Peberrod peroxidase-anti-peberrods peroxidase metode

Egenskaberne ved PAP-komplekset er relateret til fremstillingsmetoden for reagenset. HRP bruges først til at immunisere dyr til at producere højtiter, højspecifikke anti-HRP-antistoffer, og derefter bruges HRP til at binde dem, fordi HRP-anti-HRP-komplekset fremstillet in vitro adskiller sig fra andre antigen-antistofreaktioner . Når antigenet er lidt overskydende, deltager alle anti-HRP-antistoffer i dannelsen af ​​opløselige PAP-komplekser, hvilket kun efterlader lidt frit HRP. De fleste antigen-antistofreaktioner kræver imidlertid et absolut overskud af antigen for at danne et opløseligt kompleks. Formen af ​​PAP-komplekset er ret stabil og påvirkes ikke af mængden af ​​antigen Uanset den indledende tilsætning af antigener og antistoffer er HRP / anti-HRP-forholdet i det resulterende PAP-kompleks for det meste 3; 2. Centrifugalsedimentering anvendes. Metoderne til væskefasediffusion og elektronmikroskopobservation viste, at PAP-komplekset har en femkantet ringstruktur, tre hjørner er HRP, og de andre to hjørner er anti-HRP-antistoffer med en molekylmasse på 400-430 kDa, og denne struktur er meget stabil.