Immunologisk test for infertilitet

Immunologiske undersøgelser af infertilitet inkluderer autoimmun infertilitet hos mandlige sædceller, kvindelig anti-sæd-allogen infertilitet og kvindelig anti-Zona pellucida infertilitet. Kontrol diæt: 1, de fleste af testemnerne kræver blodprøvetagning på tom mave om morgenen, bør fastet kaffe, stærk te, høj sukker og cola-drikke; 2, leverfunktion, blodlipider, blodkoagulation og andre ting kræver faste i 12-16 timer, og Middag en dag i forvejen bør undgå at drikke alkohol, forbyde fedtindhold med højt proteinindhold, 3, diæt har en betydelig indflydelse på blodlipidprøven, mindst inden for 3 dage før blodet trækker for at være opmærksom på at opretholde en normal diæt. Grundlæggende information Specialistklassificering: eugenik og klassificering af overlegenhedsundersøgelser: undersøgelse af kropsvæske Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: faste Analyseresultater: Under det normale: Normal værdi: ingen Over normal: Negativ: Resultatet af den negative test skal være normalt. positiv: En positiv test indikerer en sygdom, der kan være infertil. Tips: Stop seksuel omgang i 4 til 7 dage. Testosteronpropionat, testosteronphenylacetat og nantrolonphenylpropionat kunne ikke bruges 1 uge før testen. Normal værdi Resultaterne af forskellige immunologiske tests var normale og negative. Klinisk betydning Unormale resultater Flere immunologiske test indikerer infertilitet. De mandlige infertilitet og kvindelige infertilitetspatienter skal undersøges. Positive resultater kan være sygdomme: infertilitet, mandlig infertilitet, kvindelig pseudohermaphroditism, forholdsregler mod mænds kønsorganer Upassende mennesker: endnu ikke kendt. Tabu før inspektion: Først når du opsamler sædceller: 1. Før patienten forlader sæd, skal patienten stoppe samleje i 4 til 7 dage. Testosteronpropionat, testosteronphenylacetat og nantrolonphenylpropionat kunne ikke bruges 1 uge før testen. Drikken skal stoppes inden for en måned før testen, hvilket skal gøres. 2, når man tager sæd, kan blød sæbe eller paraffinolie bruges til penimassage, prøverne opsamles i sterile prøverør; kondomer kan bruges (vaskes rent, ingen sædceller) eller sæd kan opsamles ved samleje, men på denne måde Det indsamlede beløb er ofte lille. 3. Hvis sæden ikke opnås ved ovennævnte metode, kan sædblæren og enden af ​​vas deferensene masseres gennem endetarmen, og urinen kan opsamles for at kontrollere, om der er sæd i sedimentet. 4. Udsæt ikke sæd for overophedede og kolde omgivelser. Aflever det til lægen til reference, højst 30 minutter. Hold dig varm i koldt vejr, og opbevar den i din undertøjslomme, når du sender den. 5. Hvis bakteriekultur skal udføres, skal urinrørsåbningen skylles og desinficeres, og sæden skal opsamles i et sterilt reagensglas. For det andet inden serumindsamlingskravene: (1) Kontrol af diæt 1. De fleste inspektionsgenstande kræver blodprøvetagning på tom mave om morgenen. Kaffe, te, drikkevarer med højt sukker og cola bør fastes. 2, leverfunktion, blodlipider, blodkoagulation og andre ting kræver faste i 12-16 timer, og en dag før middagen bør undgå at drikke, hvilket forbyder fedtindhold med højt proteinindhold. 