น้ำตาแลคเตทดีไฮโดรจีเนส

LDH (EC 1.1.1.27) และ MDH (EC 1.1.1.37) ในน้ำตานั้นส่วนใหญ่มาจากเยื่อบุผิวของกระจกตา ความเข้มข้นของพวกเขาในน้ำตาประมาณ 20 เท่าของเอนไซม์ในซีรั่ม การฉีกขาด LDH ส่วนใหญ่มีหน่วยย่อย M ซึ่งมีเนื้อหาสูงสุดของ LDH5 และ LDH4 isoenzyme ของ MDH ของน้ำตาสามารถแยกออกจาก MDHs และ MDHm ได้โดยการแยกอิเลคโตรโฟรีซิสของเยื่อน้ำส้มสายชูน้ำตาของคนที่มีสุขภาพนั้น ข้อมูลพื้นฐาน ผู้เชี่ยวชาญหมวดหมู่: จักษุวิทยาการจำแนกประเภท: การตรวจทางชีวเคมี เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร ผลการวิเคราะห์: ต่ำกว่าปกติ: แผลกระจกตาจากแบคทีเรียและการบาดเจ็บจากสารเคมี keratoconjunctival ค่าปกติ: น้ำตาแลคเตทดีไฮโดรจีเนส: 1.29-9.02U / L เหนือปกติ: กระจกตาเสียหายเยื่อบุผิว conjunctival เชิงลบ: บวก: เคล็ดลับ: ขยี้ตาด้วยมือของคุณซึ่งจะทำให้เกิดการติดเชื้อในตาทำให้รุนแรงขึ้นเงื่อนไขและมีผลต่อผลการตรวจสอบ ค่าปกติ LDH1.29 ~ 9.02U / L; LDH isoenzyme LDH10.66 ± 0.51% กิจกรรม MDH คือ 0.25 ~ 2.2U / L; isoenzyme MDH MDHs 80% ~ 98.1%; MDHm> 20% นั้นผิดปกติ LDH / MDH <69 ปีคือ 3.96 ± 0.7; > อายุ 70 ​​ปี 4.55 ± 0.51 ความสำคัญทางคลินิก ผลลัพธ์ที่ผิดปกติในแผลที่กระจกตาแบคทีเรียและการบาดเจ็บของสารเคมี keratoconjunctival การฉีกขาดกิจกรรม LDH และ MDH ลดลง อัตราส่วน LDH isoenzyme H / M และ MDHm เพิ่มขึ้นในองศาที่แตกต่างกัน แต่ MDHm สามารถสะท้อนความเสียหายของกระจกตาและระดับของรอยโรค ตัวอย่างเช่นในแผลที่กระจกตาและโรคเยื่อหุ้มปอดอักเสบแห้งที่น่าสงสัย (KCS) MDHm เพิ่มขึ้นและอัตราส่วน H / M ของการฉีกขาด LDH ไม่เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญ ความมุ่งมั่นของอัตราส่วนของ LDH isoenzyme และ LDH / MDH ในน้ำตาช่วยในการวินิจฉัยแยกโรคริดสีดวงตาและเยื่อบุตาอักเสบเรื้อรัง อัตราส่วน H / M ของ LDH ในน้ำตาทั้งสองลดลงอย่างมีนัยสำคัญ แต่ในริดสีดวงตาอัตราส่วน LDH / MDH น้ำตาไม่เปลี่ยนแปลงและ M subunit ของ LDH เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญมากขึ้น จำเป็นต้องตรวจสอบการวินิจฉัยโรคกระจกตาในประชากร ผลลัพธ์ต่ำอาจเป็นโรค: ข้อควรระวังแผลที่กระจกตาแบคทีเรีย คนที่ไม่เหมาะสม: โดยทั่วไปไม่มีประชากรพิเศษ ข้อห้ามก่อนการตรวจ: การขยี้ตาด้วยมือของคุณการทำเช่นนี้จะทำให้เกิดการติดเชื้อที่ตาทำให้รุนแรงขึ้นและส่งผลกระทบต่อผลการตรวจ ข้อกำหนดสำหรับการตรวจสอบ: ตรวจสอบตามคำแนะนำของแพทย์ กระบวนการตรวจสอบ 