Activité télomérase

Les télomères sont une structure particulière à la fin d'un chromosome chez les eucaryotes et consistent en une séquence répétitive d'ADN riche en guanine et ses protéines associées. Les télomères sont essentiels à la stabilité des extrémités des chromosomes. Le maintien de la longueur des télomères nécessite la présence d'une activité télomérase. Les cytokines endogènes jouent un rôle important dans la survie à long terme des cellules immortalisées et des cellules tumorales. La télomérase est un complexe d'ARN et de protéines, une transcriptase inverse spécifique à l'ARN, capable de synthétiser l'ADN télomérique à l'extrémité du chromosome à partir de son propre ARN pour compenser le télomère lors de la division cellulaire. Perte d’ADN, maintien de la longueur des télomères, maintien de l’équilibre dynamique des chromosomes et immortalisation des cellules. Depuis la mise en place de méthodes de détection de la télomérase hautement sensibles et basées sur la PCR, la télomérase a suscité un grand intérêt. Il a été constaté que la télomérase avait une relation étroite avec la prolifération, la différenciation et l’immortalité cellulaires, et qu’elle était devenue l’un des points chauds de la recherche fondamentale sur la tumeur et le vieillissement. Informations de base Classification de spécialiste: Classification d'examen d'oncologie: examen immunitaire Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: pas le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Valeur normale: Non Au-dessus de la normale: Négatif: La valeur normale est négative. Positif: (1) Les patients atteints d'un cancer du foie présentent un taux de télomérase plus élevé (85%). (2) La télomérase est fortement exprimée dans la plupart des tissus tumoraux malins, tels que le neuroblastome (94%), le cancer du sein (93%), le cancer colorectal (93%), le cancer gastrique (85%) et le cancer de la prostate. (84%), cancer du poumon (80%), etc. L’activité de la télomérase est étroitement liée au stade clinique et au pronostic de la tumeur. (3) Il peut exister une faible activité de la télomérase dans quelques lésions bénignes (telles que l'hépatite, la cirrhose, le méningiome bénin, etc.). Conseils: Il peut y avoir une faible activité de la télomérase dans quelques lésions bénignes (telles que l'hépatite, la cirrhose, le méningiome bénin, etc.). Valeur normale Négatif. Signification clinique 1, les patients atteints d'un cancer du foie ont un taux positif de télomérase plus élevé (85%), les taux d'AFP positifs pour l'activité télomérase sont significativement plus élevés que l'activité négative pour la télomérase. L'activité de la télomérase n'était pas associée de manière significative à la taille de la tumeur, à son grade histologique et à ses métastases La télomérase peut être un marqueur tumoral pour le diagnostic du cancer du foie. 2. La télomérase est fortement exprimée dans la plupart des tissus tumoraux malins, tels que le neuroblastome (94%), le cancer du sein (93%), le cancer colorectal (93%), le cancer gastrique (85%) et le cancer de la prostate ( Cancer du poumon (80%), etc. L’activité de la télomérase est étroitement liée au stade clinique et au pronostic de la tumeur. Par conséquent, la télomérase est actuellement le marqueur tumoral le plus spécifique et le plus universel. 3. Il peut y avoir une faible activité de la télomérase dans quelques lésions bénignes (telles que l'hépatite, la cirrhose, le méningiome bénin, etc.). Des résultats positifs peuvent être des maladies: neuroblastome, cancer colorectal, cancer du sein, cancer de l'estomac, cancer du foie, cancer de la prostate, cancer du côlon, carcinome à cellules rénales, cancer de la thyroïde Ces dernières années, "l'hypothèse du télomère, télomérase" a été confirmée par de plus en plus de recherches, utilisant le niveau d'activité de la télomérase comme biomarqueur et indicateur pronostique pour le diagnostic de tumeur. 1. Faites attention à éviter la contamination en laboratoire et les faux positifs ou faux négatifs. 2. Faites attention à éliminer l'inhibiteur de la polymérase contenu dans l'échantillon de tissu afin de réduire les faux négatifs. 3. La technologie d'analyse par scintillation, la méthode ELISA et la méthode d'hybridation in situ sont plus fiables que la méthode TRAP. Processus d'inspection Vérifier le fonctionnement: L'ADN génomique était de 0,1 μg; un tampon contenant 50 mmol / L de chlorure de potassium, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / L de chlorure de magnésium, 100 μg de gélatine; chaque amorce était de 0,25 μmol / L; dATP, dCTP, dGTP Le dTIP était de 200 µmol / L chacun, l'ADN polymérase de 2,5 U et le volume final de 100 µl. Ajoutez quelques gouttes de paraffine liquide pour éviter l’évaporation. Cycle de réaction: 1 dénaturation: 90 ° C 30 ~ 60 s; 2 températures d'hybridation des amorces et des matrices: 40 ~ 60 ° C 30 ~ 60 s; 3 extension: 72 ° C 1-2 min. Après des cycles répétés de 30 à 40 fois, la dernière extension de l’amorce à 7 ° 72 ° C a été interrompue pendant 7 minutes. Après élimination de la paraffine liquide, le produit est disponible pour analyse. Après électrophorèse sur gel d'agarose, il a été coloré au bromure d'éthidium et une bande fluorescente de longueur d'amplification attendue a été observée par irradiation avec une lampe UV. Le produit peut également être hybridé à un transfert de Southern ou à un transfert de tache avec une sonde oligonucléotidique radiomarquée ou non. Il est plus pratique d’utiliser l’instrument automatique de PCR Après avoir ajouté le réactif de réaction, la matrice ADN et la Taq-ADN polymérase dans l’éprouvette, il est mis dans la procédure ajustée, c’est-à-dire la température, le temps et l’extension de la température, du temps et du nombre de cycles correspondants. La réaction est effectuée dans un instrument automatique pour obtenir un produit d'amplification satisfaisant. Ne convient pas à la foule Ceux qui ne disposent pas d'un test approprié ne devraient pas être testés. Effets indésirables et risques 1. Infection: veillez à ce que l'opération de prélèvement sanguin soit aseptique, évitez la contamination de l'eau et des autres pièces sur le site de collecte de sang afin d'éviter une infection locale. 2, saignements: après que le sang ait reçu un temps de compression complet, en particulier une coagulopathie, une tendance au saignement, afin d’éviter un suintement sous-cutané local, des ecchymoses et un gonflement.