Ensaio de formação de guirlanda de eritrócitos de rato

Os linfócitos B estão envolvidos na síntese de anticorpos e são células efetoras das respostas imunes humorais. A superfície das células B transporta imunoglobulina de superfície de membrana (SmIg), receptores Fc e receptores de complemento. Ele se liga fortemente à porção Fc do complexo antígeno-anticorpo. Os glóbulos vermelhos de galinha ou carneiro são selecionados e sensibilizados em complexos de EA com os correspondentes anticorpos anti-eritrócitos.O receptor Fc de células B pode formar uma guirlanda com EA, que é chamada de grinalda EA. Se o complexo EA é adicionado ao complemento e se liga ao receptor do complemento de células B, uma roseta EAC é formada. Há receptores de RBC murinos na superfície das células B, que podem se ligar a RBCs de camundongos para formar rosetas de eritrócitos de ratos (M-RFC), que se ligam principalmente a células B com receptores IgM, e M-RFCs são principalmente células B ingênuas. Este teste é usado principalmente para detectar o número de linfócitos B e determinar o nível de imunidade humoral. Informação básica Classificação especializada: classificação do exame: exame de sangue Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: jejum Resultados da análise: Abaixo do normal: No entanto, a porcentagem de rosetas de ME foi reduzida ou ausente sem agamaglobulinemia e imunodeficiência combinada severa. Valor normal: Percentagem de EM no sangue periférico feminino: 5% -10% Acima do normal: A porcentagem de grinaldas ME no sangue periférico de pacientes com leucemia linfocítica crônica chega a 60% a 80%. Negativo: Positivo: Dicas: por favor, relaxe ao verificar. Valor normal Resultados Foram contados 200 linfócitos ao microscópio, Os linfócitos que adsorvem 3 ou mais glóbulos vermelhos de ratinho eram linfócitos B e calculou-se a percentagem de guirlandas de células de ratinho (coroas ME). A porcentagem de roseta ME no sangue periférico humano normal é de 5% a 10%. Significado clínico A porcentagem de grinaldas ME no sangue periférico de pacientes com leucemia linfocítica crônica é tão alta quanto 60% a 80%, mas não há gamaglobulinemia, imunodeficiência combinada grave, etc., e a porcentagem de guirlandas de ME está reduzida ou ausente. Baixos resultados podem ser doenças: não-gammaglobulinemia ligada ao X em crianças, alta incidência de imunodeficiência secundária em crianças pode ser doença: precauções para leucemia linfocítica crônica (1) Tempo de incubação: A porcentagem de EM aumentou gradualmente com o tempo de incubação, após 1h a porcentagem de EM foi de 7,4 ± 3,1% e a incubação foi aumentada para 18,3 ± 3,8% após 18 h, após 72 h de incubação. Ele caiu gradualmente para 3,4 ± 7,1%. (2) Solução de cultura: É mais adequado utilizar a solução de cultura Tc199 e os resultados e a repetibilidade são bons. A lavagem e ressuspensão de linfócitos e hemácias com meio RPM11640 tamponado com Hepes resultou em células tendendo a agregar e formar células grandes, resultando em resultados não confiáveis. (3) Quando a proporção ideal de glóbulos vermelhos em relação aos linfócitos é de cerca de 35: 1, a proporção é> 60: 1, ou a proporção é <25: 1, o número de coroas em ME pode ser reduzido. (4) Preservação da solução de cultura MRBC: Na solução de Alsever, MRBC armazenado a 4 ° C por 1 semana ainda produz um número estável de guirlandas, enquanto MRBC armazenado em PBS, salina ou meio de cultura Tc199, com o tempo de armazenamento prolongado, o número de coroas Gradualmente, após 72 horas de armazenamento, somente células pequenas ou em forma de grinalda podem ser vistas. Processo de inspeção (1) Tome 1 ml da suspensão de glóbulos vermelhos acima, adicione 3 ml de soro fisiológico, misture bem, 1500r / min, centrifugue durante 10min, lave um total de 3 vezes e finalmente prepare 1% de suspensão de glóbulos vermelhos de ratinho com soro fisiológico (cerca de 1,4 × 108 Célula / ml). (2) 1,5 mL de heparina foram tomados para anticoagulação, os linfócitos foram separados por estratificação de linfócitos e a concentração de células foi ajustada para 2 x 10 7 / mL com 20% de solução de Hank de soro de vitelo. (3) Tome 0,1 ml de suspensão de linfócitos, adicione uma quantidade igual de suspensão de glóbulos vermelhos de camundongo a 1%, misture e coloque em banho-maria a 37 ° C por 10 min, 500 r / min, centrifugue por 10 min, coloque 4 ° C geladeira por 2 ~ 3 h. (4) Pipetar 0,05 ml de sobrenadante, adicionar 1 gota de 2g / L de solução azul, rodar suavemente para misturar, retirar 1 gota da mistura sobre a lâmina, cobrir a lamela, depois de as células afundarem, Verifique com um microscópio de alta potência. Não é adequado para a multidão Não há multidão inapropriada. Reações adversas e riscos É um cheque seguro e é inofensivo para o corpo.