β-N-アセチルグルコサミニダーゼ

β-N-アセチルグルコサミニダーゼ（NAG）は、β-N-アセチルグルコサミニドを加水分解し、β-N-アセチルガラクトサミンも加水分解します。 この酵素は、さまざまな組織、臓器、体液、および血球に広く存在し、リソソームの酸性加水分解酵素です。 測定方法は比色分析と蛍光分析です。 基本情報 専門家分類：尿検査分類：生化学検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食 分析結果： 通常以下： 珍しい。 通常値： 血清β-N-アセチルグルコサミニダーゼ：15.14-27.94 U / L 通常以上： 腎尿細管疾患の重金属（水銀、鉛、カドミウムなど）および薬物による腎障害、虚血、低酸素、失血、ショックなどにより、NAG活性が増加する可能性があります。 マイナス： ポジティブ： ヒント：全身の栄養状態に応じて、食事には牛乳、卵、果物、豆乳などが与えられます。 正常値 1、p-ニトロフェノール比色法：血清NAG21.54±6.4U / L、尿NAGは通常分布、中央値は9.13U / gクレアチニン、95パーセンタイルの上限は16.10U / gクレアチニン。 2.蛍光法： 成人血清：9.94±2.O7U / L 成人の尿：6.39±3.19 U / LCre。 臨床的意義 血液および尿NAG活性の測定は、腎実質病変の変化、特に急性損傷および活動性疾患に敏感であり、主に早期腎損傷のモニタリングおよび疾患の観察に使用されます。 1、腎尿細管疾患の重金属（水銀、鉛、カドミウムなど）および薬物誘発腎障害、虚血、低酸素、失血、ショックなどは、NAG活性の増加を引き起こす可能性があります。 2、ネフローゼ症候群の尿中NAGはしばしば有意に増加し、寛解期間は減少し、再発時の急速な回復は、臨床的観察の指標として使用することができます。 糸球体腎炎の急性期は大きく異なりますが、変化は腎尿細管損傷の変化よりも小さくなります。 3、急性および慢性腎lone腎炎尿NAG上昇の尿路感染症診断の場所は、単純な膀胱炎と区別できます。 早期上部尿路感染症の診断に使用できます。 4、腎移植拒絶反応早期NAGを監視する腎移植拒絶反応は、尿タンパク質、血清クレアチニン、クレアチニンクリアランスよりも敏感に増加させることができます。 5、糖尿病性腎症の早期診断、糖尿病性腎症、尿NAGの上昇、この疾患の早期診断は尿アルブミンおよびβ2-ミクログロブリンよりも優れています。 高い結果は病気かもしれません： ネフローゼ症候群、尿路感染症 （1）p-ニトロフェノール比色法： 1基質のp-ニトロフェノールは、50°Cで24時間精製および予備成形する必要があります。 濃度を10 mmol / L NaOHで0.04 mmol / Lに調整し、IFCC標準、Aλmax= 0.7316〜0.7388、およびEλmax= 18380±90（25°C）に従って、吸収曲線を狭帯域分光光度計、λmax= 401 nmでスキャンしました。 2基質の溶解度は小さいので、調製するときは、適量のpH 4.6バッファーを含むペーストに調整し、バッファーを必要量まで徐々に加えます。 3測定結果が超線形範囲にある場合、標本を生理食塩水で希釈して再テストし、結果に希釈係数を掛けます。 4尿酵素濃度は尿量に大きく影響されるため、24時間尿量を維持する必要があります。 酵素の排泄率がNAG / gクレアチニンの比によって計算される場合、つまり、尿の濃度または希釈の影響を受けず、24時間尿を残す必要はありません。 （2）蛍光法： 1 NAGを測定するための蛍光法には、高感度で尿の影響を受けない家庭用キットがあります。 2また、Shanghai No.3 Analytical Instrument Factoryと併用して、930蛍光光度計、励起フィルター360、および発光フィルター（400 + 450）コンポジットを生成し、満足のいく結果を得ることができます。 