혈청 지단백질 및 혈청 지단백질 전기영동

지단백질 전기 영동은 주로 고지 단백 혈증의 분류에 사용되며, 관상 동맥 질환의 혈중 지질 상태를 이해하고 임상 진단 및 치료를보다 잘 안내하는 데 도움이됩니다. 기본 정보 전문가 분류 : 심혈관 검사 분류 : 생화학 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 분석 결과 : 정상 이하 : 저지 단백 혈증 등에서 발견됩니다. 정상 값 : 초 저밀도 지단백질 : 0.06-0.3g / L 저밀도 지단백질 : 0-7g / L 고밀도 지단백질 (수컷) : 0.41-0.63g / L 고밀도 청? .42-0.68g / L 정상 이상 : 원발성 고지혈증 등에서 발견됩니다. 부정적 : 긍정적 : 팁 : 검사 전에식이 요법이 가볍고 알코올 섭취가 금지되어 있습니다. 아침에 공복 상태를 확인하십시오. 정상 값 셀룰로오스 아세테이트 막 전기 영동 우유 엉겅퀴 입자 0g / L (0mg / dl); 매우 저밀도 지단백질 0.06 ~ 0.3g / L (6 ~ 30mg / dl); 저밀도 지단백질 <7g / L (<700mg / dl); 고밀도 지단백질 : 수컷 0.52 ± 0.11g / L (43 ± 18mg / dl); 여성 0.55 ± 0.13g / L (47 ± 2mg / dl). 임상 적 의의 1, 증가 : 일차 고지혈증에서 볼 수 있습니다. 2, 낮음 : 저지 단백 혈증에서 나타남. 고지혈증, 고지 단백 혈증 II 형, 관상 동맥 심장 질환 고려 사항 1. 샘플 : 지단백질은 신선하고 고정되지 않은 혈청에서 분리 할 수 ​​있습니다. 섬유소원 밴드가 나타나기 때문에 혈장은 지단백질 전기 영동에 적합하지 않습니다. 2. 명확한 분리 성분을 가진 지단백질 프로파일은 정확한 해석을위한 전제 조건입니다. 이러한 조건이 잘 충족되면 지단백질 전기 영동 및 참조 방법 (초 원심 분리)이 매우 일관 될 수 있습니다. 각 성분의 정밀도는 다르며 변동 계수 (일반적으로 5 % 미만)로 추정됩니다. 3. 때때로, 알파-리포 프로테인이 사라지고 및 / 또는 좁은 알파-리포 프로테인 밴드가 나타날 것이다. 유리 지방산이 들어 있기 때문입니다. 알파-리포 단백질에 축적되면 이들 입자가 동일한 전하를 갖게됩니다. α- 영역의 밀도가 증가함에 따라 결과는 높다. 침전 기술과 비교하여, 정량적 지단백질 전기 영동은 비용이 많이 든다. 검사 과정 정맥혈 채혈 직후, 테스트 작업 : 1. 전기 영동 탱크에 버퍼를 추가하고 양쪽 탱크의 버퍼를 조정하여 동일한 평면에 만듭니다. 2. 셀룰로오스 아세테이트 필름의 제조 : 셀룰로오스 아세테이트 필름 (2cm × 8cm)을 취하고 거친 표면의 1.5cm (음의 한쪽면)에 연필로 수평선을 그려 점선으로 표시합니다. 양극 및 음극의 번호를 매기고 지시 한 후, 막을 바르 비투 레이트-바르 비탈 나트륨 완충 용액에 침지시키고, 충분히 포화 된 후 (보통 20 분), 깨끗한 여과지를 샌드위치하여 과량의 완충액을 제거 하였다. 3. 셀룰로스 아세테이트 필름 모발을 전기 영동 탱크 홀더에 부착하고 곧게 펴십시오. 마이크로 피펫이있는 비용 혈성 혈청 3 ~ 5μl 피펫을 수평선의 수평선을 따라가합니다 전기 영동 패턴에서 단백질 밴드의 변형을 피하기 위해 필름 가장자리에서 일정 거리를 유지해야합니다. 