Test d'immunofluorescence indirecte du paludisme

Il existe de nombreuses méthodes de diagnostic sérologique du paludisme, et cette section présente uniquement le test d'immunofluorescence indirecte couramment utilisé. Personnes devant être examinées: personnes manifestant des frissons, tremblements corporels, teint pâle, lèvres cyanotiques, peau sèche, irritabilité, maux de tête, inconfort, anorexie et autres symptômes. Informations de base Classification de spécialiste: Examen des maladies infectieuses et classification: examen du sang Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Valeur normale: Non Au-dessus de la normale: Négatif: Négatif <1:20, indiquant l'absence d'infection par le paludisme. Positif: Le taux de détection positif de la méthode des anticorps fluorescents est généralement supérieur au taux de détection du protozoaire. Le titre en anticorps chez les patients atteints de paludisme à falciparum est égal ou supérieur à 1:80 et peut être considéré comme un marqueur des porteurs ou d’une infection récente par le paludisme. Conseils: Ne consommez pas d'aliments trop gras et riches en protéines la veille de la prise de sang, évitez de boire excessivement. La teneur en alcool dans le sang affectera directement les résultats du test.Après 20 heures la veille de l'examen médical, le jeûne doit être commencé pendant 12 heures pour éviter d'affecter les résultats du test. Valeur normale Négatif <1:20. Signification clinique Le taux de détection positif de la méthode des anticorps fluorescents est généralement supérieur au taux de détection du protozoaire. Le titre en anticorps chez les patients atteints de paludisme à falciparum est égal ou supérieur à 1:80 et peut être considéré comme un marqueur des porteurs ou d’une infection récente par le paludisme. Des résultats positifs peuvent être des maladies: paludisme, paludisme cérébral, paludisme pulmonaire, paludisme Avant inspection: 1, ne pas manger trop gras, des aliments riches en protéines la veille du sang, pour éviter de boire trop. La teneur en alcool dans le sang affecte directement les résultats du test. 2. Après 20 heures la veille de l'examen médical, vous devez commencer à jeûner pendant 12 heures pour éviter d'affecter les résultats du test. 3, devrait se détendre lors de la prise de sang, pour éviter la contraction des vaisseaux sanguins causée par la peur, augmenter la difficulté de la collecte de sang. Après inspection: 1. Une fois le sang prélevé, une compression locale est requise au trou d'épingle pendant 3 à 5 minutes pour arrêter le saignement. Remarque: Ne frottez pas, afin de ne pas causer d'hématome sous-cutané. 2, le temps de pressage devrait être suffisant. Il y a une différence de temps de coagulation pour chaque personne, et certaines personnes ont besoin d'un peu plus de temps pour coaguler. Par conséquent, lorsque la surface de la peau semble saigner, la compression est immédiatement arrêtée et le sang peut s'infiltrer dans la peau en raison d'une hémostase incomplète. Par conséquent, le temps de compression est plus long pour arrêter complètement le saignement. S'il y a une tendance à saigner, le temps de compression doit être prolongé. 3, après le prélèvement de sang, des symptômes d'évanouissement tels que: vertiges, vertiges, fatigue, etc. doivent immédiatement s'allonger, boire une petite quantité de sirop, puis se soumettre à un examen physique une fois que les symptômes ont été soulagés. 4. En cas de congestion localisée, utilisez une serviette chaude après 24 heures pour favoriser l'absorption. Processus d'inspection 1. Principe du test d'immunofluorescence indirecte pour le paludisme L'anticorps anti-Plasmodium dans le sérum à tester est combiné à l'antigène Plasmodium sur la tranche de sang, suivi par l'anticorps anti-IgG humaine marqué par fluorescence, qui agit sur l'IgG humaine sur la tranche de sang et présente une fluorescence au site de l'antigène. 2, réactifs (1) Le film de sang antigénique est un film de sang mince de Plasmodium cynomolgus et un film de sang mince de Plasmodium falciparum. Des instituts de recherche professionnels sont disponibles. Conserver dans un congélateur à 4 ° C ou à basse température. (2) IgG anti-humain marqué par fluorescence, disponible dans le commerce dans le pays. 3, la méthode d'opération (1) Le sérum a été recueilli par un procédé conventionnel ou une tache circulaire a été appliquée sur le papier filtre avec un tube d'un tube en verre (fer) de 1,2 cm de diamètre. Le sang est prélevé dans l'oreille ou le doigt du sujet et rempli d'un cercle. Le volume de sang est d'environ 20 µl (environ 10 µl de sérum). Après séchage, le numéro est placé dans un sachet en plastique scellé contenant du dessiccant et transporté au laboratoire à 4 ° C. Économisez six mois, vous pouvez conserver -20 ° C pendant 2 ans. Pendant le test, les gouttes de sang séchées ont été coupées dans les puits de la plaque de réaction, 0,2 ml (pH 7,2) de tampon phosphate 0,01 mol / L ont été ajoutés et la dilution de sérum correspondant à 1:20 a été obtenue par trempage pendant une nuit à 4 ° C. (2) Retirez la pellicule de sang antigénique du réfrigérateur et séchez-la immédiatement à l'aide d'un ventilateur électrique. Divisez chaque feuille d'antigène en plusieurs petites cellules avec un crayon spécial. Essayez 1 échantillon ou 1 titre par cellule et ajoutez 1 sérum par cellule. Gouttes. Un sérum de référence positif et des témoins vierges PBS étaient nécessaires pour chaque lot d'essais. Immédiatement après avoir ajouté du sérum, le mélange a été transféré dans une boîte humide et, après une incubation à 37 ° C pendant 30 minutes, il a été lentement lavé avec du PBS à 0,01 mol / L (pH 7,2), puis plongé dans un cylindre de PBS pendant 5 à 10 minutes. (3) Diluez l'anticorps fluorescent anti-IgG humain dilué à 1:10 avec 0,01 mol / L de PBS (pH 7,2) et placez-le dans la chambre humide à 37 ° C pendant 30 min.Après le lavage avec la même méthode, ajoutez du glycérol et du PBS à chaque cellule. Une quantité égale de solution mélangée ou d'eau distillée a été appliquée sur les feuilles de couverture et les résultats de la réaction ont été examinés au microscope à fluorescence. (4) Interprétation des résultats: l’intensité de la fluorescence et la clarté de la structure du cytoplasme schizonte et trophozoïte sont distinguées, aucune fluorescence n’est (-), la fluorescence est faible, la structure morphologique n’est pas claire (±), la fluorescence est faible et la structure morphologique Il est toujours clair (+) et est ensuite divisé en (2+) en (4+) en fonction de l'augmentation de la luminosité de la fluorescence et de la définition de la structure. En règle générale, l'intensité de la fluorescence (+) ou plus est jugée positive à une dilution sérique de 1:20. Ne convient pas à la foule Ceux qui n'ont pas d'indication pour l'examen ne devraient pas faire cette vérification. Effets indésirables et risques Généralement pas de complications et de dommages.