ラット赤血球ガーランド形成アッセイ

Bリンパ球は抗体合成に関与し、体液性免疫応答のエフェクター細胞です。 B細胞の表面には、膜表面免疫グロブリン（SmIg）、Fc受容体、および補体受容体があります。 抗原抗体複合体のFc部分に強く結合します。 ニワトリまたはヒツジの赤血球が選択され、対応する抗赤血球抗体と一緒にEA複合体に感作されますB細胞のFc受容体は、EAリースと呼ばれるEAと花輪を形成できます。 EA複合体が補体に追加され、B細胞の補体受容体に結合すると、EACロゼットが形成されます。 B細胞の表面にはマウスRBC受容体があり、マウスRBCに結合してマウス赤血球ロゼット（M-RFC）を形成できます。これは主にIgM受容体を含むB細胞に結合し、M-RFCはほとんどがナイーブB細胞です。 この検査は、主にBリンパ球の数を検出し、体液性免疫のレベルを決定するために使用されます。 基本情報 専門家分類：検査分類：血液検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食 分析結果： 通常以下： しかし、MEロゼットの割合は、無ガンマグロブリン血症と重度の複合免疫不全を伴わずに減少または消失しました。 通常値： 女性の末梢血におけるMEの割合：5％〜10％ 通常以上： 慢性リンパ性白血病患者の末梢血におけるME花輪の割合は、60％から80％と高い。 マイナス： ポジティブ： ヒント：チェックするときはリラックスしてください。 正常値 結果200個のリンパ球が顕微鏡下でカウントされ、3つ以上のマウス赤血球を吸着したリンパ球はBリンパ球であり、マウス細胞花輪（MEリース）の割合が計算されました。 正常なヒト末梢血中のMEロゼットの割合は5％〜10％です。 臨床的意義 慢性リンパ性白血病患者の末梢血中のME花輪の割合は60％から80％と高いですが、ガンマグロブリン血症、重度の複合免疫不全などはなく、ME花輪の割合は減少または存在しません。 低い結果が疾患である可能性があります： 小児のX連鎖非ガンマグロブリン 血症 、小児の二次免疫不全の高い発生率は 疾患である可能性があります： 慢性リンパ性白血病の予防措置 （1）インキュベーション時間：MEの割合は、インキュベーション時間とともに徐々に増加しました.1時間のインキュベーション後、MEの割合は7.4±3.1％であり、18時間後にインキュベーションは18.3±3.8％に増加しました.72時間のインキュベーション後、花輪の数が増加しました。徐々に3.4±7.1％に低下しました。 （2）培養液：Tc199培養液の使用に最適であり、結果と再現性が良好です。 Hepes-buffered RPMl1640培地でリンパ球と赤血球を洗浄および再懸濁すると、細胞が凝集して大きな細胞を形成する傾向があり、信頼性の低い結果が得られました。 （3）リンパ球に対する赤血球の最適な比率が約35：1、比率が> 60：1、または比率が<25：1の場合、MEリースの数を減らすことができます。 （4）MRBC培養液の保存：Alsever溶液では、4°Cで1週間保存されたMRBCは依然として安定した数の花輪を生成しますが、MRBCはPBS、生理食塩水、またはTc199培地に保存され、保存時間を延長し、花輪の数を増やします徐々に、72時間の保管後、小さな細胞または花輪を形成する細胞のみが見られます。 検査プロセス （1）上記のマウス赤血球懸濁液1 mlを取り、生理食塩水3 mlを加え、よく混合し、1500r / min、10分間遠心分離し、合計3回洗浄し、最後に生理食塩水（約1.4×108セル/ ml）。 （2）1.5 mlのヘパリンを抗凝固のために採取し、リンパ球をリンパ球の層別化によって分離し、20％子牛血清ハンク溶液で細胞濃度を2×10 7 / mlに調整しました。 （3）0.1 mlのリンパ球懸濁液を取り、等量の1％マウス赤血球懸濁液を加え、混合し、37°C​​の水浴に10分間、500 r /分、10分間遠心分離し、4°Cの冷蔵庫を2〜3時間置きます。 （4）0.05mlの上清をピペットで取り、2g / Lの青色溶液を1滴加え、静かに回転させて混合し、混合物1滴をスライドに取り、細胞が沈んだ後、カバースリップを覆います。高倍率の顕微鏡で確認してください。 群衆に適していない 不適切な群衆はありません。 副作用とリスク これは安全なチェックであり、身体に無害です。