Sekretoriskt IgE i sputum

SIgE-stället liknar SIgA och produceras också av plasmaceller i lamina propria i luftvägarna. Det distribueras i slemhinnevävnader och exokrina vätskor. Dessa platser är platsen för invasion av allergener och platsen för allergiska reaktioner. IgE är en monomer, 8S, 19 × 104 ku, och dess tunga kedja är längre än y-kedjan. Ytterligare en funktionell region (CH4), som kan binda till celler (såsom mastceller, basofiler) och utlösa frisättning av intracellulära bioaktiva ämnen under vissa förhållanden, därför är IgE den huvudsakliga antikroppen som orsakar typ I-allergi. . Grundläggande information Specialklassificering: Andningsundersökningsklassificering: sputumundersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: fasta Påminnelse: Om huvudreagenskomponenterna är felaktigt beredda eller felaktigt lagrade, bryts de ned och inaktiveras lätt. Normalt värde 0,1 till 9 mg / l. Klinisk betydelse Ökning: IgE är monomer, 8S, 19 × 104ku, och dess tunga kedja är längre än y-kedjan. Ytterligare en funktionell region (CH4), som kan binda till celler (såsom mastceller, basofiler) och utlösa frisättning av intracellulära bioaktiva ämnen under vissa förhållanden, därför är IgE den huvudsakliga antikroppen som orsakar typ I-allergi. . Hos patienter med bronkialastma och överkänslighetspneumonit kan SIgE-innehållet i sputumet ökas. Höga resultat kan vara sjukdomar: bronkialastma, allergisk lunginflammation Huvudreagenskomponenterna i ELISA, såsom antigener, antikroppar, enzymkonjugat, substrat, etc. nedbryts och inaktiveras om de inte korrekt bereddes eller lagras på fel sätt. Det finns många steg i ELISA, och om operationen inte är standardiserad är det svårt att få korrekta resultat. För att säkerställa testets effektivitet måste därför kvalitetskontroll utföras för varje test. De positiva och negativa kontrollerna som tillhandahålls i de utmärkta satserna kan vanligtvis användas som kvalitetskontroll för testet. Enligt instruktionerna kan testets effektivitet bedömas utifrån de erhållna absorbansvärdena. Genom att använda det vanligaste HBsAg-testet i kliniska test som exempel, bör den negativa kontrollen i satsen vara HBsAg-negativt humant serum, och den positiva kontrollen bör indikera HBsAg-innehåll (t.ex. 9 ± 2 ng / ml). Tre negativa kontroller och två positiva kontroller bör göras samtidigt för varje test test. Absorbansvärdet erhållet genom den negativa kontrollanalysen bör vara mindre än ett visst värde (till exempel 0,100), och medelvärdet för den positiva kontrollabsorbansen minus den negativa kontrollabsorbansen bör vara större än ett visst värde (till exempel 0,200). Dessa värden är specifika experimentella värden för satsen under de specificerade analysförhållandena. Därför, om testresultaten uppfyller kraven, indikerar det både effektiviteten för de reagenser som används och operationens korrekthet. Endast i detta fall är batch-testet effektivt. Vissa av de positiva och negativa kontrollerna som ingår i satsen uppfyller inte kraven för kvalitetskontroll, eller laboratoriets mätförhållanden som kolorimeter etc., och skillnaden i kitbeskrivningen, lämplig kvalitet bör användas i enlighet med den faktiska situationen. Kontroller och kvalitetskontrollvärden från laboratoriet härrörande från experimentet. Kvalitetskontrollserumet för varan är dyrt. Kvalitativ bestämning av ELISA-kvalitetskontrollprodukter kan i allmänhet framställas av sig själva. HBsAg-testet tas fortfarande som ett exempel. Negativa kontroller kan tas från blodgivare som är HBsAg-negativa med högkvalitativa reagens. Den positiva kontrollen kan framställas genom att tillsätta en lämplig mängd HBsAg-positivt serum till det negativa kontrollserumet och jämföra det blandade serumet med en referensstandard eller en kvantitativ kontroll för att bestämma HBsAg-innehållet. Därefter genomförs lämplig utspädning för att erhålla HBsAg-positivt serum med den önskade koncentrationen, och därefter tillsättes en lämplig mängd antibakteriella konserveringsmedel såsom gentamicin och salicylsyra och kryokonserveras vid låg temperatur. Inspektionsprocess ELISA är en multi-reagens, multi-reagens, flera steg testmetod, som måste användas noggrant och noggrant enligt krav, annars kommer inte exakta resultat att uppnås. ELISA-procedurerna som används för att detektera olika föremål är något olika, men inkluderar steg såsom lastning, hållning, tvättning och kolorimetri. Funktionspunkter för varje steg beskrivs nedan. 1. Reagensberedning: Späd ut eller förbered reagensen som krävs för testet enligt instruktionerna i satsen. Destillerat eller avjoniserat vatten som används i ELISA, inklusive för tvätt, bör vara färskt och av hög kvalitet. Den fristående bufferten ska mätas med en pH-mätare. Temperaturen på testreagenset som tas ut från kylen bör användas efter att rumstemperaturen har uppnåtts. I tester som använder HRP som markör finns behållare förorenade med metall inte tillgängliga. 