3 har diæt en betydelig indflydelse på blodlipidforsøg, mindst inden for 3 dage før blodtrækningen for at være opmærksom på at opretholde en normal diæt. (B) for at undgå lægemiddelvirkninger Virkningerne af lægemidler på biokemiske test og bakteriekultur er komplekse. Derfor, hvis det er muligt, skal patienten stoppe med at tage alle medicin 1-2 dage før testen. Hvis medicin er nødvendig til behandling, skal lægemidlets virkninger overvejes, når testresultaterne analyseres. (3) Undgå virkningen af ​​træning 1, anstrengende motion kan få mange blodkomponenter til at ændre sig, selv i mere end 24 timer, så efter kraftig træning bør ikke straks tage blod og gå hurtigt, mindst 10-15 minutter efter hvile, derefter tage blod. 2, skal være i en rolig tilstand til at trække blod, for at undgå følelsesmæssig spænding. Krav til inspektion: 1. For at sikre, at du nøjagtigt kan forstå dine fysiske undersøgelsesresultater efter den medicinske undersøgelse, skal du udfylde den medicinske undersøgelsesformular og hvert testark omhyggeligt inden den medicinske undersøgelse. Skrivningen skal være klar, især navnet. 2, efter at have taget serum, skal du sidde stille i 15-20 minutter. Inspektionsproces -, anti-sæd immun infertilitet kontrol Antisperm-immunitet inkluderer anti-sæd-humoral immunitet (anti-sæd-antistoffer) og anti-sædcelle-immunitet. (1) Påvisning af antisperm-antistoffer 1. Test efter samleje: Tag livmoderhalsslim inden for 6 ~ 24 timer efter samleje, og observer antallet af sædceller, der er talt under mikroskop med høj effekt. I hvert felt med høj effekt er der ≥ 21 ekstremt livlige sædspecifikke faktorer. Hvis serumtiter er ≥1: 32, kan det betragtes som at indeholde sædantistoffer. Andre har kapillær agglutination og plade-agglutination, som er mindre anvendt. 2. Komplement-afhængig cytotoksicitetstest og sædbremsetest: Spermantistof binder til sædantigen, aktiverer komplementsystemet og forårsager skade på cellemembranens permeabilitet og integritet. Hvis det er et bremseantistof, mister det sin aktivitet og bremser. En værdi på ≥ 2 er positiv; hvis det er et cytotoksisk antistof, er det positivt farvet med visse farvestoffer, hvilket kræver en sædmotilitet> 70%. Mikrofremgangsmåden har kun brug for et par mikroliter prøve. For prøver med lav sædaktivitetshastighed kan den levende sæd ekstraheres ved opstrømsmetoden, og overlevelsesraten kan nå over 90%. Denne praksis kan kun påvise antistoffer, der virker på sædens hale. Stærk specificitet, dårlig følsomhed og høj falsk negativ hastighed. 3. Passiv hæmagglutineringsmetode: De behandlede røde blodlegemer sensibiliseres med sædekstrakten og sædplasmaet, og de sensibiliserede røde blodlegemer reageres med det fortyndede serum, der skal testes på mikro-reaktionspladen, og den røde blodlegems agglutination er positiv. Denne metode påvirkes ikke af sædcellernes levedygtighed, tælling, mikrobielle eller vævsfragmenter i spermatozoa.Forskerne mener, at denne metode er specifik og følsom, men der er kun få rapporter, og dens pålidelighed og anvendelighed er endnu ikke bekræftet. 4. Enzymbundet immunosorbent assay (ELISA) og biotin-avidin enzymbundet immunosorbent assay (BA-ELISA): anvendelse af intakt sædcelle eller sædcelle membran antigen-coated fastfasebærer, sædantistof i prøven, der skal testes og dyrkes Den kan derefter binde til antigenets overflade. Derefter kan det andet antistof på enzymmærket også binde til overfladen, og derefter tilsættes enzymsubstratet, og resultatet bedømmes i henhold til farveudviklingen af ​​substratet. Kan observeres med det blotte øje, kan også måles med en mikropladelæser, sidstnævnte objektive og nøjagtige, generelt mere end en gruppe negativ serumoptisk densitet plus 2 gange standardafvigelsen er positiv. Da den intakte sædcelle let ikke-specifikt adsorberes, hvis den er coatet med opløseligt sædmembranantigen, er metoden følsom, specifik, objektiv og kvantitativ og kan bestemme antistoffet og er let at betjene. BA-ELISA er en ny generation af kvantitativ assay udviklet på basis af konventionel ELISA, som har mere følsomhed og specificitet end konventionelle metoder. 