1 วิธีการวัดสี: (1) โพแทสเซียมแลคเตทและโซเดียมแลคเตทยังสามารถใช้เป็นสารตั้งต้น LDH แต่เนื่องจากพวกเขาเป็นสารละลายน้ำเนื้อหาไม่ถูกต้องเพียงพอและการจัดเก็บที่ไม่เหมาะสมอาจทำให้เกิดกรด keto เพื่อยับยั้งปฏิกิริยาของเอนไซม์ ลิเทียมแลคเตทเป็นของแข็งมั่นคงและง่ายต่อการชั่งน้ำหนัก (2) นอกเหนือจากบัฟเฟอร์ diethanolamine แล้ว Tris หรือ pyrophosphate buffer ยังสามารถใช้เพื่อหลีกเลี่ยงการยับยั้ง LDH โดย glycine buffer ในวิธี Jinshi ดั้งเดิมและอัตราการตรวจพบในเชิงบวกก็เพิ่มขึ้น (3) การวัดสีควรเสร็จสิ้นภายใน 5 ถึง 15 นาทีมิฉะนั้นค่าการดูดกลืนแสงจะลดลง (4) เมื่อผลลัพธ์คือ> 500 U ตัวอย่างสามารถเจือจางด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยาแล้วทำการวัดและผลลัพธ์จะถูกคูณด้วยปัจจัยเจือจาง 2. วิธีการตรวจสอบอย่างต่อเนื่อง: (1) ตัวอย่างไม่ควรมีภาวะเม็ดเลือดแดงแตกเมื่อเม็ดเลือดแดงแตกถึง Hb0.8g / L กิจกรรม LDH สามารถเพิ่มขึ้น 58% (2) เก็บตัวอย่างที่อุณหภูมิห้อง (25 ° C) กิจกรรมของเอนไซม์คงที่ภายใน 2 วันกิจกรรมของเอนไซม์ในตู้เย็นลดลงและ LDH3 และ LDH4 ทั้งหมดจะปิดที่ -20 ° C ค้างคืน (3) ผลที่น่าพอใจกับพลาสม่า anticoagulated ซีรั่มหรือเฮ, oxalate สามารถยับยั้งกิจกรรม LDH (4) หลังจากการสร้างใหม่วิธีการแก้ปัญหาจะมีเมฆมากหรือการดูดซับเริ่มต้น> 0.5 ควรจะทิ้ง (5) กิจกรรมแลคเตทดีไฮโดรจีเนสสามารถวัดได้จากปฏิกิริยาแบบสองทางทั้งทางบวกและทางลบ แต่ช่วงเวลาการอ้างอิงแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับอุณหภูมิของปฏิกิริยาพื้นผิวและความเข้มข้นของบัฟเฟอร์ โดยใช้กรดแลคติคและ NAD เป็นสารตั้งต้นอัตราการเพิ่มการดูดกลืนแสงจะถูกติดตามที่ 340 นาโนเมตรเป็นปฏิกิริยาเชิงบวกซึ่งแสดงเป็น LD-L โดยใช้ไพรูเวตและ NADH เป็นสารตั้งต้นและอัตราการลดลงของการดูดซับที่ 340 นาโนเมตร เมื่อเทียบกับทั้งสองวิธีของปฏิกิริยาบวกและลบข้อดีหลักของวิธี LD-L คือ: A. ความเสถียรของของเหลวปฏิกิริยาพื้นผิวบวกมากกว่าเสถียรภาพของปฏิกิริยาย้อนกลับตู้เย็นเดิมสามารถเก็บไว้นานกว่า 6 เดือนในขณะที่หลังเป็นเพียงไม่กี่วัน ช่วงการตอบสนองของอัตราเชิงเส้น (การดูดกลืนแสงที่วางแผนกับเวลาการตรวจสอบ t) นั้นกว้างกว่า C. การทำซ้ำได้ดีกว่า LD-P เนื่องจากอัตราการเกิดปฏิกิริยาย้อนกลับนั้นเร็วกว่าอัตราการเกิดปฏิกิริยาไปข้างหน้าค่าอ้างอิงของมันจึงประมาณสองเท่าของ LD-L ไม่เหมาะกับฝูงชน ไม่มีเลย ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ไม่มีเลย