Serumlipoprotein och serumlipoproteinelektrofores

Lipoproteinelektrofores används främst för klassificering av hyperlipoproteinemia, och det är också bra att förstå blodlipidstatusen för koronar hjärtsjukdom och bättre vägleda klinisk diagnos och behandling. Grundläggande information Specialklassificering: kardiovaskulär undersökning: biokemisk undersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: fasta Analysresultat: Under normala: Finns i låg-lipoproteinemia och så vidare. Normalt värde: Lipoprotein med mycket låg densitet: 0,06-0,3 g / L Lipoprotein med låg densitet: 0-7 g / L Lipoprotein med hög densitet (hane): 0,41-0,63 g / L Zheng med hög densitet .42-0.68 g / L Över normal: Finns i primär hyperlipidemi och så vidare. negativt: positivt: Tips: Innan undersökningen är kosten lätt och alkohol är förbjuden. Kontrollera om det är tom mage på morgonen. Normalt värde Cellulosaacetatmembranelektrofores Mjölktistelpartiklar 0g / L (0 mg / dl); Lipoprotein med mycket låg densitet 0,06 ~ 0,3 g / L (6 ~ 30 mg / dl); Lipoprotein med låg densitet <7 g / L (<700 mg / dl); Lipoprotein med hög densitet: Han 0,52 ± 0,11 g / L (43 ± 18 mg / dl); Hane 0,55 ± 0,13 g / l (47 ± 2 mg / dl). Klinisk betydelse 1, ökad: sett vid primär hyperlipidemi. 2, lägre: sett vid låg-lipoproteinemi. Höga resultat kan vara sjukdomar: hyperlipidemi, hyperlipoproteinemia typ II, koronära hjärtsjukdomar överväganden 1. Prov: Lipoprotein kan isoleras från färskt, ofoget serum. Plasma är inte lämplig för lipoproteinelektrofores eftersom ett fibrinogenband kommer att visas. 2. Lipoproteinprofiler med tydliga separeringskomponenter är förutsättningar för korrekt tolkning. Om dessa villkor är väl uppfyllda kan lipoproteinelektrofores och referensmetoden (ultracentrifugering) vara ganska konsekvent. Precisionen för varje komponent är olika och den uppskattas av variationskoefficienten, som i allmänhet är mindre än 5%. 3. Ibland försvinner alfa-lipoproteiner och / eller ett smalt alfa-lipoproteinband visas. Detta beror på att fria fettsyror finns i. Ackumulering på alfa-lipoproteiner gör att dessa partiklar har samma laddning. När tätheten för a-zonen ökar är resultatet högt. Jämfört med utfällningstekniker är kvantitativ lipoproteinelektrofores dyrt. Inspektionsprocess Omedelbart efter uppsamling av venblod, testoperationen: 1. Lägg bufferten i elektroforesetanken och justera bufferten i tankarna på båda sidor så att de blir i samma plan. 2. Beredning av cellulosaacetatfilm: Ta en cellulosaacetatfilm (2 cm × 8 cm) och rita en horisontell linje med en blyertspenna på 1,5 cm (en sida av den negativa sidan) av den grova ytan för att få ett prickat märke. Efter numrering och indikering av de positiva och negativa elektroderna nedsänktes filmen i barbiturat-barbital-natriumbuffertlösningen, och efter att den var tillräckligt mättad (vanligtvis 20 minuter) avlägsnades överskottsbufferten genom att smaka det rena filterpapperet. 3. Cellulosaacetatfilmhåret fästs i elektroforesbehållaren och rätas ut. Pipettera 3 ~ 5μl icke-hemolytiskt serum med en mikropipett och tillsätt den längs den horisontella linjen vid den horisontella linjen. Provet ska hållas på ett visst avstånd från kanten av filmen för att undvika deformation av proteinbandet i elektroforesmönstret. Efter att serum tränger in i filmen vänds filmen. Med den ljusa sidan uppåt, sticker du den platt på elektroforesbehållaren och anslut de två ändarna av filmen till bufferten med dubbelskiktsfilterpapper eller fyra lager gasväv och vänta ett tag. 4, slå på strömmen, uppmärksamma de positiva och negativa elektroderna på cellulosaacetatfilmen, anslut inte fel. Spänning 90 ~ 150V, ström 0,4 ~ 0,6 mA / cm (olika elektrofores krävs spänning, ström kan vara annorlunda, borde vara flexibel), sommarkraft 45 min, vintertidens starttid är något längre, cirka 60 min, elektroforeszons expansion ca 25 ~ 35mm kan vara. 5, färgning: När strömmen är klar, ta bort filmen och sänk direkt ned i Lichunhong S-färglösningen eller aminosvart 10B-färgningslösningen, färg i 5 till 10 minuter (med albuminsonen) och skölj sedan återstående i sköljlösningen. Färg tills bakgrunden är färglös. 6, kvantitativ: 1 kolorimetrisk metod: tappa den sköljda filmen, skär det färgade proteinområdet i motsvarande rör, tillsätt 0,6 ml / L natriumhydroxid 6 ml i albuminröret (beräkna absorbansen multiplicerad med 2), resten Tillsätt 3 ml i varje rör, skaka det flera gånger och placera det i en vattentank på 37 ° C i 20 minuter för att få färgen urlakning. Amino Black 10B-färgning Absorbansen för varje rör avlästes vid 620 nm med användning av en spektrofotometer, och därefter beräknades innehållet i varje rör (samtidig kontroll av blantröret). När Lichunhong S färgades behandlades lakvattnet med 0,1 mol / L natriumhydroxid, och mängden var densamma som ovan. Efter 10 minuter, tillsätt 0,6 ml 400 ml / L ättiksyra till albuminröret (multiplicera absorbansen med 2) och tillsätt 0,3 ml till de andra rören för att neutralisera en del av natriumhydroxiden för att göra färgen djupare. Om nödvändigt, centrifugera och ta supernatanten. Absorbansen för varje rör avlästes vid 520 nm med en spektrofotometer (samtidig blankkontroll), och därefter beräknades respektive innehåll. 2 Densitometer-skanningsmetod: A. Genomskinlig: Aspirera sköljvätskan på filmen (för att förhindra att den transparenta vätskan späds ut för att påverka det transparenta resultatet), sänk ned filmen i den transparenta vätskan i 2 till 3 minuter, ta sedan ut den och platta den på ett rullande sätt. Rengör och repfria glasskivor (skap inte bubblor), ställ upp objektglasen ett tag, ta bort överskott av transparent vätska, placera i en ugn vid en konstant temperatur på 90-100 ° C, baka i 10-15 minuter, ta bort och kyla till rumstemperatur. Proteinområdena som är transparenta med denna metod är distinkta, filmen är platt och kan direkt skannas och permanent bevaras (transparent med väte-naftalen eller flytande paraffin. Den sköljda filmen ska torkas och transparent och den transparenta filmen kan inte lagras. Lång och lätt att rynka). 2 Skanningskvantifiering: Den transparenta filmen placeras i en helautomatisk densitometer eller annan densitometer mörk ruta för skanningsanalys. Inte lämplig för publiken Olämpliga människor: I allmänhet finns det inga människor som inte är lämpliga. Biverkningar och risker 1, lokal subkutan blödning: efter blodsamlingen bör pressas under en tillräcklig tid, särskilt de med blödningstendens, för att inte orsaka subkutan oser och blåmärken på grund av ingen blodkoagulation. 2, infektion: uppmärksamhet på aseptisk operation under venös blodinsamling, för att inte orsaka lokal infektion.