Test kruchości osmotycznej krwinek czerwonych (ROFT)

Ten test mierzy odporność czerwonych krwinek na różne stężenia roztworów hipotonicznych. W hipotonicznym roztworze soli woda przenika przez błonę komórkową, powodując, że czerwone krwinki stopniowo puchną i niszczą. Przepuszczalność czerwonych krwinek zależy głównie od stosunku pola powierzchni do objętości czerwonych krwinek. Pole powierzchni jest duże, a objętość jest mała, a odporność na roztwór soli jest duża, i na odwrót, odporność jest niewielka (kruchość jest zwiększona). Sferyczny stosunek powierzchni / objętości czerwonych krwinek jest zmniejszony, co jest szczególnie wrażliwe na roztwory hipotoniczne, a kruchość jest znacznie zwiększona. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: klasyfikacja badań sercowo-naczyniowych: badanie krwi Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: nie na czczo Przypomnienie: Odczynniki muszą być dokładnie przygotowane. Odczynniki należy wymieniać raz lub dwa razy w miesiącu. Stężenie NaCl można zwiększyć z powodu parowania wody. Wartość normalna Hemolizę rozpoczęto przy 4,2-4,6 g / l NaCl (71,8-77,6 mmol / l). Całkowita hemoliza 2,8-3,29 g / l NaCl (47,9–54,7 mmola / l). Znaczenie kliniczne 1. Wyniki testu zwiększonej kruchości są porównywane z normalną kontrolą i znaczące jest zwiększenie o 0,04%. Występuje w dziedzicznej sferocytozie, autoimmunologicznej niedokrwistości hemolitycznej ze sferocytozą, także w dziedzicznej eliptycznej policytemii iu niektórych pacjentów z dziedziczną policytemią. 2. Redukcja kruchości: Występuje w niedokrwistości z niedoboru żelaza, niedokrwistości śródziemnomorskiej, niedokrwistości z komórek łańcuchowych, docelowej policytemii, hemoglobinemii, splenektomii, chorobach wątroby, żółtaczce obturacyjnej. Środki ostrożności (1) Dla każdego badania powinna istnieć normalna kontrola, a różnica między normalną kontrolą a osobnikiem wynosi 0,04%, co jest istotne klinicznie. (2) Wymagane jest dokładne przygotowanie odczynników Odczynniki należy wymieniać raz lub dwa razy w miesiącu, a stężenie NaCl można zwiększyć z powodu parowania wody. (3) Zapobiegaj uszkodzeniu czerwonych krwinek podczas pobierania krwi. (4) W celu usunięcia krwi fibryny, kwasu cytrynowego lub szczawianu należy zastosować antykoagulant Heparynę, która może zwiększyć siłę jonową i wpłynąć na ciśnienie osmotyczne. (5) Jeżeli wyniki początkowej i całkowitej hemolizy są trudne do oceny, można to zaobserwować po odwirowaniu. (6) Kruchość osmotyczna talasemii jest zmniejszona i należy zbadać niskie stężenie roztworu NaCl. (7) W przypadku ciężkiej niedokrwistości RBC należy sformułować w 50% stężeniu, a żółtaczka powinna przemyć czerwone krwinki. (8) Próbki krwi nie powinny być przechowywane w lodówce dłużej niż 6 godzin. Proces kontroli 1. Przygotuj różne stężenia roztworu NaCl. Najpierw skonfiguruj 100 ml 1% hipotonicznego roztworu NaCl, a następnie przejdź do 12 czystych probówek o tej samej średnicy, ponumerowanych na stojaku na probówki, dodaj 1% roztwór NaCl i wodę destylowaną do każdej probówki zgodnie z poniższą tabelą, wymieszaj i wymieszaj, skonfiguruj 12 Hipotoniczny roztwór NaCl o różnych stężeniach od 0,68% do 0,24%. 2. Roztwór 0,85% NaCl i 1,9% roztwór mocznika oddzielono oddzielnie. Weź kolejne 3 małe probówki, odpowiednio o numerach 13 ~ 15, zawierające 2,5 ml 0,85% roztworu NaCl. 1,9% roztwór mocznika i woda destylowana. 3, jod, dezynfekcja alkoholem skóry sterylnym suchym, wilgotnym heparyną iniektorem 2 cm od środka żyły łokciowej, zainteresowana, z czego 1 ml dodano do probówki, pozostałą krew dodano 1 kroplę do każdej z 15 probówek, Wymieszaj delikatnie. 4. Obserwuj zmiany 13, 14 i 15. Pozostałe 12 probówek pozostawiono do odstania w temperaturze pokojowej na 1 godzinę, a następnie zaobserwowano kolor i przezroczystość mieszaniny. (1) Ciecz w probówce całkowicie zmieniła się w przezroczysty czerwony kolor, co wskazuje, że wszystkie krwinki czerwone zostały rozbite i zostały całkowicie hemolizowane. (2) Dolna warstwa cieczy w probówce jest mętna na czerwono, a górna warstwa jest przezroczysta na czerwono, co wskazuje, że część pakietu syfonu jest zepsuta, co nazywa się niepełną hemolizą. (3) Dolna warstwa probówki jest mętnie czerwona, a górna warstwa jest bezbarwna i przezroczysta, co wskazuje, że czerwone krwinki nie są uszkodzone. 5. Zapisz wyniki testu. Obejmuje to nazwę podmiotu i zakres kruchości osmotycznej erytrocytów (tj. Stężenie NaCl o minimalnej oporności i stężenie NaCl o maksymalnej oporności) oraz wyniki 13-15 probówek. 6. Weź 1 kroplę każdej z 6. probówki i 13. mieszaniny probówek na szklany szkiełko, przykryj szkiełko nakrywkowe i obserwuj morfologię czerwonych krwinek pod mikroskopem. Nie nadaje się dla tłumu Bez tabu. Działania niepożądane i ryzyko Bez komplikacji.