3酵素反応液の各成分の濃度は、1.33 mmol / L基質、20 mmol / Lクエン酸、および432 mmol / L Na2HPOです。 4試薬に使用する溶媒は蒸留水、基質には4-MU、BSAには酵素を含まないか、50°Cで2時間加熱する必要があります。 5 NAGの血清は4°Cで数時間から数日間安定であり、-20°Cで数ヶ月安定です。 尿検体は4℃で1週間安定しており、クエン酸塩抗凝固血漿も使用されました。 6β-N-アセチルグルコサミニドは、2つの酵素によって触媒されます。1つはβ-N-アセチルグルコサミニダーゼ（EC 3.2.1.30）、もう1つはβ-N-アセチルグルコシダーゼ（EC3）です。 .2.1.52）精製酵素についてはEC3.2.1.30またはEC3.2.1.52のみを定義できます。 国内の文献でしばしば言及されているNAGは、基質に対する酵素の特異性ではなく、使用される基質にちなんで厳密に命名されています。 したがって、現在の外国の文献はしばしばβ-N-アセチルグルコサミニダーゼと呼ばれています。 検査プロセス （1）波長405 nm、光路1 cm、蒸留水ゼロでのp-ニトロフェノール比色混合、各チューブの吸光度を読み取り、（AU-AC）の差で標準曲線を確認します。 1基質のp-ニトロフェノールは、50°Cで24時間精製および予備成形する必要があります。 濃度を10 mmol / L NaOHで0.04 mmol / Lに調整し、IFCC標準、Aλmax= 0.7316〜0.7388、およびEλmax= 18380±90（25°C）に従って、吸収曲線を狭帯域分光光度計、λmax= 401 nmでスキャンしました。 p-ニトロフェノールによるモル吸光係数 2基質の溶解度は小さいので、調製するときは、適量のpH 4.6バッファーを含むペーストに調整し、バッファーを必要量まで徐々に加えます。 3測定結果が超線形範囲にある場合、標本を生理食塩水で希釈して再テストし、結果に希釈係数を掛けます。 4尿酵素濃度は尿量に大きく影響されるため、24時間尿量を維持する必要があります。 酵素の排泄率がNAG / gクレアチニンの比によって計算される場合、つまり、尿の濃度または希釈の影響を受けず、24時間尿を残す必要はありません。 （2）蛍光分光光度法：まず、ウシ血清アルブミン（BSA）を含まないバッファーで血清または尿を希釈します。 混合、励起波長は364 nm、発光波長は448 nmで、液体ゼロ調整を停止し、6μmol/ L 4-MUチューブの蛍光強度を100に調整し、ブランクチューブと測定チューブの蛍光強度をそれぞれ測定します。 1 NAGを測定するための蛍光法には、高感度で尿の影響を受けない家庭用キットがあります。 2また、Shanghai No.3 Analytical Instrument Factoryと併用して、930蛍光光度計、励起フィルター360、および発光フィルター（400 + 450）コンポジットを生成し、満足のいく結果を得ることができます。 3酵素反応液の各成分の濃度は、1.33 mmol / L基質、20 mmol / Lクエン酸、および432 mmol / L Na2HPOです。 4試薬に使用する溶媒は蒸留水、基質には4-MU、BSAには酵素を含まないか、50°Cで2時間加熱する必要があります。 5 NAGの血清は4°Cで数時間から数日間安定であり、-20°Cで数ヶ月安定です。 尿検体は4℃で1週間安定しており、クエン酸塩抗凝固血漿も使用されました。 6β-N-アセチルグルコサミニドは、2つの酵素によって触媒されます。1つはβ-N-アセチルグルコサミニダーゼ（EC 3.2.1.30）、もう1つはβ-N-アセチルグルコシダーゼ（EC3）です。 .2.1.52）精製酵素についてはEC3.2.1.30またはEC3.2.1.52のみを定義できます。 国内の文献でしばしば言及されているNAGは、基質に対する酵素の特異性ではなく、使用される基質にちなんで厳密に命名されています。 したがって、現在の外国の文献はしばしばβ-N-アセチルグルコサミニダーゼと呼ばれています。