Testes imunológicos para infertilidade

Exames imunológicos de infertilidade incluem infertilidade masculina auto-imune anti-espermatozóide, infertilidade alogênica feminina anti-esperma e infertilidade feminina anti-Zona pelúcida. Dieta de controle: 1, a maioria dos itens de teste exigem amostragem de sangue com o estômago vazio na parte da manhã, deve ser fasted café, chá forte, alto teor de açúcar e bebidas de cola; 2, função hepática, lipídios no sangue, coagulação sanguínea e outros itens exigem jejum por 12-16 horas, e Jantar com um dia de antecedência deve evitar beber álcool, proibir alto teor de gordura, dieta rica em proteínas, 3, dieta tem um impacto significativo no teste de lipídios no sangue, pelo menos dentro de 3 dias antes de o sangue chamar a atenção para manter uma dieta normal. Informação básica Classificação de especialista: eugenia e classificação de exame de superioridade: exame de fluidos corporais Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: jejum Resultados da análise: Abaixo do normal: Valor normal: Não Acima do normal: Negativo: O resultado do teste negativo deve ser normal. Positivo: Um teste positivo indica uma doença que pode ser infértil. Dicas: Interrompa a relação sexual por 4 a 7 dias. Propionato de testosterona, fenilacetato de testosterona e fenilpropionato de nantrolona não puderam ser usados ​​uma semana antes do teste. Valor normal Os resultados de vários testes imunológicos foram normais e negativos. Significado clínico Resultados anormais Múltiplos testes imunológicos indicam infertilidade. Os pacientes com infertilidade masculina e infertilidade feminina precisam ser examinados. Os resultados positivos podem ser doenças: infertilidade, infertilidade masculina, pseudo-hermafroditismo feminino, precauções de malformação genital masculina Pessoas inadequadas: ainda não conhecidas. Tabu antes da inspeção: Primeiro, ao coletar espermatozóides: 1. Antes de deixar o sêmen, o paciente deve interromper a relação sexual por 4 a 7 dias. Propionato de testosterona, fenilacetato de testosterona e fenilpropionato de nantrolona não puderam ser usados ​​uma semana antes do teste. Beber deve ser interrompido dentro de 1 mês antes do teste.Isso deve ser feito. 2, quando tomar sêmen, sabão ou óleo de parafina pode ser usado para a massagem peniana, os espécimes são coletados em tubos de ensaio estéreis; preservativos podem ser usados ​​(lavados, sem espermicida) ou sêmen pode ser coletado por relações sexuais, mas desta forma A quantia coletada é geralmente pequena. 3. Se o sêmen não for obtido pelo método acima, a vesícula seminal e o final do ducto deferente podem ser massageados pelo reto, e a urina pode ser coletada para verificar se há espermatozóides no sedimento. 4. Não exponha o sêmen a ambientes superaquecidos e frios. Entregue ao médico para referência, não mais que 30 minutos. Mantenha-se aquecido no tempo frio e mantenha-o no bolso da roupa íntima ao enviá-lo. 5. Se a cultura bacteriana tiver que ser realizada, a abertura uretral deve ser lavada e desinfetada, e o sêmen deve ser coletado em um tubo estéril. Em segundo lugar, antes dos requisitos de coleta de soro: (1) Dieta controladora 1. A maioria dos itens de inspeção exige amostras de sangue com o estômago vazio pela manhã, café, chá, açúcar e refrigerantes devem ser colocados em jejum. 2, função hepática, lipídios do sangue, coagulação do sangue e outros itens requerem jejum por 12-16 horas, e um dia antes do jantar deve evitar beber, proibindo alto teor de gordura, dieta rica em proteínas. 