aminokyseliny mozkomíšního moku

V nervovém systému existuje velké množství volných aminokyselin. Kromě účasti na obecném metabolickém procesu nervového systému a udržování rovnováhy intracelulární a vnější vody a elektrolytů tyto látky také působí jako chemické přenosové látky zapojené do excitace a inhibice nervů a jsou excitovány do nervových buněk. Aminokyseliny, jako je kyselina glutamová, kyselina asparagová a podobně, mají inhibiční účinek, jako je kyselina gama aminomáselná (GABA) a glycin. Základní informace Specializovaná klasifikace: klasifikace neurologických vyšetření: vyšetření mozkomíšního moku Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: půst Tipy: Po lumbální punkci CSF přidejte 2 ml sulfosalicylidu sodného 5 mg / ml, aby se vysrážený protein protřepal, okamžitě jej vložte do curlingu a vložte jej do -20 ° C v lednici do 10 hodin nebo jej vložte co nejdříve do -40 ° C ~ -70 ° C. . Ne více než 2 měsíce. Je třeba zabránit kontaminaci krve (protože obsah Asp v červených krvinkách je 200krát vyšší než plazma). Je nutné zastavit odběr vzorků po jednom týdnu užívání drogy. Normální hodnota Metoda HPLC Kyselina asparagová (kyselina asparagová, Asp) 1,6 ± 1,7 μmol / l; Kyselina glutamová (Glu) 4,6 ± 1,2 umol / l; Serin (serin, ser) 33,9 ± 4,9 umol / l; Histidin (Hisidin, His) 10,0 ± 2,7 umol / l; Glycin (Gly) 8,6 ± 2,1 umol / l; Threomin (Thr) 32,4 ± 12,6 umol / l; Arginin (arginin, Arg) 35,5 ± 6,1 umol / l; Alanin (Alaine, Ala) 47,2 ± 9,1 umol / l; Tyrosin (Tyr), 10,7 ± 2,0 umol / l; Cystin (cystin, Cys) 1,0 ± 1,1 umol / l; Methionin (Met) 0,3 ± 0,5 umol / l; Prolin (Vatine, Val) 18,7 ± 4,1 umol / l; Fenylalanin (Phe) 12,0 ± 2,3 umol / l; Isoleucin (Ileeucin, Ile) 6,5 ± 1,7 umol / l; Leucin (Leu) 9,3 ± 2,7 umol / l; Lysin (Lys), 22,2 ± 4,3 μmol / L. Klinický význam Za normálních okolností je celkové množství aminokyselin v CSF asi 10% až 30% obsahu plazmy. Když je zažloutnutí různých meningitid a úrovní obstrukce míchy žluté, celkové množství aminokyselin v CSF je významně zvýšeno, neurosyfilis v pozdním stádiu je mírně zvýšen, skleróza multiplex a senilní psychóza jsou sníženy. Chromatografií lze separovat více než 20 druhů aminokyselin v CSF, klinický význam aminokyselin je následující. Bakteriální meningitida, meningální radikulitida, rakovina meningitida, Garin-Bujadox-Bannnarth atd. CSF glutamát, glycin, isoleucin, leucin, cystin, fenylalanin, prolin Vysoký. Glycin a leucin jsou zvýšeny v aseptických meningech CSF. Tuberkulózní meningitida, japonská encefalitida, detská obrna, tryptofan CSF. Mozkový absces, systémová infekce, schizofrenie, glycin, glutamát, prolin, aspartát se zvýšily, schizofrenie také vykázala zvýšený alanin. Jaterní kóma, mozkové krvácení, epilepsie, těžká narkolepsie, zvýšená hladina glutaminu a snížená koncentrace kyseliny gama-aminobutyrové CSF u pacientů s epilepsií. Mnoho neurologických degenerativních onemocnění, jako je Parkinsonova choroba, onemocnění motorických neuronů, spinální cerebelární degenerace, zvýšená hladina aspartátu v CSF a snížený glutamát. Koncentrace lysinu a fenylalaninu v rakovině, glioblastomu CSF, je zvýšena. Aminokyseliny v CSF různých pacientů s močovými cestami v moči se mohou odpovídajícím způsobem měnit, například se často zvyšuje obsah rozvětvených aminokyselin, jako je guanidin, leucin a isoleucin v CSF javorového sirupu, a zvyšuje se argininový obsah argininu. Zvýšená lyzineurie CSF zvýšila lysin. Nízké výsledky mohou být onemocnění: vysoká skleróza může