apolipoprotein AⅡ

Apolipoprotein är en plasmalipoproteinfraktion som innehåller en mängd lipoproteiner och flera olika specifika apolipoproteiner. Det finns mer än 20 typer av apolipoproteiner som hittills har upptäckts. Bland dem finns det huvudsakligen aPOAl, AII, B-100, B48, Cl, CII, CIII, D, E och liknande. Grundläggande information Specialklassificering: kardiovaskulär undersökning: biokemisk undersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: fasta Tips: I den sista måltiden innan blodet dras, undvik mat med hög fetthalt och dricka, fasta 12 timmar, extrahera venearblod underarm. Normalt värde 250 ~ 520 mg / L. Klinisk betydelse Minskad i koronar hjärtsjukdom, diabetes, nefrotiskt syndrom, ärftlig ApoA-I-brist (Tanger-sjukdom), familjär låg-alfa-lipoproteinemi, fiskögonsjukdom, allvarlig undernäring, aktiv hepatit och leverfunktion. Låga resultat kan vara sjukdomar: koronar hjärtsjukdom, överväganden med diabetes (1) Immunoturbidimetry: 1 Beträffande antiserum: Den turbidimetriska analysen har högre krav på antiserum än andra metoder. Den turbidimetriska metoden är företrädesvis en polyklonal antikropp. Anti-serum måste vara fritt från anti-serum. Måste vara uppmärksam på apoA-II extraherad från humant serum för att uppnå immunrenhet, kromatografisk renhet och elektroforesrenhet, vilket inte är möjligt i det allmänna laboratoriet. Antiserum titer (titer) bör inte vara mindre än 16. För närvarande, i vissa inhemska kommersiella reagens, har apoA-II antiserum extremt låg titer, så du måste vara uppmärksam när du köper satsen. Om du inte har erfarenhet av att identifiera antisera-kvalitet innan du köper, bör du be den kvalificerade enheten att identifiera den. 2 Det övre standardprovet (serum) späds 200 gånger för manuell drift (100 ul prov), och om det finns ett precisionsprovtagare kan det spädas 20 gånger (med 10 mikroliter). För att anpassa sig till villkoren för olika laboratorier (som olika typer av automatiserade instrument), bör andelen antigen-antikroppar uppmärksammas vid lämpliga modifieringar. Det bör noteras att det inte bör finnas något antigenöverskott i reaktionssystemet och den linjära övre gränsen bör inte vara lägre än 2,5 g / L. Med andra ord måste mängden antiserum vara tillräckligt, annars blir resultaten låga när apoA-I är hög i provet. För närvarande har vissa inhemska läkemedelsatser inte bara låg anti-serumtiter, utan doseringen av proverna i operationen är för stor (såsom 3 ~ 5 ul), antikroppen är uppenbarligen otillräcklig, och de uppmätta resultaten är oundvikligen felaktiga. 3 För att uppnå exakt mätning måste resultaten för kalibreringskurvan beräknas i apoA-II- och B-turbiditetsmätning (slutpunktmetod). Ett visst intervall (låg provdos) -koncentration (X) är i princip linjärt med turbiditet (Y), och linjär regression beräknar ett visst avlyssning på Y-axeln (A-värde <0,1), så avvikelsen för beräkningsresultatet beräknas med enpunktskalibrering. Större, de uppmätta resultaten kan inte exakt återspegla nivån på hög (hög låg, låg hög). Försäkrar inte mätnoggrannheten på grund av enkelpunktsmetoden. Oavsett typ av automatiserat instrument måste du först prova kalibreringskurvan. Om testet upprepas under instrumentets förhållanden och de specifika förhållandena, avlyssningen av regressionslinjen är inte uppenbar, kan enpunkts kalibreringsmetod användas. När provmängden är 3 till 5 μl, även om mängden antiserum ökar, är koncentrationen och grumligheten inte linjär och kan endast beräknas efter att kurvan har konverterats linjärt. 4 Den huvudsakliga interferensfaktorn är grumligheten i serumet självt (som serum med högt fett), och förbehandlingsmetoderna som ultracentrifugering eller lipashydrolys är inte praktiska. Effekten av grumlighet med ytaktiva medel är också begränsad, så ett tomt rör måste göras i analysen. Förutom den tvåpunktsmetod som används i automatiserad analys är det ett misstag att manuellt använda ett enda reagens utan att subtrahera provämnet. För att minska effekten av matriseffekter på turbiditetssvaret måste serum med fast värde användas som en kalibrator. Dessutom måste störningar som dammpartiklar och grumliga skivor repas ut. 5 Vissa kommersiella kit (inklusive vissa importerade produkter) med felaktiga kalibreringsseravärden är en viktig källa till fel. (2) Raketelektroforesmetod: 1 Utspädningsförhållandet för antigenet och antiserummängden bör väljas så att rakettoppen är klar, lutningen för