5. Immunobath-test (1 mmunbeadTest, IBT): Polyacrylamid-mikrosfærer belagt med anti-humant immunglobulin-antistof kan binde til sædoverfladen bundet med sædantistof, og immunobeads kan ses med sædceller under fasekontrastmikroskop eller elektronmikroskop. Kør, hvis andelen af ​​sæd kombineret med en eller flere immunguler er ≥%% positiv. Denne metode bestemmer lokaliteten, typen og andelen af ​​bundet sæd og kan detektere antistoffer bundet til overfladen af ​​levende sæd. Dets følsomhed, specificitet og reproducerbarhed er god, operationen er lidt besværlig, og prøverne, der kræves til test, er få.De kan bruges til påvisning af sporprøver såsom cervikalslim og æggeledningsvæske. 6. Radiomærket immunoglobulin eller protein En metode: Isotopmærket anti-humant immunoglobulin eller drueplante Et protein er bundet til sædantistoffer bundet til overfladen af ​​sædcellen, og radioaktiviteten af ​​overfladen måles med en x-tæller. Hvis der anvendes levende sædceller som antigen, er dets specificitet og følsomhed høj, og antistoffetypen kan bestemmes. På grund af de forskellige kilder til levende sædceller i hvert eksperiment er resultaterne imidlertid mindre reproducerbare, og udstyret er dyrt. Operatøren er modtagelig for radioaktiv skade, så denne metode er mindre rapporteret. 7. Indirekte immunofluorescens test: Når overfladen er bundet til antigenet, kan den binde til det andet antistof mærket med fluorescein, og andelen af ​​positiv sæd, der viser fluorescens, observeres under et fluorescensmikroskop. Fordi testen kræver methanolfiksering for at forårsage skade på membranen, udsættes det interne antigen, og antistoffet mod det indre antigen er allestedsnærværende hos de overflødige mennesker, så det falske positive er for høj og har ingen klinisk praktisk værdi. I de senere år er flydende fasekultur ikke blevet fikseret under eksperimentet, og anvendelsesværdien af ​​denne metode er blevet omdefineret. 8. Fin æginteraktion direkte inspektion (1) Sæd-gennemsigtig båndbinding eller gennemtrængningstest: Det humane æg opnået ved laparoskopi er bedre end sædcellerne efter inkubation under visse betingelser, og om sædcellen kan passere gennem zona pellucida ind i rummet omkring ægcellen, hvis sædcellen ikke kan bæres Gå forbi zona pellucida og overveje tilstedeværelsen af ​​et bremseantistof. Denne test forstyrres også af andre faktorer. (2) sperm-de-transparent hamsteræg-penetrationsprøve (SPA): den optimerede ekstraherede levende sædceller blandes med de hamsterfrie æg og observeres under et fasekontrastmikroskop. Hvis ægget indeholder et opsvulmet sædhoved (med hale) trænge igennem. SPA kan bruges til at bestemme: 1 befrugtningsevnen for sædceller med sædplasmantistoffer, 2 betydningen af ​​forskellige antistoffer til at forhindre graviditet. Denne test kan også påvirkes af en række faktorer. (to) påvisning af anti-sædcelleimmunitet Der er få undersøgelser om cellemedieret anti-sæd-immunitet, og hver konklusion er forskellig. Dyreforsøg og humane test har vist, at anti-sense cellulær immunitet kan være en af ​​årsagerne til infertilitet. Assaysne til påvisning af cellemedieret anti-sense immunrespons inkluderer lymfocyttransformationsassay, leukocytadhæsionsinhiberingsassay, leukocyt- eller makrofagmigrationsinhiberingsassay, hudtest