Teste de imunofluorescência indireta para malária

Existem muitos métodos de diagnóstico sorológico para a malária, que apenas introduzem o teste de imunofluorescência indireta comumente utilizado. Pessoas que precisam ser examinadas: pessoas com calafrios óbvios, tremores corporais, pele pálida, lábios cianóticos, pele seca, irritabilidade, dor de cabeça, desconforto, anorexia e outros sintomas. Informação básica Classificação especializada: Exame e classificação de doenças infecciosas: exame de sangue Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: jejum Resultados da análise: Abaixo do normal: Valor normal: Não Acima do normal: Negativo: Negativo <1:20, indicando ausência de infecção por malária. Positivo: A taxa de detecção positiva do método do anticorpo fluorescente é geralmente superior à taxa de detecção de protozoários. O título de anticorpos para pacientes com malária falciparum é de 1:80 ou superior e pode ser considerado como um marcador para portadores ou infecção recente por malária. Dicas: Não coma alimentos gordurosos e com muita proteína no dia anterior à coleta de sangue, evite beber muito. O teor de álcool no sangue afetará diretamente os resultados do teste.Depois das 20h do dia anterior ao exame médico, o jejum deve ser iniciado por 12 horas para evitar afetar os resultados do teste. Valor normal Negativo <1:20. Significado clínico A taxa de detecção positiva do método do anticorpo fluorescente é geralmente superior à taxa de detecção de protozoários. O título de anticorpos para pacientes com malária falciparum é de 1:80 ou superior e pode ser considerado como um marcador para portadores ou infecção recente por malária. Os resultados positivos podem ser doenças: malária, malária cerebral, malária pulmonar, malária Antes da inspeção: 1, não comer muito gorduroso, alimentos ricos em proteínas no dia anterior ao sangue, para evitar beber pesado. O teor de álcool no sangue afeta diretamente os resultados do teste. 2. Após as 20h do dia anterior ao exame médico, você deve começar a jejuar por 12 horas para evitar afetar os resultados do teste. 3, deve relaxar ao tomar sangue, para evitar a contração dos vasos sanguíneos causada pelo medo, aumentar a dificuldade de coleta de sangue. Após a inspeção: 1. Após o sangue ter sido retirado, é necessária uma compressão local no orifício durante 3-5 minutos para parar o sangramento. Nota: Não esfregue, para não causar hematoma subcutâneo. 2, o tempo de prensagem deve ser suficiente. Há uma diferença no tempo de coagulação para cada pessoa, e algumas pessoas precisam de um pouco mais de tempo para coagular. Portanto, quando a superfície da pele parece estar sangrando, a compressão é interrompida imediatamente e o sangue pode ser infiltrado na pele devido à hemostasia incompleta. Portanto, o tempo de compactação é maior para interromper completamente o sangramento. Se houver uma tendência a sangrar, o tempo de compactação deve ser estendido. 3, após o sangue desenhar sintomas de desmaios, tais como: tontura, vertigem, fadiga, etc devem imediatamente deitar-se, beber uma pequena quantidade de xarope, e depois passar por um exame físico após os sintomas são aliviados. 4. Se houver congestionamento localizado, use uma toalha quente após 24 horas para promover a absorção. Processo de inspeção 1. Princípio do teste de imunofluorescência indireta para malária O anticorpo anti-Plasmodium no soro de teste é combinado com o antígeno de Plasmodium na fatia de sangue, seguido pelo anticorpo IgG anti-humano marcado fluorescentemente, que age na IgG humana na fatia de sangue e exibe fluorescência no local do antígeno. 2, reagentes (1) O filme de sangue de antígeno é uma fina película de sangue de Plasmodium cynomolgus e uma fina película de sangue de Plasmodium falciparum. Instituições de pesquisa profissional estão disponíveis. Armazenar em 4 ° C ou congelador de baixa temperatura. (2) IgG anti-humana marcada com fluorescência, que está comercialmente disponível no país. 3, o método de operação (1) O soro foi recolhido por um método convencional ou uma mancha circular foi prensada no papel de filtro com um tubo de um tubo de vidro de 1,2 cm de diâmetro (ferro). O sangue é retirado do ouvido ou dedo do sujeito e preenchido com um círculo.O volume de sangue é de cerca de 20 ul (cerca de 10 ul de soro) Após o número ser seco, é colocado num saco plástico selado com dessecante e transportado para o laboratório a 4 ° C. Economize por meio ano, -20 ° C pode ser armazenado por 2 anos. Durante o teste, as gotas de sangue seco foram cortadas nos poços da placa reaccional, foi adicionado 0,2 ml (pH 7,2) de tampão fosfato 0,01 mol / L e a diluição do soro correspondente a 1:20 foi obtida por imersão durante a noite a 4ºC. (2) Remova a película de antígeno do refrigerador e imediatamente seque-a com um ventilador elétrico.Divine cada folha de antígeno em várias pequenas células com um lápis especial.Tente 1 amostra ou 1 título por célula e adicione 1 soro por célula. Gotas Foram necessários soro de referência positivo negativo e controlos em branco de PBS para cada lote de ensaios. Imediatamente ap� a adi�o do soro, a mistura foi transferida para uma caixa h�ida e ap� incuba�o a 37� durante 30 min, foi lentamente lavada com 0,01 mol / L de PBS (pH 7,2) e ent� imersa num cilindro de PBS durante 5 a 10 minutos. (3) Dilua o anticorpo fluorescente IgG anti-humano diluído 1:10 com 0,01mol / L PBS (pH 7,2) e coloque-o na câmara úmida a 37 ° C por 30 min Após a lavagem com o mesmo método, adicione glicerol e PBS em cada célula. Uma quantidade igual de solução mista ou água destilada foi aplicada às folhas de cobertura, e os resultados da reação foram examinados sob um microscópio de fluorescência. (4) Interpretação dos resultados: A intensidade da fluorescência e a clareza da estrutura do esquizont e citoplasma do trofozoito são distintas, nenhuma fluorescência é (-), a fluorescência é fraca, a estrutura morfológica não é clara (±), a fluorescência é fraca e a estrutura morfológica Ainda é claro (+) e é dividido em (2+) a (4+) de acordo com o aumento do brilho de fluorescência e definição estrutural. Geralmente, a intensidade de fluorescência (+) ou mais é considerada positiva em uma diluição de soro de 1:20. Não é adequado para a multidão Aqueles que não têm uma indicação para o exame não devem fazer essa verificação. Reações adversas e riscos Geralmente sem complicações e danos.