dehydrogenaza mleczan łzowa

LDH (EC 1.1.1.27) i MDH (EC 1.1.1.37) we łzach pochodzą głównie z nabłonka rogówki oka. Ich stężenie we łzach jest około 20 razy większe niż enzymu w surowicy. Łza LDH zawiera głównie podjednostkę M, o najwyższej zawartości LDH5 i LDH4. Izoenzym MDH łez można oddzielić od MDH i MDHm przez elektroforezę błony octu. Łzy zdrowych ludzi to głównie MDH. Podstawowe informacje Kategoria specjalistyczna: Okulistyka Klasyfikacja: Badanie biochemiczne Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: nie na czczo Wyniki analizy: Poniżej normy: Bakteryjne owrzodzenie rogówki i uszkodzenie chemiczne rogówki i spojówki. Wartość normalna: Dehydrogenaza mleczanowa łez: 1,29-9,02U / l Powyżej normalnego: Uszkodzenie nabłonka spojówkowego rogówki. Negatywne: Pozytywne: Wskazówki: Przetrzyj oczy dłońmi, spowoduje to infekcje oczu, pogorszenie stanu i pogorszenie wyników kontroli. Wartość normalna LDH1,29 ~ 9,02U / L; Izoenzym LDH LDH 10,66 ± 0,51%; Aktywność MDH wynosi 0,25 ~ 2,2U / l; MDH izoenzym MDH 80% ~ 98,1%; MDHm> 20% jest nieprawidłowy; LDH / MDH <69 lat ma 3,96 ± 0,7; > 70 lat 4,55 ± 0,51. Znaczenie kliniczne Nieprawidłowe wyniki W przypadku bakteryjnego owrzodzenia rogówki i uszkodzenia chemicznego rogówki i spojówki, aktywność LDH w łzach spadła. Współczynnik izoenzymu LDH H / M i MDHm zwiększono w różnych stopniach, ale MDHm może odzwierciedlać uszkodzenie rogówki i stopień uszkodzenia. Na przykład we wrzodach rogówki i podejrzewanym suchym zapaleniu rogówki i spojówki (KCS) MDHm wzrosło, a stosunek H / M LDH łez nie zmienił się znacząco. Określenie stosunku izoenzymu LDH do LDH / MDH we łzach przyczynia się do diagnostyki różnicowej jaglicy i przewlekłego zapalenia spojówek. Stosunek H / M LDH w obu łzach znacznie spadł, ale w jaglicy stosunek LDH / MDH łez nie zmienił się, a podjednostka M LDH wzrosła znacznie. Konieczność sprawdzenia diagnozy choroby rogówki w populacji. Niskie wyniki mogą być chorobą: środki ostrożności dotyczące bakteryjnego owrzodzenia rogówki Nieodpowiedni ludzie: generalnie brak specjalnej populacji. Tabu przed badaniem: pocieranie oczu rękami, spowoduje to infekcję oka, pogorszenie stanu i wpływ na efekt inspekcji. Wymagania dotyczące kontroli: Sprawdź zgodnie z instrukcjami lekarza. Proces kontroli 1, metoda kolorymetryczna: (1) Mleczan potasu i mleczan sodu można również stosować jako substraty LDH, ale ponieważ są one roztworami wodnymi, ich zawartość nie jest wystarczająco dokładna, a niewłaściwe przechowywanie może spowodować, że kwas ketonowy będzie hamował reakcje enzymatyczne. Mleczan litu jest stały, stabilny i łatwy do ważenia. (2) Oprócz buforu dietanoloaminowego można również użyć buforu Tris lub pirofosforanowego, aby uniknąć hamowania LDH przez bufor glicynowy w oryginalnej metodzie Jinshi, a wskaźnik dodatniej detekcji jest poprawiony. (3) Kolorymetryczny powinien zostać zakończony w ciągu 5 do 15 minut, w przeciwnym razie absorbancja spadnie. (4) Gdy wynik wynosi> 500 U, próbkę można rozcieńczyć solą fizjologiczną, a następnie zmierzyć, a wynik należy pomnożyć przez współczynnik rozcieńczenia. 2. Metoda ciągłego monitorowania: (1) Próbka nie powinna podlegać hemolizie. Gdy hemoliza osiąga Hb0,8 g / l, aktywność LDH można zwiększyć o 58%. (2) Próbki przechowywano w temperaturze pokojowej (25 ° C), aktywność enzymu była stabilna w ciągu 2 dni, aktywność enzymu w lodówce zmniejszyła się, a wszystkie LDH3 i LDH4 zostały inaktywowane w temperaturze -20 ° C przez noc. (3) Zadowalające wyniki z surowicą lub heparyną w osoczu przeciwzakrzepowym szczawian może hamować aktywność LDH. (4) Po rekonstytucji roztwór staje się mętny lub początkową absorbancję> 0,5 należy odrzucić. (5) Aktywność dehydrogenazy mleczanowej można zmierzyć zarówno pozytywną, jak i negatywną dwukierunkową reakcją, ale przedział odniesienia zmienia się w zależności od temperatury reakcji, substratu i stężenia buforu. Stosując kwas mlekowy i NAD jako substraty, monitorowano szybkość wzrostu absorbancji przy 340 nm jako reakcję dodatnią, wyrażoną jako LD-L; pirogronian i NADH zastosowano jako substraty, a szybkość spadku absorbancji przy 340 nm monitorowano jako reakcję odwrotną, wyrażoną jako LD-P. W porównaniu z dwiema metodami reakcji dodatniej i ujemnej, głównymi zaletami metody LD-L są: A. Stabilność dodatniej cieczy substratu reakcji jest większa niż stabilność reakcji odwrotnej Poprzednia lodówka może być przechowywana przez ponad 6 miesięcy, a druga to tylko kilka dni; Liniowy zakres odpowiedzi szybkości (wykres absorbancji w funkcji czasu monitorowania t) jest szerszy; C. powtarzalność jest lepsza niż LD-P. Ponieważ szybkość reakcji do tyłu jest szybsza niż szybkość reakcji do przodu, jej wartość odniesienia jest około dwa razy większa niż LD-L. Nie nadaje się dla tłumu Nie Działania niepożądane i ryzyko Nie