Molekylær hybridisering af nukleinsyrer

Molekylær hybridisering af nukleinsyrer er et kraftfuldt værktøj til kvalitativ eller kvantitativ detektion af specifikke RNA- eller DNA-sekvensfragmenter. Det blev udviklet under anvendelse af princippet om basekomplementering af nukleinsyremolekyler. Under betingelser, såsom opvarmning eller tilsætning af et denatureringsmiddel i et alkalisk miljø, forstyrres hydrogenbindinger mellem dobbeltstrenget DNA (denatureret), og dobbeltstrengene drejes i to enkeltstrenge. På dette tidspunkt tilsættes og inkuberes heterologt DNA eller RNA (enkeltstrenget) ved en bestemt ionstyrke og temperatur (genfoldning). Hvis visse regioner mellem heterologt DNA eller RNA har komplementære basesekvenser, så er renaturering Hybridiserede nukleinsyremolekyler kan dannes. Grundlæggende information Specialkategori: Onkologisk inspektionskategori: genetisk testning (DNA) Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: faste Analyseresultater: Under det normale: Normal værdi: ingen Over normal: Negativ: Negativ betyder normalt. positiv: Positive indikerer risikoen for fedtlever, hyperlipidæmi, hjerte-kar-og cerebrovaskulære sygdomme og tumorer. Tips: Vær opmærksom på de normale spisevaner før kontrol, vær opmærksom på personlig hygiejne. Normal værdi Type og andel af floraen i kroppen er normal, og den menneskelige krop er i en dynamisk balance. Klinisk betydning At screene for kroniske sygdomme som fede lever, fedme, hyperlipidæmi og hjerte-kar-sygdom forårsaget af langtidsintensivt arbejde hos hvide kraverarbejdere, for at identificere potentielle farer for sundhedsrisici tidligt og foreslå omfattende sundhedsforbedringsprogrammer. Unormale resultater af forskellige patogene mikrobielle infektioner og forskellige usunde symptomer. De mennesker, der har behov for undersøgelse, er personer med forskellige patogene mikroorganismer, tumorer eller kræftpatienter. Forholdsregler Upassende skare: Nej. Forbudt før undersøgelse: Vær opmærksom på normale spisevaner og vær opmærksom på personlig hygiejne. Krav til inspektion: Samarbejde aktivt med lægen. Inspektionsproces (1) rRNA-DNA-hybridisering: Når denatureret rRNA blandes med denatureret DNA, danner rRNA en hybrid dobbeltstreng med sin komplementære DNA-streng, og når rRNA-molekylet hybridiserer med det heterologe DNA, kan det også danne en komplementær dobbeltstreng i sin homologe region. Stabiliteten af ​​den hybride dobbeltstreng er positivt korreleret med dens homologi og er egnet til klassificering af bakteriel slægt og slægt. Den mest almindeligt anvendte metode er nitrocellulosemembranbindemetoden. (2) Nukleinsyreteknologi: Anvendelse af nukleinsyreteknologi til at påvise patogene mikrobielle nukleinsyrer er en vigtig udvikling inden for klinisk diagnostik Princippet er at bruge kendte sekvensspecifikke DNA-fragmenter (kaldet sonder) mærket med enzymer, kemiluminescerende stoffer, radionuklider eller biotin. Under visse betingelser hybridiserer sonden med nukleinsyren i prøven, der skal testes i overensstemmelse med princippet om basekomplementering, og hybridiseringssignalet detekteres for at identificere tilstedeværelsen eller fraværet af det tilsvarende patogene mikroorganismegen og dets molekylstørrelse. Almindeligt anvendte nukleinsyreteknikker er fastfasehybridisering (dot-hybridisering, in situ-hybridisering, sydlig blotting, nordisk blotting osv.) Og hybridiseringsmetoder i flydende fase. Nukleinsyreprober er egnede til direkte påvisning af patogene mikroorganismer i kliniske prøver og påvirkes ikke af ikke-patogene mikroorganismer. Derfor er det af stor betydning for påvisning af mikroorganismer, der ikke er isoleret eller dyrket eller vanskeligt at isolere og dyrke. Med den kontinuerlige forbedring af sondeetiketten kommercialiseres detektionskit, og betjeningen er enklere og lettere. Ikke egnet til mængden Tabu folk: Nej. Bivirkninger og risici Det medfører generelt ikke særlige komplikationer og farer.