림프구 독성 시험

특정 효과기 T 림프구가 시험관 내에서 표적 세포와 접촉 될 때, 이들은 림프구 독성이라 불리는 표적 세포를 파괴하고 용해시키는 성질을 나타낼 수있다. 표적 세포는 종양 세포 또는 다른 조직 세포 일 수있다. 림프구가 표적 세포를 죽이는 방법은 직접적으로 죽이거나 림 포카 인을 생산함으로써 표적 세포를 파괴 할 수 있습니다. 이것은 림프구 독성 시험입니다. CTL, NK, LAK 등과 같은 일부 림프구는 표적 세포에 직접적인 사멸 효과를 가지며, 검출 될 이펙터 세포의 성질에 따라, 종양 세포, 이식 공여자 세포 등과 같은 상응하는 표적 세포가 선택 될 수있다. 이 실험은 종양 면역, 이식 거부, 바이러스 감염 등에 관한 연구에 사용될 수 있습니다. 방법은 크롬 방출 방법, 락 테이트 탈수소 효소 방출 방법 및 아 pop 토 시스 세포 분석을 포함한다. 기본 정보 전문가 분류 : 종양학 검사 분류 : 면역 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 분석 결과 : 정상 이하 : 정상 값 : 아니요 정상 이상 : 부정적 : 정상입니다. 긍정적 : 현재 관련 데이터가 없습니다. 팁 : 정상적인 사고 방식을 유지하십시오. 정상 값 형태 학적 시험 방법을 시험 군과 대조군 사이에 비교 하였다 (P <0.05). 125I 또는 ​​51Cr 방법 P> 0.05. 임상 적 의의 비정상 결과 :이 검사는 시험관 내 종양 환자의 세포 면역 측정 지표로 사용될 수 있으며, 면역 세포가 종양 세포를 죽이는 능력을 측정하여 종양 환자의 예후를 판단 할 수 있으며 림프구의 기능적 소집단을 확인할 수도 있습니다. 검사 할 모집단 : 림프구 독성 교차 검사는 보체 의존성 세포 독성 검사 (CDC)라고도합니다. 장기 이식 수용자에 기증자가 있는지 또는 수용자에 대한 기증자의 HLA 항체가 있는지 확인하고 장기 이식 전에 CDC 검사를 수행해야합니다. 주의 사항 (1) 종양 세포를 공격하는 대상 림프구의 능력을 측정함에있어서, 대상의 종양 세포 및 림프구를 실험군에 첨가하고, 종양 표적 세포 및 배양 배지를 대조군에 첨가 하였다. 종양 항원이나 면역원, 치료제 등의 다른 시료가 세포 면역에 관여하는 경우, 세 번째 그룹을 추가해야하며,이 테스트 그룹에서 먼저 림프구를 검사 할 샘플과 반응시킨 후 세척 한 후 관찰합니다. 감 작화 된 림프구의 종양 표적 세포에 대한 세포 독성 효과. 현재 처음 두 그룹이 제어 그룹이되었습니다. (2) 표적 세포 및 림프구의 생존율은 최적 상태, 일반적으로> 90 %이어야한다. (3) 배양액에 첨가 된 송아지 혈청은 먼저 독성 테스트를 받아야합니다. (4) 접종 된 표적 세포 및 림프구의 수는 정확해야한다. (5) 실험 그룹과 제어 그룹은 오류를 줄이기 위해 동일한 보드에 배치해야합니다. (6) 배양액의 pH는 6.8 내지 7.2 인 것이 가장 바람직하다. 검사 과정 (1) 표적 세포의 접종 : 점착성으로 성장할 수있는 종양 세포를 선택하고, 행크 용액으로 세척하고, 2 내지 3 분 동안 2.5 g / L 트립신으로 소화시키고, 트립신 용액 (세포가 여전히 병벽에 부착되어 있음)을 붓고 행크를 사용한다. 세포를 가볍게 3 회 세척하고 행크 용액을 부었다. 접착 성 세포를 10 % 내지 20 % 송아지 혈청을 함유하는 RPMI1640 용액으로 세척하고, 세포 펠릿을 100- 메쉬 필터를 통한 여과에 의해 제거하여 1x10 6 / ml의 단일 종양 세포 현탁액을 제조하고, 세포 현탁액을 점 적기로 피펫 팅 하였다. 40- 웰 배양 플레이트, 웰당 1 방울 (약 100-150 세포)에 떨어 뜨리고, 플레이트를 5 시간 CO2 인큐베이터에 37 ℃에서 20 시간 동안 두었다. 배양 플레이트를 꺼내어 배양액을 제거하고, 라이트 염색 후 10 개의 웰당 평균 부착 성 종양 세포 수를 세었다. 두 그룹의 차이가 1/3 이상이면 오차가 너무 커서 사용하기에 오차가 크지 않았다. 배양 플레이트를 공식적으로 테스트 할 수 있습니다. (2) 림프구 분리 : 대상체의 헤파린 항응고제 3ml를 취해 수 크로스-디아제팜 침출액으로 림프구를 분리 한 다음 행크 용액으로 3 번 씻은 다음 RPMI1640 용액 (2 ~ 3)과 혼합합니다. ) × 105 / ml 세포 현탁액. (3) 세포 독성 시험 : 림프구와 표적 세포를 200 : 1의 비율로 혼합하고, (2 ~ 3) x 104 림프구 (0.1 ml 부피)를 각 웰에 첨가하고, 웰당 약 20 % 송아지 혈청을 첨가한다. 0.1 ml의 RPMI 1640 용액을 37 ℃ 5 % CO 2 인큐베이터에 40 시간 동안 두었다. 배양 플레이트를 꺼내어 배양액을 제거하고, 라이트 염색 후, 플레이트 바닥에 잔존하는 표적 세포의 수를 현미경으로 세었다. 군중에게 적합하지 않음 금기는 없습니다. 부작용 및 위험 관련된 합병증과 위험은 없습니다.