Ensaio de Sorção Combinada de Enzimas

Ensaio de imunoabsorção enzimática (doravante referido como ELISA) é a técnica mais amplamente utilizada em imunoensaio enzimático. É usado para detectar o antígeno (ou anticorpo) a ser testado que é revestido no poço da placa de fase sólida. Ou seja, o anticorpo é marcado com uma enzima, e o antígeno ou anticorpo conhecido é adsorvido na superfície do veículo de fase sólida, e a reação antígeno-anticorpo é realizada na superfície do veículo de fase sólida, e o componente livre na fase líquida é lavado e finalmente atuado pela enzima. A cor é desenvolvida após o substrato para avaliar o resultado. Informação básica Classificação especializada: classificação de verificação de crescimento e desenvolvimento: exame bioquímico Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: jejum Dicas: Obedeça as instruções do médico ao verificar. Valor normal A razão entre o soro a ser testado e o soro negativo conhecido (P / N) era <2,1, e o valor da DO do soro a ser testado era <0,4, que foi considerado negativo. Significado clínico Resultados anormais: a razão entre o soro a ser testado e o soro negativo conhecido (P / N) ≥ 2,1, e o valor de OD do soro a ser testado é ≥ 0,4, é considerado positivo. Precisa verificar a multidão: detectar antígeno e anticorpo. Precauções Contra-indicações antes da inspeção: Prepare várias soluções de embalagem e defina a concentração. Tabu ao verificar: 1. Estritamente fatores de controle que afetam a eficiência da marcação, como temperatura, tempo, pH, enzima e quantidade de anticorpos. 2. Ao instalar a coluna, torne a coluna uniforme, a superfície do cilindro é plana, sem bolhas ou rachaduras. Processo de inspeção Os métodos ELISA comumente usados ​​incluem um método sanduíche de duplo anticorpo e um método indireto, o primeiro para detectar antígenos macromoleculares e o último para medir anticorpos específicos. ELISA indireto Este método é usado principalmente para detectar anticorpos. O procedimento para o ELISA indireto é o seguinte. (1) materiais 1 líquido de revestimento, líquido de lavagem, líquido de conservação de calor, líquido de substrato e líquido de parada. Antigio revestido com 2DVH, anti-anticorpo marcado com enzima, soro de refercia DVH negativo e positivo. 3 detector ELISA, amostrador, microplaca de poliestireno. (2) Etapas do método 1 mais revestimento de antígeno → 4 ° C durante a noite, lavado três vezes, seco. 2 mais soro a ser testado → 37 ° C por 2 horas, lavado três vezes, seco. 3 Adicionar o anticorpo marcado com enzima → 37 ° C por 2 horas, lavar três vezes, secar. 4 Adicione solução de substrato → 37 ° C por 30 minutos, adicione a solução de parada. 5 O valor da DO foi medido por um detector de ELISA, e a relação P / N foi calculada. 2. ELISA em sanduíche de duplo anticorpo Este método é usado principalmente para detectar antígenos macromoleculares. 1 Adicione o revestimento de anticorpo → 4 ° C durante a noite, lave três vezes e seque. 2 Adicione o antígeno a ser testado → 37 ° C por 30 minutos, lave três vezes e seque. 3 Adicionar o anticorpo marcado com enzima → 37 ° C por 30 minutos, lavar três vezes, secar. 4 Adicione solução de substrato → 37 ° C por 15 minutos, adicione a solução de parada. 5 O valor da DO foi medido por um testador de ELISA. Não é adequado para a multidão Não é adequado para a multidão: não. Reações adversas e riscos Sem complicações ou riscos relacionados.