3, a dieta tem um impacto significativo no teste de lipídios no sangue, pelo menos dentro de 3 dias antes da coleta de sangue para prestar atenção para manter uma dieta normal. (B) para evitar efeitos de drogas Os efeitos de drogas em testes bioquímicos e cultura bacteriana são complexos. Portanto, se possível, o sujeito deve parar de tomar todos os medicamentos 1-2 dias antes do teste. Se a medicação for necessária para o tratamento, os efeitos do medicamento devem ser considerados ao analisar os resultados do teste. (3) Evitar o impacto do exercício 1, o exercício extenuante pode fazer com que muitos componentes do sangue mudem, mesmo por mais de 24 horas, portanto, após um exercício vigoroso, não deve imediatamente tomar sangue e andar rapidamente, pelo menos 10-15 minutos após o repouso, depois tomar sangue. 2, deve estar em um estado calmo para tirar sangue, para evitar a excitação emocional. Requisitos para inspeção: 1. A fim de garantir que você possa entender com precisão os resultados do seu exame físico após o exame médico, preencha o formulário de exame médico e cada folha de teste cuidadosamente antes do exame médico.A escrita deve ser clara, especialmente o nome. 2, depois de tomar o soro, você deve ficar parado por 15-20 minutos. Processo de inspeção -, verificação de infertilidade imune anti-espermatozóide A imunidade antiespermatoide inclui imunidade humoral anti-esperma (anticorpos anti-espermatozóides) e imunidade anti-espermatozóide. (1) Detecção de anticorpos anti-espermatozóides 1. Teste pós-coito: Tome muco cervical dentro de 6 ~ 24h após a relação sexual, e observe o número de espermatozóides contados em microscópio de alta potência. Em cada campo de alta potência, existem ≥ 21 fatores específicos de esperma extremamente vívidos. Se o título do soro for ≥1: 32, pode considerar-se que contém anticorpos para espermatozóides. Outros têm aglutinação capilar e aglutinação de placas, que são menos utilizadas. 2. Teste de citotoxicidade dependente do complemento e teste de espermatozóide: O anticorpo do espermatozóide se liga ao antígeno do esperma, ativa o sistema do complemento e causa danos à permeabilidade e integridade da membrana celular.Se é um anticorpo de freio, ele perde sua atividade e freia. Um valor de ≥ 2 é positivo, se é um anticorpo citotóxico, é positivamente corado com certos corantes, exigindo uma motilidade espermática> 70%. O método micro precisa apenas de alguns microlitros de amostra Para amostras com baixa taxa de atividade espermática, o espermatozóide vivo pode ser extraído pelo método a montante, e a taxa de sobrevivência pode chegar a mais de 90%. A prática só pode detectar anticorpos que atuam na cauda do espermatozóide. Especificidade forte, baixa sensibilidade e alta taxa de falsos negativos. 3. Método de hemaglutinação passiva: Os eritrócitos tratados são sensibilizados com o extrato de espermatozóides e o plasma seminal, e os eritrócitos sensibilizados são reagidos com o soro diluído a ser testado na placa de micro-reação, e a aglutinação dos eritrócitos é positiva. Este método não é afetado pela viabilidade, contagem, fragmentos microbianos ou de tecido nos espermatozóides, pois os pesquisadores acreditam que este método é específico e sensível, mas há poucos relatos, e sua confiabilidade e praticabilidade ainda precisam ser confirmadas. 4. Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) e ensaio imunoenzimático de biotina-avidina (BA-ELISA): aplicação de espermatozoide intacto ou de membrana sémen revestido com antígeno, anticorpo de espermatozóide na amostra a ser testada e cultivada Pode então ligar-se à superfície do antígeno. Subsequentemente, o segundo anticorpo do marcador enzimico tamb pode ligar-se superfie e depois adiciona-se o substrato enzimico e o resultado avaliado de acordo com o desenvolvimento de cor do substrato. Pode ser observado a olho nu, também pode ser medido com um leitor de microplacas, este último objetivo e preciso, geralmente mais do que um grupo de densidade óptica sérica negativa mais 2 vezes o desvio padrão é positivo. Como o espermatozoide intacto é facilmente adsorvido de forma não específica, se for revestido com o antígeno solúvel da membrana espermática, o método é sensível, específico, objetivo e quantitativo, e pode determinar o tipo de anticorpo e é fácil de operar. BA-ELISA é uma nova geração de ensaio quantitativo desenvolvido com base no ELISA convencional, que tem mais sensibilidade e especificidade do que os métodos convencionais. 