羊水細胞培養染色体検査

有害な化学物質、X線被ばく、環境要因、妊娠の進行、近親者などが原因で、妊娠中の染色体の数、形態、構造、および組み合わせの変動によって引き起こされる疾患につながります。 羊水細胞の染色体検査は、染色体疾患の出生前診断に非常に特定の重要性を持っています。 基本情報 スペシャリストカテゴリ：母体検査チェックカテゴリ：遺伝子検査（DNA） 該当する性別：女性が断食しているかどうか：断食 分析結果： 通常以下： 通常値： いや 通常以上： マイナス： 染色体の総数：46。 常染色体：22ペア（番号1-22）。 性染色体：男性の場合はXY、女性の場合はXX。 男性の核型：XY、46。 女性の核型：46、XX。 ポジティブ： 通常の値と異なる結果は陽性であり、先天性奇形または他の先天性疾患を示唆しています。 ヒント：染色体検査では、妊娠16〜20週目に羊水標本を採取する必要があります。 正常値 染色体の総数は46です。 22組の常染色体（1〜22の番号）。 性染色体の男性はXY、女性はXXです。 男性の核型46、XY。 女性の核型46、XX。 臨床的意義 ダウン症候群（21トリソミー）、18トリソミー、38トリソミー、21トリソミー、先天性精巣形成不全症候群、XXY合成などの異常な染色体数サイン、ターナー症候群、Xトリソミー症候群、多発X体症候群。 4p部分単量体症候群、5​​p部分単量体症候群、9p部分単量体症候群、9q部分単量体症候群、21q部分単量体症候群、22q部分単量体症候群、22q部分トリソミーなどの異常な染色体構造症候群など 肯定的な結果は病気である可能性があります： 先天性卵巣形成不全、小児脳性麻痺、小児ダウン症候群、小児脳性麻痺、小児パスカル症候群、ディゴルガー症候群、小児ニャー症候群、小児先天性精巣発育不完全な遺伝病の考慮事項 1.染色体検査では、妊娠16-20週に羊水標本を採取する必要があります。 2、これらの先天性遺伝疾患は、多くの場合症候群として現れ、転座、逆位、およびその他の量的および構造的異常を欠き、増加しています。 複数の奇形、成長遅滞、精神遅滞などのほとんどの場合、胎児の流産、早産または死産につながります。 検査プロセス （1）妊娠16〜20週間に羊水15〜30 mlを取り、1000 r / mlで10分間遠心します。 （2）過剰な上清を捨て、羊水1 mlと沈殿した細胞を残し、細胞懸濁液に静かに分散させます。 （3）25 mlの正方形培養フラスコに移し、pH 6.5から6.8（ペニシリン100 U / ml、ストレプトマイシン100μg/ mlを含む）の培地3 mlおよび子牛血清1 mlを加え、37°C​​インキュベーターでインキュベートします。 （4）培養7〜10日後に、多数の線維芽細胞様または類上皮細胞コロニーが観察されました。 この時点で新鮮な培地を交換できます。 （5）細胞コロニーが断片に拡大し、半透明の円形分裂細胞が多数ある場合、コルヒチンを添加して最終濃度を0.1-0.3μg/ mlにし、37°C​​インキュベーターで5-6時間培養します。 （上記の手順はすべて無菌条件下で実行されます）。 収穫基準：繊維芽細胞を主な種類として、細胞の成長を1個;接眼レンズを10倍、客観的観察を20倍、成長中の細胞クローンは1つ以上の完全な視野をカバーします; 3 10個以上の半透明を見る丸い細胞と10個以上の二重の丸い明るい分裂細胞。 （6）細胞が活発に成長していない場合、成長サイクルが均一ではない、または細胞が老化しており、収穫基準に達していない場合、元のボトルで継代培養を継続できます。 方法：滅菌条件下で、最初に培養液を注ぎ、数滴の2.5 g / L滅菌トリプシン溶液を加え、混合物を振って注ぎました。 さらに、5〜10滴のトリプシンを加え、37℃で約5分間穏やかに振とうして、接着細胞を脱落させた。 子牛血清を含む4mlの新鮮な培地を加え、培養物を37℃で4〜5時間静置した。 培地を注意深く交換し、培養を続けます継代後3〜5日で収穫できます。 （7）培養液を目盛り付き遠心管に移し、ED-TA-トリプシン溶液1 mlをフラスコに加え、37°C​​のインキュベーターに5分間置き、接着細胞をエルボピペットで洗います（2.5 g /も使用可能） Lトリプシン溶液消化）。 ボトルの壁から剥離した細胞を遠心管に注ぎ、元の培養液相と混合し、培養フラスコを少量の温生理食塩水で洗浄し、洗浄した細胞も遠心管に注ぎ、1000 r / minで10分間遠心分離しました。 （8）上清を吸引し、37°C​​で予熱した0.075 mol / L KCl低張液3〜5 mlを加え、37°C​​で10〜15分間設定します。 （9）固定前、固定、および準備は、末梢血細胞染色体標本の準備方法と同じです。 群衆に適していない 1.妊娠中に中絶の兆候がありました。 2.体温が37.5°Cを超える場合。 3.胎盤の早期剥離、腹部感染および化膿。 副作用とリスク （1）母体外傷：腹壁血腫子宮漿膜下血腫に起因する穿刺針刺し傷血管。 時々、羊水が穿刺穴から母体の血液循環に入り、羊水塞栓症を引き起こします。 穿刺前に膀胱が空にならず、膀胱が負傷した。 （2）胎児、胎盤、および臍帯の損傷：穿刺針は胎児に損傷を与え、出血を引き起こす可能性があり、胎盤および臍帯も出血または血腫を引き起こす可能性があります。 したがって、出血性羊水を服用する場合、出血の原因を特定する必要があります。 あなたが胎児からのものであると疑われる場合、胎児の心臓に耳を傾け続ける必要があります。 （3）羊水漏れ：術後羊水がピンホールから漏れ、羊水が少なすぎて胎児の発育に影響を与え、流産や早産を引き起こします。 （4）流産または早産：流産または早産の発生率は0.1％-0.2％であり、手術後1週間以内に発生することが多く、穿刺後でも、膜の早期破裂が早産につながります。 （5）子宮内感染：手術後に母体の発熱が起こることがあります。 子宮内感染は、異常な胎児の発育、または胎児の死さえ引き起こす可能性があります。 したがって、羊水穿刺は厳密に無菌でなければなりません。