2. Laddning: Förbered en bra ELISA-platta vid behov. Prover av serum (skinnvätska) ska samlas in nyligen eller förvaras korrekt i kylskåpet. Prover som innehåller natriumazid som konserveringsmedel är inte tillgängliga för ELISA i ett steg för HRP-märkning. När du lägger till provet, lägg till provet i botten av hålet, undvik att lägga till det i den övre delen av hålväggen, och se till att inte stänk det, och inga luftbubblor bör visas. Noggrannheten i mängden prov som tillsätts i den kvantitativa bestämningen bör uppfylla de kvantitativa kraven. I den kvalitativa mätningen framhävs ibland inte noggrannheten för provmängden, till exempel föreskrivs det som en droppe. Vid denna punkt bör du använda dropparen med samma diameter och behålla rätt lastposition så att volymen för varje droppe i princip är densamma. Funktionen och kraven för tillsats av enzymkonjugatet och tillsatsen av substratet är desamma som för tillsatsen av provet. 3. Isolering: Det finns i allmänhet två antigen-antikroppsreaktioner i ELISA, det vill säga efter tillsatsen av provet och efter tillsatsen av kombinationen. Vid denna tidpunkt bör temperaturen och tiden för reaktionen vara så exakt som krävs. Den isolerade behållaren är företrädesvis ett vattenbad, och ELISA-plattans botten bör placeras i vattnet för att snabbt balansera temperaturen. Varje ELISA-platta ska inte staplas ihop. För att undvika förångning bör brädet täckas. Plattan kan också placeras platt i en våt låda med vått gasbind på botten. Den våta lådan bör förvärmas till den angivna temperaturen, till exempel är inkubatorns isolering viktigare. 4, tvätt: tvätt i ELISA-processen är inte ett reaktionssteg, men beslutade att stänga nyckeln till framgång. Syftet med tvättning är att tvätta bort substanserna i reaktionslösningen som är bundna till fastfasantigenet eller antikroppen och de störande substanserna som inte specifikt adsorberas till fastfasbäraren under reaktionen. Adsorptionen av proteiner med plast såsom polystyren är universell, så icke-specifik adsorption bör undvikas så mycket som möjligt under ELISA-analysen, och denna icke-specifikt adsorberade interfererande substans bör tvättas bort under tvätt. Tillsatsen av Tween till tvättvätskan kan förbättra tvätteffekten. Om tvätten inte är noggrann, speciellt förra gången, om det finns en icke-specifik adsorption av enzymkonjugatet, kommer tomvärdet att höjas. Vidare, i den indirekta metoden, om det icke-specifika IgG i provet adsorberas i den fasta fasen utan att tvättas, kommer det också att störa den enzymmärkta antikroppen. ELISA-plattan tvättas vanligtvis enligt följande metoder: 1 absorberar reaktionslösningen, 2 fyller plattan med tvättlösningen; 3, lägger den i 2 minuter, skakar lätt, 4 absorberar eller häller vätskan i hålet och klappar den på det absorberande papperet. Antalet tvättar är i allmänhet 3 till 4 gånger, och ibland till och med 5 till 6 gånger. En plattbricka ELISA automatisk bricka kan också användas, men instrumentets faktiska användning bör kontrolleras först. Varje pipett på brickan måste också placeras nära botten av motsvarande hål. För att säkerställa samma tvätteffekt för varje hål. 5. Färgutveckling och kolorimetrisk: Temperaturen och tiden för reaktionen efter tillsats av underlaget i den kvantitativa bestämningen bör fortfarande vara korrekt enligt föreskrifterna. Reaktionen kan emellertid generellt genomföras vid rumstemperatur i en kvalitativ analys. Om underlaget är OPD ska det placeras borta från ljus. Reaktionstiden behöver inte kontrolleras strikt, och ibland kan stopplösningen tillsättas i tid beroende på färgningen av den positiva kontrollen och den negativa kontrollen. För att säkerställa samma reaktionstid för varje brunn, bör proceduren och hastigheten för tillsats av stopplösningen vara densamma som när substratet tillsätts. Kvalitativ bestämning, såsom en negativ reaktion, är lätt, och ibland kan resultaten bedömas visuellt. Plattan ELISA använder vanligtvis en enzymetikettläsare för att läsa absorbans vid en specificerad våglängd. Den automatiska etikettläsaren bör testas med avseende på kompatibilitet med brunnarna på den använda ELISA-plattan och resultatens repeterbarhet före användning. När kolorimetrisk, kontrollera först nollpunkten med destillerat vatten, läs underlagsporerna (porerna utan någon reaktion och bara tillsätt underlaget) och de tomma brunnarna (porerna mätt med saltlösningen eller PBS istället för provet för hela processen) för att registrera denna gång. Testets reagensstatus. Därefter kan det tomma hålet användas för att kalibrera nollpunkten, och absorbansen hos provhålet, standardhålet och kontrollhålet kan läsas. Om nollpunkten fortfarande korrigeras med destillerat vatten, bör absorbansen hos ovanstående hål subtraheras från de tomma hålens absorbans vid beräkningen. Inte lämplig för publiken Olämpliga människor: I allmänhet finns det inga människor som inte är lämpliga. Biverkningar och risker Inga biverkningar.