustit, pokud je poměr spermií v kombinaci s jednou nebo více imunobuličkami ≥lo% pozitivní. Tato metoda určuje místo, typ a podíl vázaného spermatu a může detekovat protilátky vázané na povrch živého spermatu. Jeho citlivost, specifičnost a reprodukovatelnost jsou dobré, operace je mírně těžkopádná a vzorky potřebné k testování jsou malé, lze jej použít k detekci stopových vzorků, jako je krční hlen a tekutina vejcovodu. 6. Radioaktivně značený imunoglobulin nebo protein A: Izotopem značený anti-lidský imunoglobulin nebo sazenice hroznů Protein se váže na protilátky spermií navázané na povrch spermatu a radioaktivita povrchu se měří x čítačem. Pokud se jako antigen používá živé spermie, je jeho specificita a citlivost vysoká a lze určit typ protilátky. Avšak vzhledem k různým zdrojům živých spermií v každém experimentu jsou výsledky méně reprodukovatelné a vybavení je drahé. Provozovatel je náchylný k radioaktivnímu poškození, takže tato metoda je méně hlášena. 7. Nepřímý imunofluorescenční test: Po navázání povrchu na antigen se může vázat na druhou protilátku značenou fluoresceinem a podíl pozitivního spermatu vykazujícího fluorescenci je pozorován pod fluorescenčním mikroskopem. Protože test vyžaduje fixaci methanolu k poškození membrány, interní antigen je exponován a protilátka proti internímu antigenu je všudypřítomná u nadbytečných lidí, takže falešně pozitivní je příliš vysoká a nemá klinickou praktickou hodnotu. V posledních letech nebyla kultura v kapalné fázi během experimentu fixována a užitečná hodnota této metody byla znovu definována. 8. Přímá kontrola interakce jemného vejce (1) Test na vázání nebo pronikání proužkem do spermií: Lidské vajíčko získané z laparoskopie je po inkubaci za určitých podmínek lepší než spermatozoa a zda spermie mohou procházet zona pellucida do prostoru kolem vaječné buňky, pokud sperma nelze nosit Předejte zona pellucida a zvažte přítomnost brzdové protilátky. Tento test je také narušen jinými faktory. (2) penetrační test bez průhledného spermatu (SPA): optimalizované extrahované živé spermie se smíchá s vejci bez křečka a pozoruje se pod mikroskopem s fázovým kontrastem. Pokud vejce obsahuje oteklou spermatickou hlavu (s ocasem) Průnik. SPA lze použít ke stanovení: 1 fertilizační schopnosti spermatu s spermatickými plazmatickými protilátkami, 2 významu různých protilátek při prevenci těhotenství. Tento test může být také ovlivněn řadou faktorů. (dvě) detekce imunity proti spermatickým buňkám Existuje jen málo studií buněčné anti-spermatické imunity a každý závěr je jiný. Pokusy na zvířatech a testy na lidech ukázaly, že anti-sense buněčná imunita může být jednou z příčin neplodnosti. Testy pro detekci buněčně zprostředkovaných imunitních odpovědí zahrnují test transformace lymfocytů, test inhibice adheze leukocytů, test inhibice migrace leukocytů nebo makrofágů, kožní test a test prokoagulační aktivity leukocytů v periferní krvi. Použité antigeny jsou různé, jako jsou čerstvě umyté sperma, zmrazené a rozmrazené spermie, semisurifikované spermie a podobně. V současnosti, protože použité antigeny nejsou jednotné, metody detekce jsou odlišné, počet výzkumných případů je malý, specifičnost každé metody je obtížné vyhodnotit a výsledky je obtížné porovnat. Za druhé, detekce anti-transparentní imunitní neplodnosti Zdroj lidské zony pellucida je omezený a je obtížné jej získat, ale lidská zona pellucida a prasečí zona pellucida mají křížovou antigenicitu, a proto se ve skutečnosti v praxi používá prasečí zóna pellucida k detekci protilátky zona pellucida v lidském séru. Protože přítomnost heterologního lektinu (hlavně IgM) v některém normálním lidském séru interferuje s experimentálními výsledky, jsou čerstvé prasečí červené krvinky potřebné k absorpci testovaného séra před testem. 1. Reakce srážení skotských pásů: Jakmile se povrch zony pellucida váže na protilátku, index lomu se mění pod světelným mikroskopem nebo mikroskopem tmavého pole. Tato metoda se většinou používá k identifikaci séra, má nízkou citlivost a je obtížné ji použít v klinické praxi. 2. Radioimunoanalýza: Po radioaktivně značeném antigenu prasete zona pellucida a séru, které se má testovat, se izoluje komplex antigen-protilátka a změří se jeho radioaktivita. Tato metoda může být kvantitativní, specifická a citlivá, ale vzhledem k radioaktivnímu poškození a zprávám není mnoho, je stále obtížné tuto metodu potvrdit. 3. Nepřímý imunofluorescenční test: Poté, co se lidská anti-Zona pellucida protilátka váže na povrch prasečího vajíčka, se antihumánní imunoglobulinová protilátka značená fluoresceinem váže na povrch zona pellucida a vykazuje zjevnou perifluorescenci pod fluorescenčním mikroskopem. Spolehlivost tohoto zákona závisí na jiných objektivních metodách. 4. Metoda ELISA a BALISA: nosič v pevné fázi je potažen antigenem prasečí zony pellucida a přidá se sérum, druhá protilátka a substrát, který se má testovat, promytí se provádí krok za krokem a nakonec se výsledek posuzuje podle změny barvy substrátu. Tato metoda vyžaduje menší velikost vzorku, nevyžaduje žádné speciální vybavení, je snadno ovladatelná, dokáže kvantitativně stanovit protilátky a určit typ protilátky a má dobrou specificitu a citlivost. BA-ELISA má výhody konvenčního ELISA a jeho citlivost je výrazně zlepšena. 5. Metoda pasivní hemaglutinace Čištěný antigen prasečí zony pellucida se používá k pokrytí červených krvinek jiných druhů jako cílového antigenu a v přítomnosti protilátky zona pellucida se senzibilizované červené krvinky aglutinují. O této metodě existuje jen málo zpráv a je obtížné vyhodnotit její citlivost a specifičnost. 6. Test vazby na průsvit nebo průnik proužkem: Tato metoda může být pozitivní, pokud existuje protilátka zona pellucida nebo protilátka proti spermatu. Protože test je do značné míry ovlivněn faktory prostředí kultury, je obtížné srovnávat výsledky výzkumu různých laboratoří. Tuto metodu lze použít ve spojení s jinými metodami, které se vzájemně doplňují, aby byla zajištěna spolehlivost výsledků. Nevhodné pro dav Vyšetření je méně invazivní a obvykle nemá kontraindikace. Nežádoucí účinky a rizika Tento test je méně invazivní a obecně nezpůsobuje vážné komplikace nebo jiná nebezpečí.