Enzymový kombinovaný sorpční test

Enzymově vázaný imunosorbentový test (dále jen ELISA) je nejrozšířenější technikou v enzymatickém imunotestu. Používá se k detekci testovaného antigenu (nebo protilátky), který je potažen v jamce destičky na pevné fázi. To znamená, že protilátka je značena enzymem a známý antigen nebo protilátka je adsorbována na povrchu nosiče pevné fáze a reakce antigen-protilátka je prováděna na povrchu nosiče pevné fáze a volná složka v kapalné fázi je odplavena promytím a nakonec působí enzymem. Barva se vyvíjí po substrátu pro posouzení výsledku. Základní informace Odborná klasifikace: klasifikace kontroly růstu a vývoje: biochemické vyšetření Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: půst Tipy: Při kontrole dodržujte pokyny lékaře. Normální hodnota Poměr testovaného séra ke známému negativnímu séru (P / N) byl <2,1 a hodnota OD testovaného séra byla <0,4, což bylo považováno za negativní. Klinický význam Abnormální výsledky: poměr testovaného séra ke známému negativnímu séru (P / N) ≥ 2,1 a hodnota OD testovaného séra je ≥ 0,4, považuje se za pozitivní. Je třeba zkontrolovat dav: detekovat antigen a protilátku. Opatření Kontraindikace před kontrolou: Připravte si různé obalové roztoky a nastavte koncentraci. Tabu při kontrole: 1. Přísně kontrolní faktory ovlivňující účinnost značení, jako je teplota, čas, pH, množství enzymu a množství protilátky. 2. Při instalaci sloupu vyrovnejte sloupec, povrch válce je plochý, bez bublin nebo trhlin. Proces inspekce Mezi běžně používané metody ELISA patří sendvičová metoda s dvojitou protilátkou a nepřímá metoda, první metoda pro detekci makromolekulárních antigenů a druhá metoda pro měření specifických protilátek. Nepřímá ELISA Tato metoda se používá hlavně k detekci protilátek. Postup pro nepřímou ELISA je následující. (1) Materiály 1 potahovací kapalina, promývací kapalina, tepelná konzervační kapalina, substrátová kapalina a zastavovací kapalina. 2DVH potažený antigen, enzymem značená anti-protilátka, negativní a pozitivní DVH referenční sérum. 3 ELISA detektor, vzorkovač, polystyrenová mikrodestička. (2) Kroky metody 1 plus potahování antigenem → 4 ° C přes noc, třikrát propláchnuté, vysušené. 2 plus sérum, které se má testovat → 37 ° C po dobu 2 hodin, třikrát se promyje a usuší. 3 Přidejte na 2 hodiny enzymem značenou protilátku → 37 ° C, třikrát omyjte a usušte. 4 Přidejte roztok substrátu → 37 ° C po dobu 30 minut, přidejte zastavovací roztok. 5 Hodnota OD byla měřena detektorem ELISA a byl vypočten poměr P / N. 2. ELISA s dvojitou protilátkou Tato metoda se používá hlavně k detekci makromolekulárních antigenů. 1 Přidejte protilátkový povlak → 4 ° C přes noc, třikrát omyjte a usušte. 2 Přidejte testovaný antigen → 37 ° C po dobu 30 minut, promyjte třikrát, usušte. 3 Přidejte enzymem značenou protilátku → 37 ° C po dobu 30 minut, promyjte třikrát, usušte. 4 Přidejte roztok substrátu → 37 ° C po dobu 15 minut, přidejte zastavovací roztok. 5 Hodnota OD byla měřena testerem ELISA. Nevhodné pro dav Nevhodné pro dav: ne. Nežádoucí účinky a rizika Žádné související komplikace nebo rizika.