být vysoká onemocnění: záchvaty a epilepsie, symptomatický epilepsie, meningitida, opatření pro neurosyfilis Po bederní punkci CSF přidejte 2 ml sulfosalicylátu sodného 5 mg / ml, aby se vysrážený protein protřepal, okamžitě vložte do curlingové nádoby a do 10 hodin vložte do chladničky s teplotou -20 ° C nebo jej co nejdříve vložte do -40 ° C ~ -70 ° C. Ne více než 2 měsíce. Je třeba zabránit kontaminaci krve (protože obsah Asp v červených krvinkách je 200krát vyšší než v plazmě). Je nutné zastavit odběr vzorků po jednom týdnu užívání drogy. Vysoce výkonnou kapalinovou chromatografií a analyzátorem aminokyselin lze separovat a stanovit více než 20 druhů aminokyselin. Některé hlášené normální rozdíly v normálním obsahu mohou být způsobeny použitím nástrojů, metod a podmínek zpracování a skladování vzorků a existují rozpory ve změnách koncentrace aminokyselin v CSF u některých chorob, takže stanovení aminokyselin v CSF Pro klinický význam je nutný další výzkum. Obsah aminokyselin v CSF se s věkem zvyšoval, včetně kyseliny glutamové, serinu, histidinu, threoninu, argininu a cystinu, ale nebyl zjištěn rozdíl mezi pohlavími. Proces inspekce (1) Odsolování: 10 ml filtrované mozkomíšní tekutiny bylo vloženo do chromatografické kolony obsahující 5 ml iontoměničové pryskyřice Dowex-50 x 8 a kolona byla propláchnuta 100 ml destilované vody a výtok byl odstraněn. Aminokyselina byla eluována 30 ml 2 mol / l vodného amoniaku. Eluát byl odpařen ve vakuu při 40 ° C a zbytek byl rozpuštěn v 1 ml destilované vody. 1 ml mozkomíšního moku byl nejprve deproteinizován 40 mg kyseliny sulfosalicylové Po odstředění bylo 0,5 ml supernatantu přidáno do chromatografické kolony obsahující 1 ml Dowex 50 x 8 a kolona byla propláchnuta 40 ml destilované vody a výtok byl odstraněn. Aminokyselina byla eluována 15 ml 2 mol / l vodného amoniaku. Eluát byl odpařen ve vakuu při 40 ° C a zbytek byl rozpuštěn v 0,05 ml destilované vody. (2) Nanesení: 4 μl demineralizovaného koncentrátu mozkomíšního moku bylo přidáno 1,5 cm od levé strany chromatografické destičky na tenké vrstvě, množství vzorku bylo 2 μg amino dusíku a čím menší průměr, tím lepší. (3) Oxidace aminokyseliny obsahující síru: 0,5 ml H202 obsahující molybdenan amonný byl přidán na místo a ponechán stát při teplotě místnosti po dobu 30 minut. (4) Rozpěrná vrstva: Nejprve se tenkovrstvá chromatografická destička umístí do chromatografického válce obsahujícího první rozpouštědlo a vrstva se natáhne asi 60 minut, to znamená, když se rozpouštědlo zvýší na 9,5 cm, vyjme se a poté se fouká 30 minut proudem vzduchu při 40 ° C. . Tenkovrstvá chromatografická destička byla rotována při 90 ° C a umístěna do chromatografického válce obsahujícího druhé rozpouštědlo po dobu asi 100 minut, to znamená, když bylo rozpouštědlo zvýšeno na 9,5 cm, bylo vyjmuto a umístěno při 40 ° C přes noc. (5) Ninhydrinové činidlo bylo nastříkáno na tenkovrstvou chromatografickou destičku a potom bylo umístěno do pece při 100 ° C na 30 minut, aby se pozorovaly fialově modré skvrny aminokyseliny a prolinové skvrny byly žluté. Nevhodné pro dav 1. Pokud je zřejmá papilém nebo dětská mozková obrna, kontraindikace jsou kontraindikovány. 2. Pacienti, kteří jsou v šoku, vyčerpání nebo jsou ohroženi a mají místní zánět kůže a léze v zadní kraniální fosílii, jsou kontraindikováni. Nežádoucí účinky a rizika Pokud má pacient během vpichu příznaky, jako je dýchání, puls nebo neobvyklé zbarvení, okamžitě přerušte činnost a podle toho se s ním vypořádejte.