kalibreringskurvan är måttlig och linjen är lämplig. Metoden mäter samtidigt apoA-II och apoB, och mängden av de två antiseraerna bör justeras så att topphöjderna för de två är olika, och apoBs topphöjd är inte mindre än 1 cm. 2 Olika typer av antiserum (som kaniner och får) testas till motsvarande pris, och resultaten blir olika. ApoA-I-analysen är företrädesvis kaninantiserum. När kaninserumet används är toppformen skarp, och toppen som produceras av fårserummet är tjock, toppspetsen är rund och trubbig, och ibland visas en spöksbild före toppen. Lutningen för kalibreringskurvan för kalibreringsserumet är också annorlunda. Men oavsett vilket antiserum som används är de kvantitativa resultaten inte så mycket olika. 3 Elektrofores under vissa förhållanden, topphöjden för kalibreringsserumet för olika utspädningar kommer inte att förändras signifikant, och lutningen för kalibreringskurvan är i princip densamma. Om provets topphöjd överskrider kalibreringskurvan, bör provets utspädningsfaktor justeras och testas igen. Inter-board CV är vanligtvis mindre än 5%. 4 Raketelektroforesresultat kan observeras genom färgning eller direkt visuell observation av raket toppen. Den förstnämnda använder mindre prover och sparar antiserum, men om proverna och antiserumet ökar på lämpligt sätt är det bekvämare att inte färga. Den använda agarosen bör vara standardelektrosmotisk eller hypotonisk. Att lägga till korrekt mängd dextran eller polyetylenglykol till gelén kommer att göra rakettoppen tydligare. 5 Mätningen av rakettoppen kan beräkna ytan eller topphöjden, och området är topphöjden multiplicerad med toppbredden (bredden vid toppens halva höjd). Mätnoggrannheten är företrädesvis upp till 0,1 mm. Mekanisk eller elektronisk förstärkningsutrustning måste användas. Topphöjden inom området för standardkurvan är företrädesvis 1 till 4 cm. 6 Denna metod är tillämplig för analys av en liten mängd prov. Lämplig också för apoAII, Cl, CII, CIII, D, E och Lp (a) -bestämning. Inspektionsprocess Raketelektrofores: 1 hällplatta: 10 g / L agaros 10 ml per platta, smälta i kokande vattenbad, blanda väl, tillsätt 50 μl apoA-II antiserum och 50 μl apoB antiserum när det är kallt till 50 ~ 55 ° C (mängden beror på antiserum titer) ), blanda snabbt och häll på glasplattan som är förinställd på vattenplattformen, svalna och placerades sedan vid 4 ° C, efter 20 minuter, stans hål, hålet är vid plattans katodände, hålets diameter är 3 mm, hålets avstånd är minst 5 mm, och hålkapaciteten är 5 ul. Placera plattan i elektroforesbehållaren och bron med filterpapper. 2 utspädd antigen: kalibreringsserumet utspäddes till 1: 100, 1: 150, 1: 200, 1: 300 och 1: 400 (för kalibreringskurva) med 0,15 mol / L NaCl-lösning, och serumprovet späddes 1: 200. Sätt kylskåpet vid 4 ° C under högst 3 dagar. 3 Laddning: Späd det fasta serumet och proverna i lågströmstillståndet (10 mA / platta) för att absorbera 5 μl (exakt) och tillsätt provet till agarosgel. Varje styrelse måste göra en serie standarder. 4 effekt: stadigt flöde 24mA / kort, terminal spänning 6 ~ 8V / cm, kylning med rinnande vatten för att bibehålla agaros 15 ° C, elektrofores 3 ~ 4h. 5 avproteiniserat protein och torr film: agarosplattan efter elektrofores nedsänktes i 0,15 mol / L NaCl under 30 minuter, och filmen placerades på polyesterfilmen och limet absorberades av flerskiktsfilterpapperet under försiktigt tryck. Fukt, torka sedan filterpapperet, filmen och polyesterfilmen tillsammans, eller torka det med en varmluftsblåsare. Efter torkning kommer filmen naturligt att separeras från filterpapperet och polyesterfilmen. 6-färgning: agarosfilmen nedsänktes i färgningslösningen under 20 till 30 minuter. 7 Avfärgning: Blötlägg den färgade filmen med en avfärgningslösning tills raket toppen är klar, och bakgrunden är i princip färglös. Det kan klämmas fast i två delar cellofan i vatten och kan förvaras under lång tid efter torkning. Det kan också blötläggas i rinnande vatten för att ta bort bakgrunden. Inte lämplig för publiken Generellt inga folkmassor. Biverkningar och risker 1. Infektion: Var uppmärksam på aseptisk operation vid insamling av blodprover, och stoppa blödning efter bloduppsamling för att undvika förorening av vatten och vätska för att undvika lokal infektion. 2, blödning: efter att blodet har fått en fullständig komprimeringstid, särskilt koagulopati, blödningstendens, för att undvika lokal subkutan oser, blåmärken och svullnad.