og perifert blod leukocytprokoagulantaktivitetsassay. De anvendte antigener er forskellige, såsom frisk vasket sæd, frosset-optøet sæd, semi-oprenset sæd og lignende. Fordi de anvendte antigener på nuværende tidspunkt ikke er ensartede, er detektionsmetoderne forskellige, antallet af forskningstilfælde er lille, specificiteten af ​​hver metode er vanskelig at evaluere, og resultaterne er vanskelige at sammenligne. For det andet påvisning af anti-gennemsigtig immuninfertilitet Kilden til human zona pellucida er begrænset og vanskelig at opnå, men den humane zona pellucida og porcine zona pellucida har krydsantigenicitet. Derfor bruges porcine zona pellucida i stedet for det humane zona pellucida til at detektere zona pellucida-antistoffet i humant serum. Da tilstedeværelsen af ​​heterolog lektin (hovedsageligt IgM) i noget normalt humant serum forstyrrer de eksperimentelle resultater, er friske porcine røde blodlegemer påkrævet for at absorbere testserumet før testen. 1. Scotch-båndudfældningsreaktion: Når overfladen af ​​zona pellucida binder til antistoffet, ændres brydningsindekset under et lysmikroskop eller et mørkt feltmikroskop. Denne metode bruges mest til at identificere serum, har lav følsomhed og er vanskelig at bruge i klinisk praksis. 2. Radioimmunoassay: Efter radiomærket porcine zona pellucida-antigen og serum, der skal testes, isoleres antigen-antistofkomplekset, og dets radioaktivitet måles. Denne metode kan være kvantitativ, specifik og følsom, men på grund af radioaktiv skade, og rapporterne ikke er mange, er denne metode stadig vanskelig at bekræfte. 3. Indirekte immunofluorescensassay: Efter at det humane anti-Zona pellucida-antistof binder til overfladen af ​​porcineæget, binder det anti-humane immunoglobulin-antistof, der er mærket med fluorescein, til overfladen af ​​zona pellucida og udviser åbenlys peri-fluorescens under et fluorescensmikroskop. Denne lovs pålidelighed afhænger af andre objektive metoder. 4. ELISA- og BALISA-metode: den faste fase-bærer overtrækkes med det porcine zona pellucida-antigen, og serummet, det andet antistof og det underlag, der skal testes, tilsættes, og vaskingen udføres trin for trin, og til sidst bedømmes resultatet i henhold til farveændringen på underlaget. Denne metode kræver mindre prøvestørrelse, kræver intet specielt udstyr, er let at betjene, kan kvantitativt bestemme antistoffer og bestemme antistoftype og har god specificitet og følsomhed. BA-ELISA har fordelene ved en konventionel ELISA, og dens følsomhed forbedres meget. 5. Passiv hæmagglutineringsmetode Det oprensede porcine zona pellucida-antigen bruges til at overtrække de røde blodlegemer fra andre arter som antigenmål, og i nærvær af zona pellucida-antistoffet agglutinerer de sensibiliserede røde blodlegemer. Der er få rapporter om denne metode, og det er vanskeligt at evaluere dens følsomhed og specificitet. 6. Spermtransparent båndbinding eller penetrationstest: Denne metode kan være positiv, hvis der er et zona pellucida-antistof eller et antisperm-antistof. Da testen er stærkt påvirket af kulturmiljøfaktorerne, er forskningsresultaterne fra forskellige laboratorier vanskelige at sammenligne. Denne metode kan anvendes sammen med andre metoder til at supplere hinanden for at sikre pålideligheden af ​​resultaterne. Ikke egnet til mængden Undersøgelsen er mindre invasiv og har generelt ingen kontraindikationer. Bivirkninger og risici Denne test er mindre invasiv og medfører generelt ikke alvorlige komplikationer eller andre farer.