Test tworzenia girlandy erytrocytów szczura

Limfocyty B biorą udział w syntezie przeciwciał i są komórkami efektorowymi humoralnej odpowiedzi immunologicznej. Powierzchnia komórek B przenosi immunoglobulinę na powierzchni błony (SmIg), receptory Fc i receptory dopełniacza. Wiąże się silnie z częścią Fc kompleksu antygen-przeciwciało. Kurczaka lub owiec erytrocyty wybiera się i uwrażliwia na kompleksy EA z odpowiednimi przeciwciałami przeciw erytrocytom. Receptor Fc komórek B może tworzyć girlandę z EA, która nazywa się wieńcem EA. Jeśli kompleks EA zostanie dodany w celu uzupełnienia i wiąże się z receptorem dopełniacza komórek B, powstaje rozeta EAC. Na powierzchni komórek B znajdują się mysie receptory RBC, które mogą wiązać się z mysimi RBC, tworząc mysie rozety erytrocytów (M-RFC), które wiążą się głównie z komórkami B z receptorami IgM, a M-RFC są głównie naiwnymi komórkami B. Ten test służy głównie do wykrywania liczby limfocytów B i określenia poziomu odporności humoralnej. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: klasyfikacja egzaminacyjna: badanie krwi Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: post Wyniki analizy: Poniżej normy: Jednak odsetek rozet ME był zmniejszony lub nieobecny bez agammaglobulinemii i ciężkiego złożonego niedoboru odporności. Wartość normalna: Odsetek ME w kobiecej krwi obwodowej: 5% -10% Powyżej normalnego: Odsetek wieńców ME we krwi obwodowej pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową wynosi od 60% do 80%. Negatywne: Pozytywne: Wskazówki: zrelaksuj się podczas sprawdzania. Wartość normalna Wyniki Pod mikroskopem zliczono 200 limfocytów. Limfocytami, które zaadsorbowały 3 lub więcej mysich czerwonych krwinek, były limfocyty B i obliczono procent girland komórek mysich (wieńce ME). Procent rozety ME w normalnej ludzkiej krwi obwodowej wynosi od 5% do 10%. Znaczenie kliniczne Odsetek wieńców ME we krwi obwodowej pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową wynosi aż 60% do 80%, ale nie ma gamma globulinemii, ciężkiego złożonego niedoboru odporności itp., A odsetek girland ME jest zmniejszony lub nieobecny. Niskie wyniki mogą być chorobami: sprzężona z chromosomem X brak gammaglobulinemii u dzieci, wysoka częstość wtórnego niedoboru odporności u dzieci może być chorobą: środki ostrożności w przypadku przewlekłej białaczki limfocytowej (1) Czas inkubacji: Procent ME wzrastał stopniowo wraz z czasem inkubacji Po inkubacji przez 1 h procent ME wynosił 7,4 ± 3,1%, a inkubację zwiększono do 18,3 ± 3,8% po 18 h. Po 72 h inkubacji wzrosła liczba wieńców. Stopniowo spadał do 3,4 ± 7,1%. (2) Roztwór do hodowli: Najbardziej odpowiednie jest użycie roztworu do hodowli Tc199, a wyniki i powtarzalność są dobre. Płukanie i ponowne zawieszanie limfocytów i czerwonych krwinek w buforowanej Hepes pożywce RPMl1640 spowodowało, że komórki miały tendencję do agregacji i tworzenia dużych komórek, powodując niewiarygodne wyniki. (3) Gdy optymalny stosunek czerwonych krwinek do limfocytów wynosi około 35: 1, stosunek wynosi> 60: 1 lub stosunek wynosi <25: 1, liczbę wieńców ME można zmniejszyć. (4) Zachowanie roztworu kultury MRBC: W roztworze Alsever MRBC przechowywany w temperaturze 4 ° C przez 1 tydzień nadal wytwarza stabilną liczbę girland, podczas gdy MRBC przechowywany w PBS, soli fizjologicznej lub pożywce hodowlanej Tc199, przy przedłużonym czasie przechowywania liczba wieńców Stopniowo po 72 godzinach przechowywania widoczne są tylko małe komórki lub komórki tworzące girlandę. Proces kontroli (1) Weź 1 ml powyższej zawiesiny czerwonych krwinek myszy, dodaj 3 ml soli fizjologicznej, dobrze wymieszaj, 1500r / min, wiruj przez 10 minut, przemyj w sumie 3 razy i na koniec przygotuj 1% zawiesiny czerwonych krwinek mysich solą fizjologiczną (około 1,4 × 108 Komórka / ml). (2) 1,5 ml heparyny pobrano do antykoagulacji, limfocyty oddzielono przez rozwarstwienie limfocytów, a stężenie komórek dostosowano do 2 x 107 / ml za pomocą 20% roztworu Hanka w surowicy cielęcej. (3) Weź 0,1 ml zawiesiny limfocytów, dodaj równą ilość 1% zawiesiny czerwonych krwinek myszy, wymieszaj i umieść w łaźni wodnej o temperaturze 37 ° C na 10 minut, 500 r / min, wiruj przez 10 minut, włóż lodówkę 4 ° C na 2 ~ 3 godziny. (4) Odmierzyć pipetą 0,05 ml supernatantu, dodać 1 kroplę niebieskiego roztworu 2 g / l, delikatnie obracać, aby wymieszać, pobrać 1 kroplę mieszaniny na szkiełku, przykryć szkiełko nakrywkowe, po opadnięciu komórek, Sprawdź za pomocą mikroskopu dużej mocy. Nie nadaje się dla tłumu Nie ma nieodpowiedniego tłumu. Działania niepożądane i ryzyko Jest to bezpieczny czek i jest nieszkodliwy dla organizmu.