5. Teste de imunoglobulina (1mmunbeadTest, IBT): Microesferas de poliacrilamida revestidas com anticorpo anti-humano imunoglobulina podem ligar-se à superfície espermática ligada ao anticorpo espermático, e imunobéolas podem ser vistas com espermatozóides sob microscópio de contraste de fase ou microscópio electrónico. Corra, se a proporção de espermatozóides combinada com um ou mais imunobeads for ≥0% positiva. Esse método determina o local, o tipo e a proporção de espermatozoides ligados e pode detectar anticorpos ligados à superfície do esperma vivo. Sua sensibilidade, especificidade e reprodutibilidade são boas, a operação é um pouco incômoda e as amostras necessárias para o teste são poucas.Ele pode ser usado para a detecção de amostras de traços, como muco cervical e fluido das trompas de Falópio. 6. Método de imunoglobulina radioativa ou proteína A: Imunoglobulina anti-humana marcada com isótopo ou plântula de uva Uma proteína é ligada a espermatozóides ligados à superfície do espermatozóide, e a radioatividade da superfície é medida por um contador x. Se o esperma vivo for usado como um antígeno, sua especificidade e sensibilidade são altas, e o tipo de anticorpo pode ser determinado. No entanto, devido às diferentes fontes de espermatozóides vivos em cada experimento, os resultados são menos reprodutíveis, e o equipamento é caro.O operador é suscetível a danos radioativos, portanto, este método é menos relatado. 7. Teste de imunofluorescência indireta: Após a superfície estar ligada ao antígeno, ele pode se ligar ao segundo anticorpo marcado com fluoresceína, e a proporção de espermatozóides positivos mostrando fluorescência é observada sob um microscópio de fluorescência. Como o teste requer a fixação de metanol para causar danos à membrana, o antígeno interno é exposto, e o anticorpo contra o antígeno interno é onipresente nas pessoas redundantes, portanto, o falso positivo é muito alto e não tem valor prático clínico. Nos últimos anos, a cultura em fase líquida não foi corrigida durante o experimento, e o valor de uso deste método foi redefinido. 8. Inspeção direta da interação entre ovos finos (1) Teste de ligação ou teste penetrante transparente de espermatozoide: O óvulo humano obtido da laparoscopia é melhor que os espermatozóides após a incubação sob certas condições, e se o espermatozóide pode atravessar a zona pelúcida no espaço ao redor do óvulo, se o esperma não puder ser usado Passe a zona pelúcida e considere a presença de um anticorpo de freio. Este teste também é interferido por outros fatores. (2) teste de penetração de ovos de hamster espermatozóide (SPA): o espermatozóide vivo extraído otimizado é misturado com os ovos livres de hamster e observado sob um microscópio de contraste de fase.Se o ovo contém uma cabeça de esperma inchado (com cauda) Penetração O SPA pode ser usado para determinar: 1 a capacidade de fertilização dos espermatozoides com anticorpos do plasma seminal; 2 a importância de vários anticorpos na prevenção da gravidez. Este teste também pode ser afetado por uma variedade de fatores. (dois) detecção de imunidade anti-espermatozóide Existem poucos estudos sobre a imunidade anti-esperma mediada por células, e cada conclusão é diferente. Experimentos em animais e testes em humanos mostraram que a imunidade celular anti-senso pode ser uma das causas da infertilidade. Os ensaios para detectar respostas imunit�ias anti- sentido mediadas por c�ulas incluem ensaio de