빛의면이 위를 향한 상태에서 전기 영동 탱크 브래킷에 평평하게 붙이고 필름의 두 끝을 이중 필터 종이 또는 4 층의 거즈로 버퍼에 연결하고 잠시 기다리십시오. 4, 전원을 켜고, 셀룰로오스 아세테이트 필름의 양극과 음극에주의를 기울이고 잘못 연결하지 마십시오. 전압 90 ~ 150V, 전류 0.4 ~ 0.6mA / cm (다른 전기 영동 필요 전압, 전류가 다를 수 있으며 유연해야 함), 여름 전원 45 분, 겨울 전원 켜기 시간이 약간 더 길다, 약 60 분, 전기 영동 구역 확장 약 25 ~ 35mm가 될 수 있습니다. 5, 염색 : 전원이 완료된 후, 필름을 제거하고 Lichunhong S 염색 용액 또는 아미노 블랙 10B 염색 용액에 직접 담그고 5-10 분 동안 (알부민 영역에 의해) 염색 한 다음, 헹굼 용액에 남아있는 물을 헹구십시오. 배경이 무색이 될 때까지 염색하십시오. 6, 정량적 : 1 비색법 : 헹굼 된 필름을 지우고 염색 된 단백질 영역을 해당 튜브에 자르고 알부민 튜브에 0.6ml / L 수산화 나트륨 6ml를 첨가하십시오 (2를 곱한 흡광도 계산), 나머지 각 튜브에 3ml를 넣고 여러 번 흔든 다음 37 ° C 물 탱크에 20 분 동안 두어 색 침출을 만듭니다. 아미노 블랙 10B 염색 각 튜브의 흡광도를 분광 광도계를 사용하여 620 nm에서 판독 한 후, 각 튜브의 함량을 계산 하였다 (동시 블랭크 튜브 제어). Lichunhong S가 염색 될 때, 침출 물은 0.1 mol / L 수산화 나트륨으로 처리되었으며, 그 양은 상기와 동일 하였다. 10 분 후, 알부민 튜브에 0.6ml의 400ml / L 아세트산을 첨가하고 (흡수에 2를 곱함) 다른 튜브에 0.3ml를 첨가하여 일부 수산화 나트륨을 중화시켜 색상을 더 깊게 만듭니다. 필요한 경우 원심 분리하고 상청액을 취합니다. 각 튜브의 흡광도를 분광 광도계 (동시 블랭크 대조군)에 의해 520 nm에서 판독 한 후, 각각의 함량을 계산 하였다. 2 농도계 스캐닝 방법 : A. 투명성 : 투명 액체가 희석되어 투명 결과에 영향을 미치지 않도록 필름에 헹굼 액체를 흡입하고, 투명 액체에 필름을 2 ~ 3 분 동안 담근 후 롤링 방식으로 평평하게합니다. 깨끗하고 흠집이없는 유리 슬라이드 (기포를 만들지 않음), 슬라이드를 잠시 세우고 과도한 투명한 액체를 제거하고 90-100 ° C의 일정한 온도의 오븐에 넣고 10-15 분 동안 굽고 제거하고 실온으로 식 힙니다. 이 방법으로 투명한 단백질 영역은 명확하고 필름은 평평하며 직접 스캔하여 영구적으로 보존 할 수 있습니다 (수소 나프탈렌 또는 액체 파라핀으로 투명 함. 헹군 필름은 건조하고 투명해야하며 투명 필름을 보관할 수 없습니다. 길고 주름지기 쉬운). 2 스캔 정량 : 투명 필름은 스캔 분석을 위해 완전 자동 농도계 또는 기타 농도계 어두운 상자에 배치됩니다. 군중에게 적합하지 않음 부적절한 사람들 : 일반적으로 적합하지 않은 사람들은 없습니다. 부작용 및 위험 1, 국소 피하 출혈 : 혈액 수집 후 충분한 시간 동안, 특히 출혈 경향이있는 사람들은 혈액 응고로 인해 피하가 and거나 멍이 들지 않도록 충분한 시간 동안 눌러야합니다. 2, 감염 : 정맥 혈액 수집 중 무균 작동에주의를 기울여 국소 감염을 일으키지 않도록하십시오.