Méthode de peroxydase de raifort-anti-peroxydase de raifort

Les caractéristiques du complexe PAP sont liées à la méthode de préparation du réactif. Le HRP est d'abord utilisé pour immuniser les animaux pour produire des anticorps anti-HRP à titre élevé et hautement spécifiques, puis le HRP est utilisé pour les lier, car le complexe anti-HRP HRP préparé in vitro est différent des autres réactions antigène-anticorps . Lorsque l'antigène est légèrement en excès, tous les anticorps anti-HRP participent à la formation de complexes PAP solubles, ne laissant qu'une petite HRP libre. Cependant, la plupart des réactions antigène-anticorps nécessitent un excès absolu d'antigène pour former un complexe soluble. La forme du complexe PAP est assez stable et n'est pas affectée par la quantité d'antigène. Indépendamment de l'addition initiale d'antigènes et d'anticorps, le rapport HRP / anti-HRP du complexe PAP résultant est principalement de 3; 2. La sédimentation centrifuge est appliquée. Les méthodes de diffusion en phase liquide et d'observation au microscope électronique ont montré que le complexe PAP a une structure annulaire pentagonale, trois coins sont HRP, et les deux autres coins sont des anticorps anti-HRP avec une masse moléculaire de 400-430 kDa, et cette structure est très stable.