Anti-glomerular kældermembranantistof

Anti-glomerular kældermembranantistof er en retikulær struktur sammensat af indre og ydre gennemsigtige lag af glomerulære kapillærer og et mellemliggende tæt lag. Den mest almindelige metode til påvisning af GBM-antistoffer er IIF-metoden (indirekte immunofluorescensmetode) med nyrevæv som antigenet. Dens fluorescenskarakteristik er, at den viser typisk kronbladslignende, plet-lignende eller granulær farvning ved den glomerulære kældermembran. IIF-metoden kan give falske positive resultater. ELISA og radioimmunoassay ved anvendelse af kollagenase-fordøjet rå GBM som et antigen er også tilgængelige, og dets følsomhed og specificitet afhænger af antigenets renhed. Det bruges ofte i klinisk praksis til at påvise indirekte immunofluorescens. Princip for indirekte immunofluorescensmetode: Mærk fluorescein på det tilsvarende antistof og reagerer direkte med det tilsvarende antigen. I det første trin tilsættes et ukendt umærket antistof (prøve, der skal testes) til en kendt antigenprøve, og inkuberes ved 37 ° C i 30 minutter i en våd kasse for fuldstændigt at binde antigenet og antistoffet og vask derefter for at fjerne det ubundne antistof. I det andet trin tilsættes fluorescerende mærkede antiglobulinantistoffer eller anti-IgG og IgM antistoffer. Hvis en antigen-antistofreaktion forekommer i det første trin, vil det mærkede antiglobulin-antistof yderligere binde til det antigenbundne antistof, som kan identificere ukendte antistoffer.