Pepparrotsperoxidas-metrotsperoxidasmetod

Egenskaperna hos PAP-komplexet är relaterade till beredningsmetoden för reagenset. HRP används först för att immunisera djur för att producera högtiter, högspecifika anti-HRP-antikroppar, och sedan används HRP för att binda dem, eftersom HRP-anti-HRP-komplexet framställt in vitro skiljer sig från andra antigen-antikroppsreaktioner . När antigenet är något överskott, deltar alla anti-HRP-antikroppar i bildningen av lösliga PAP-komplex, vilket bara lämnar lite fritt HRP. De flesta antigen-antikroppsreaktioner kräver emellertid ett absolut överskott av antigen för att bilda ett lösligt komplex. Formen på PAP-komplexet är ganska stabil och påverkas inte av mängden antigen Oavsett den initiala tillsatsen av antigener och antikroppar är HRP / anti-HRP-förhållandet för det resulterande PAP-komplexet mestadels 3; 2. Centrifugalsedimentering appliceras. Metoderna för flytande fasdiffusion och elektronmikroskopobservation visade att PAP-komplexet har en femkantig ringstruktur, tre hörn är HRP, och de andra två hörnen är anti-HRP-antikroppar med en molekylmassa av 400-430 kDa, och denna struktur är mycket stabil.