混合リンパ球培養アッセイ

混合リンパ球培養（MLC）は、受容体とドナーの主要組織適合性抗原（HLA抗原）との適合性の程度を判定するための試験方法であり、臓器移植前の組織マッチングによく使用されます。 混合リンパ球培養は、ドナーリンパ球とレシピエントリンパ球の双方向混合培養、または混合リンパ球に対するドナーリンパ球の不活性化であり、細胞応答の程度はドナーとレシピエントの適合性の程度と負の相関があります。 基本情報 専門家分類：成長および発達チェック分類：免疫学的検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食をしない ヒント：拒否率の高い人はこのチェックを行うべきではありません。 正常値 形態学的カウント方法の変換率は10％未満です。 同位体計数法は、cpmを比較してP> 0.05を取得します。 臨床的意義 異常な結果： 腎臓移植では、生体ドナーの変換率は10％未満である必要があり、死体ドナーの変換率は10％を超える必要があります。 低反応マッチングは、同じ実験バッチでのみ使用できます。 10％のリンパ球変換率は、異なる身体の組織間で互換性があります。 リンパ球混合培養検査は、患者の免疫状態を検出するために使用されます。 Tリンパ球の数が減少すると、変換率も低下します。 適切なドナーを選択するための臓器および骨髄移植のマッチング方法として使用できます。 変換率が高い場合、受信者と受信者の差に使用されます。 変換率は低く、移植後の成功率は高いです。 人を検出する必要がある： 免疫力が低下しているか、行方不明になっている人。 注意事項 検査時：この検査は臓器移植のドナーをスクリーニングする方法として使用できますが、変換率が低い人は成功率が高く、変換率が高い人は成功率が低くなります。 検査プロセス 1.ドナーリンパ球の調製： 新鮮な末梢静脈血を、1：1の比で1.077の比重のリンパ球分離溶液を含む遠心管に加え、液面に穏やかに適用し、中間のハロリンパ球層を吸収するために2000 r / minで20分間遠心しました。トリパンブルー染色、プレートカウントのカウント、細胞密度を2×109 / Lに調整し、3本のチューブに分け、別々に遠心分離し、沈殿物を残す。各チューブにマイトマイシン250μLを加える（最終濃度50 mg / L） 1.75 mLの生理食塩水、37°C​​の水浴で40分間、生理食塩水で2回洗浄します。100mL / Lのウシ胎児血清を含むRPMI1640溶液で細胞密度を1×10 10 / Lに調整します。抗体を加えて抗原をブロックします。 2.受容体リンパ球の調製： 新鮮な末梢静脈血を、1：1の比で1.077の比重のリンパ球分離溶液を含む遠心管に加え、液面に穏やかに適用し、中間のハロリンパ球層を吸収するために2000 r / minで20分間遠心しました。 2回洗浄し、120 mL / Lのウシ胎児血清を含むRPMI1640培地で細胞密度を1×1010 / Lに調整します。 3.混合リンパ球培養： 調製したRおよびDを次のように96ウェルプレートに追加し、50 mL / L CO2インキュベーターで37°Cで24時間培養しました。グループA：R50μL+ D 50μL;グループB：R50μL+ D50μL+ IL 2精製およびmAb 15μLの中和;グループC：R50μL+ IL？2精製および中和されたmAb15μL;グループD：R50μL。各グループには3つのウェルがあり、ブランクコントロールグループは100μLのRPMI1640培地でした。 群衆に適していない 人に適していない：拒否率の高い人。 副作用とリスク 関連する合併症や危険性はありません。