Test tvorby krysích erytrocytových girland

B lymfocyty se účastní syntézy protilátek a jsou efektorovými buňkami humorální imunitní odpovědi. Povrch B buněk nese membránový povrchový imunoglobulin (SmIg), receptory Fc a receptory komplementu. Silně se váže na Fc část komplexu antigen-protilátka. Kuřecí nebo ovčí červené krvinky se vybírají a senzitizují na EA komplexy pomocí odpovídajících protilátek proti erytrocytům Fc receptor B buněk může tvořit věnec s EA, který se nazývá EA věnec. Pokud se komplex EA přidá ke komplementu a váže se na komplementový receptor B buněk, vytvoří se růžice EAC. Na povrchu B buněk jsou myší receptory RBC, které se mohou vázat na myší RBC a vytvářet rozety myší erytrocytů (M-RFC), které se převážně vážou na B buňky s IgM receptory, a M-RFC jsou většinou naivní B buňky. Tento test se používá hlavně k detekci počtu B lymfocytů a ke stanovení úrovně humorální imunity. Základní informace Odborná klasifikace: vyšetření klasifikace: vyšetření krve Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: půst Výsledky analýzy: Pod normální: Procento ME rozet se však snížilo nebo chybělo bez agamaglobulinémie a těžké kombinované imunodeficience. Normální hodnota: Procento ME v ženské periferní krvi: 5% -10% Nad normální: Procento ME věnců v periferní krvi u pacientů s chronickou lymfocytární leukémií je až 60% až 80%. Negativní: Pozitivní: Tipy: Při kontrole prosím relaxujte. Normální hodnota Výsledky Pod mikroskopem bylo spočítáno 200 lymfocytů Lymfocyty, které adsorbovaly 3 nebo více myších červených krvinek, byly B lymfocyty a bylo vypočteno procento girlandy myší (ME věnce). Procento ME rozety v normální lidské periferní krvi je 5% až 10%. Klinický význam Procento ME věnců v periferní krvi u pacientů s chronickou lymfocytární leukémií je až 60% až 80%, ale neexistuje žádná gama globulinemie, těžká kombinovaná imunodeficience atd. A procento ME věnců je sníženo nebo chybí. Nízké výsledky mohou být onemocnění: X-vázaná ne-gamaglobulinémie u dětí, vysoká incidence sekundární imunodeficience u dětí může být nemoc: preventivní opatření pro chronickou lymfocytární leukémii (1) Inkubační doba: Procento ME se postupně zvyšovalo s inkubační dobou. Po inkubaci po dobu 1 h bylo procento ME 7,4 ± 3,1% a inkubace se zvýšila na 18,3 ± 3,8% po 18 hodinách. Po 72 hodinách inkubace se zvýšil počet věnců. Postupně klesla na 3,4 ± 7,1%. (2) Kultivační roztok: Nejvhodnější je použít kultivační roztok Tc199 a výsledky a opakovatelnost jsou dobré. Promytí a resuspendování lymfocytů a červených krvinek médiem RPMl1640 s pufrem Hepes vedlo k tendenci buněk k agregaci a tvorbě velkých buněk, což vedlo k nespolehlivým výsledkům. (3) Když je optimální poměr červených krvinek k lymfocytům přibližně 35: 1, poměr> 60: 1 nebo poměr <25: 1, lze počet věnců ME snížit. (4) Zachování kultivačního roztoku MRBC: V roztoku Alsever, MRBC skladované při 4 ° C po dobu 1 týdne stále produkuje stabilní počet girland, zatímco MRBC uložený v PBS, fyziologickém roztoku nebo kultivačním médiu Tc199 s prodlouženou dobou skladování, počet věnců Po 72 hodinách skladování lze postupně pozorovat pouze malé nebo věnec tvořící buňky. Proces inspekce (1) Vezměte 1 ml výše uvedené suspenze červených krvinek myší, přidejte 3 ml fyziologického roztoku chloridu sodného, ​​dobře promíchejte, 1500 ot / min, odstřeďte po dobu 10 minut, celkem promyjte 3x a nakonec připravte 1% suspenzi červených krvinek myší s fyziologickým roztokem (asi 1,4 × 108) Buňka / ml). (2) 1,5 ml heparinu bylo odebráno pro antikoagulaci, lymfocyty byly odděleny stratifikací lymfocytů a koncentrace buněk byla upravena na 2 x 107 / ml pomocí 20% telecího roztoku Hank v séru. (3) Vezměte 0,1 ml suspenze lymfocytů, přidejte stejné množství 1% ​​suspenze červených krvinek myší, promíchejte a umístěte do vodní lázně o teplotě 37 ° C po dobu 10 minut, 500 r / min, odstřeďte po dobu 10 minut, vložte chladničku na 4 ° C na 2–3 hodiny. (4) Pipetujte 0,05 ml supernatantu, přidejte 1 kapku 2 g / l modrého roztoku, jemně točte, aby se smíchal, vezměte 1 kapku směsi na sklíčko, zakryjte krycí sklíčko, poté, co se buňky ponoří Zkontrolujte pomocí mikroskopu s vysokým výkonem. Nevhodné pro dav Neexistuje žádný nevhodný dav. Nežádoucí účinky a rizika Je to bezpečná kontrola a je neškodná pro tělo.