transforma�o de linf�itos, ensaio de inibi�o de ades� de leuc�itos, ensaio de inibi�o de migra�o de leuc�itos ou macr�agos, teste cut�eo e ensaio de actividade procoagulante de leuc�itos do sangue perif�ico. Os antigénios utilizados são diferentes, tais como esperma recém-lavado, esperma congelado-descongelado, esperma semi-purificado e semelhantes. Atualmente, como os antígenos utilizados não são uniformes, os métodos de detecção são diferentes, o número de casos de pesquisa é pequeno, a especificidade de cada método é difícil de avaliar e os resultados são difíceis de comparar. Em segundo lugar, a detecção de infertilidade imune anti-transparente A fonte da zona pelúcida humana é limitada e difícil de obter, mas a zona pelúcida humana e a zona pelúcida porcina têm antigenicidade cruzada Portanto, na prática real, a zona pelúcida porcina é usada em vez da zona pelúcida humana para detectar o anticorpo zona pelúcida no soro humano. Uma vez que a presença de lectina heteróloga (principalmente IgM) em alguns soro humano normal interfere com os resultados experimentais, é necessário que os glóbulos vermelhos porcinos frescos absorvam o soro de teste antes do teste. 1. Reação de precipitação da banda escocesa: Após a superfície da zona pelúcida se ligar ao anticorpo, o índice de refração muda sob um microscópio de luz ou um microscópio de campo escuro. Este método é usado principalmente para identificar soro, tem baixa sensibilidade e é difícil de usar na prática clínica. 2. Radioimunoensaio: Após o antigénio da zona pelúcida porcina radiomarcada e do soro a testar, o complexo antigénio-anticorpo é isolado e a sua radioactividade é medida. Este método pode ser quantitativo, específico e sensível, mas devido a danos radioativos, e os relatórios não são muitos, este método ainda é difícil de afirmar. 3. Ensaio de Imunofluorescência Indireta: Após o anticorpo humano anti-Zona pelúcida se ligar à superfície do ovo suíno, o anticorpo anti-humano imunoglobulina marcado com fluoresceína liga-se à superfície da zona pelúcida e exibe peri- fluorescência óbvia sob um microscópio de fluorescência. A confiabilidade desta lei depende de outros métodos objetivos. 4. ELISA e método BALISA: o transportador de fase sólida é revestido com o antígeno porcina zona pelúcida e o soro, o segundo anticorpo e o substrato a serem testados são adicionados, e a lavagem é realizada passo a passo e finalmente o resultado é julgado de acordo com a mudança de cor do substrato. Este método requer menos tamanho de amostra, não requer equipamento especial, é fácil de operar, pode determinar quantitativamente anticorpos e determinar o tipo de anticorpo, e tem boa especificidade e sensibilidade. O BA-ELISA tem as vantagens de um ELISA convencional e sua sensibilidade é bastante aprimorada. 5. Método da hemaglutinação passiva O antigénio da zona pelúcida porcina purificada é utilizado para revestir os glóbulos vermelhos de outras espécies como alvo do antigénio e, na presença do anticorpo zona pelúcida, os glóbulos vermelhos sensibilizados aglutinam-se. Existem poucos relatos sobre este método, e é difícil avaliar sua sensibilidade e especificidade. 6. Teste de ligação ou penetração de banda transparente de espermatozóide: Este método pode ser positivo se houver um anticorpo de zona pelúcida ou um anticorpo anti-espermatozóide. Como o teste é grandemente influenciado pelos fatores do ambiente de cultura, os resultados de pesquisa de diferentes laboratórios são difíceis de comparar. Esse método pode ser aplicado em conjunto com outros métodos para complementar um ao outro para garantir a confiabilidade dos resultados. Não é adequado para a multidão O exame é menos invasivo e geralmente não tem contraindicações. Reações adversas e riscos Este teste é menos invasivo e geralmente não causa complicações graves ou outros perigos.