PHA 림프구 형질전환 분석

PHA 림프구 형질 전환 시험은 T 림프구 및 미토 겐이 시험관 내에서 공동 배양되고 일부 작은 림프구가 미성숙 모체 세포로 변형되어 유사 분열되는 형태 학적 및 생화학 적 변화이다. 방법. 기본 정보 전문가 분류 : 종양학 검사 분류 : 면역 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 팁 : 건강한 식단에주의를 기울이고 기분을 좋게 유지하십시오. 정상 값 림프구 수 계산 200, 림프 모구 식별 (정상 림프구, 맑은 핵 막, 느슨한 핵 플라크, 미세 핵, 명백한 핵, 풍부한 세포질, 호염기구)보다 2-4 배 이상 많음, 전이 림프구 (볼륨의 변화가 적고 위에서 언급 한 명백한 핵 변화 만), 작은 림프구 (적혈구보다 약간 크며 조밀 한 핵 염색질, 핵이 없음), 전환율이 계산되었습니다. 정상적인 피부과 전환율은 58 %보다 큽니다. 임상 적 의의 PHA 림프구 형질 전환율의 감소는 세포 면역 기능의 감소에 대한 반응이다. 이 검사, 피부과는 주로 질병 분류 (예 : 나병), 질병 판단 (예 : 피부 악성 종양), 약물 효능 관찰, 면역 결핍 및 알레르기 성 피부 질환에 대한 일부 연구에 사용됩니다. 비정상적인 결과 면역 기능 저하로 인한 다양한 증상. 검사가 필요한 사람은 나병이나 피부 악성 증상으로 고통받는 것으로 의심됩니다. 주의 사항 1. 매체의 구성은 전환율에 큰 영향을 미치며 유효 기간에주의하십시오. 2. 송아지 혈청은 사용하기 전에 비활성화해야합니다. 3. 배양시 가스가 충분한 지 확인하십시오 일반적으로 10ml 배양 병의 총 액체 양은 2ml를 초과하지 않아야합니다. 4. 과도한 PHA 용량은 세포에 유독하고, 너무 작아서 림프구 변환을 자극 할 수 없으므로 PHA 전환 반응의 용량은 테스트 전에 결정해야합니다. 5. 오염을 방지하기 위해 실험에서 엄격한 무균 작업을 수행해야합니다. 시험 전 금기 : 건강한 식단에주의를 기울이고 기분을 좋게 유지하십시오. 검사 요구 사항 : 의사와 적극적으로 협조하십시오. 검사 과정 운영 방법 : 1. 무균 헤파린 항응고제 0.lml, 1.8ml 세포 배양 배지 추가, 1000μg / m1 PHA0.1m1 추가, PHA가없는 컨트롤 튜브, 37 ° C에서 세포 배양, 3d 동안 5 % CO2, 1 일 1 회 진탕 타임즈. 배양 종료시, 대부분의 상청액을 버리고, 8.5 g / L NH4Cl 4 ml를 첨가하여 혼합하고, 37 ℃ 수조에 10 분 동안 두었다. 3.2500r / 분에서 10 분 동안 원심 분리하고, 상청액을 버리고, 5ml의 고정 제를 펠렛에 첨가하고, 실온에서 5 분 동안 방치한다. 4.2500 r / min에서 10 분 동안 원심 분리하고, 상청액을 버리고, 정제를 위해 펠릿 세포 0.2 ml를 남겨두고, 빠르게 건조시킨다. 5. 김사 염색 용액을 10-20 분 동안 염색하고, 물로 세척하고 건조시켰다. 6. 오일 미러 200 림프구에서 형질 전환 된 세포의 수를 세고 변환율을 계산합니다. 결과는 다음과 같이 판단됩니다. 림프 모세포의 형태 학적 기준 : 핵의 크기, 핵 대 세포질의 비, 세포질의 염색 및 핵의 구조 및 핵의 존재 또는 부재. (1) 성숙한 작은 림프구 : 배양되지 않은 작은 림프구의 크기는 6-8 μm이고, 핵 염색은 치밀하고, 핵은 없으며, 핵 대 세포질의 비는 크며, 세포질은 온화한 호염기구로 염색됩니다. (2) 과도 림프구 : 작은 림프구보다 크며, 약 10 ~ 20μm, 핵 염색이 조밀하지만, 핵소체가 나타나는데, 이는 성숙한 작은 림프구의 확인을위한 핵심입니다. (3) 림프구 : 세포 부피가 약 20 ~ 30μm 증가하고 모양이 깔끔하지 않으며 종종 작은 돌출, 핵 확대, 핵 염색이 느슨하고 1 ~ 2 개의 핵이 있으며 세포질이 넓어지며 종종 세포질이 있습니다. 빈 거품. (4) 기타 세포 : 예를 들어, 72 시간 동안 호중구 배양 후 대부분의 붕괴 또는 사망은 단편화이다. 2. 림프구 형질 전환율의 계산 상기 분류에서 머리, 신체 및 꼬리를 검사하고, 백분율을 계산하기 위해 200 개의 림프구를 계수 하였다. 형질 전환 된 림프구는 림프 모세포 및 전이성 림프구를 포함하고, 형질 전환되지 않은 림프구는 성숙한 작은 림프구를 지칭한다. 정상적인 상황에서, PHA- 유도 림프구 형질 전환률은 60 내지 80 %이고, 50 내지 60 %이면 낮고, 50 % 이하이면 감소된다. 결과에 따라 올바른 판단이 이루어집니다. 군중에게 적합하지 않음 부적절한 군중 : 일시적으로 알 수 없음 부작용 및 위험 관련된 합병증과 위험은 없습니다.