Mierikswortel peroxidase-anti-mierikswortel peroxidase methode

De kenmerken van het PAP-complex zijn gerelateerd aan de bereidingsmethode van het reagens. HRP wordt eerst gebruikt om dieren te immuniseren om zeer titer, zeer specifieke anti-HRP-antilichamen te produceren, en vervolgens wordt HRP gebruikt om ze te binden, omdat het in vitro bereide HRP-anti-HRP-complex verschilt van andere antigeen-antilichaamreacties . Wanneer het antigeen enigszins overmatig is, nemen alle anti-HRP-antilichamen deel aan de vorming van oplosbare PAP-complexen, waardoor slechts een beetje vrij HRP overblijft. De meeste antigeen-antilichaamreacties vereisen echter een absolute overmaat antigeen om een ​​oplosbaar complex te vormen. De vorm van het PAP-complex is vrij stabiel en wordt niet beïnvloed door de hoeveelheid antigeen. Ongeacht de initiële toevoeging van antigenen en antilichamen, is de HRP / anti-HRP-verhouding van het resulterende PAP-complex meestal 3; 2. Centrifugale sedimentatie wordt toegepast. De methoden van vloeistoffase diffusie en elektronenmicroscoopobservatie toonden aan dat het PAP-complex een vijfhoekige ringstructuur heeft, drie hoeken zijn HRP en de andere twee hoeken zijn anti-HRP-antilichamen met een moleculaire massa van 400-430 kDa, en deze structuur is zeer stabiel.