การทดสอบการเปลี่ยนแปลงของลิมโฟไซต์ PHA

การทดสอบการเปลี่ยนแปลง PHA lymphocyte เป็นการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาและชีวเคมีซึ่ง T lymphocytes และ mitogens ได้รับการเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองและเซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดเล็กบางส่วนถูกเปลี่ยนเป็นเซลล์แม่ที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ วิธี ข้อมูลพื้นฐาน การจำแนกผู้เชี่ยวชาญ: การจำแนกประเภทการตรวจมะเร็ง: การตรวจภูมิคุ้มกัน เพศที่ใช้บังคับ: ไม่ว่าจะเป็นผู้ชายและผู้หญิงใช้การอดอาหาร: ไม่อดอาหาร เคล็ดลับ: ให้ความสนใจกับอาหารสุขภาพและรักษาอารมณ์ดี ค่าปกติ การนับลิมโฟไซท์ 200 การระบุลิมโฟไบลาสต์ (มากกว่า 2 ถึง 4 เท่ามากกว่าลิมโฟไซต์ปกติ, เยื่อหุ้มนิวเคลียสที่ชัดเจน, แผ่นโลหะนิวเคลียร์หลวม, นิวเคลียสที่ดี, นิวเคลียสที่ดี, นิวเคลียสที่เห็นได้ชัด, ไซโตพลาสซึมมากมาย, basophilic) เซลล์เม็ดเลือดขาว (ปริมาณการเปลี่ยนแปลงน้อยกว่าเพียงการเปลี่ยนแปลงนิวเคลียร์ที่ชัดเจนดังกล่าวข้างต้น) เซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดเล็ก (ขนาดใหญ่กว่าเซลล์เม็ดเลือดแดงเล็กน้อยโครมาตินิวเคลียร์หนาแน่นไม่มีนิวเคลียส) อัตราการแปลงถูกนับ อัตราการแปลงผิวหนังตามปกติมากกว่า 58% ความสำคัญทางคลินิก การลดลงของอัตราการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เม็ดเลือดขาว PHA คือการตอบสนองต่อการลดลงของการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันของเซลล์ การตรวจสอบนี้ผิวหนังส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการจำแนกโรค (เช่นโรคเรื้อน) การตัดสินโรค (เช่นเนื้องอกมะเร็งผิวหนัง) การสังเกตประสิทธิภาพของยาและการศึกษาบางส่วนของโรคภูมิคุ้มกันบกพร่องและโรคผิวหนังภูมิแพ้ ผลที่ผิดปกติ อาการต่าง ๆ ที่เกิดจากการทำงานของภูมิคุ้มกันลดลง บุคคลที่ต้องการตรวจร่างกายสงสัยว่าเป็นโรคเรื้อนหรือเป็นโรคผิวหนัง ข้อควรระวัง 1. องค์ประกอบของสื่อมีอิทธิพลอย่างมากต่ออัตราการแปลงโปรดคำนึงถึงระยะเวลาที่มีประสิทธิภาพ 2. เซรั่มน่องควรปิดการใช้งานก่อนการใช้งาน 3. เมื่อเลี้ยงให้แน่ใจว่ามีก๊าซเพียงพอโดยทั่วไปปริมาณรวมของของเหลวในขวดเพาะเลี้ยงขนาด 10 มล. ไม่ควรเกิน 2 มิลลิลิตร 4. ปริมาณ PHA ที่มากเกินไปเป็นพิษต่อเซลล์มีขนาดเล็กเกินกว่าจะกระตุ้นการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เม็ดเลือดขาวได้ควรกำหนดขนาดของปฏิกิริยาการเปลี่ยน PHA ก่อนการทดสอบ 5. การปฏิบัติที่ปลอดเชื้ออย่างเข้มงวดควรดำเนินการในการทดลองเพื่อป้องกันมลพิษ ข้อห้ามก่อนการทดสอบ: ให้ความสนใจกับอาหารสุขภาพและรักษาอารมณ์ดี ข้อกำหนดสำหรับการตรวจสอบ: ร่วมมืออย่างแข็งขันกับแพทย์ กระบวนการตรวจสอบ วิธีการใช้งาน: 1. ใช้ยาต้านการแข็งตัวของเลือดเฮปาริน 0.lml เพิ่มสื่อการเพาะเลี้ยงเซลล์ 1.8ml เพิ่ม1,000μg / m1 PHA0.1m1 หลอดควบคุมที่ไม่มี PHA เพาะเลี้ยงเซลล์ที่ 37 ° C 5% CO2 สำหรับ 3 มิติเขย่า 1 ต่อวัน ครั้ง 2. ในตอนท้ายของวัฒนธรรมส่วนใหญ่ของซุปเปอร์โนวต์ถูกทิ้งและเพิ่ม 8.5 g / L NH4Cl 4 มล. และผสมและวางในอ่างน้ำอุณหภูมิ 37 ° C เป็นเวลา 10 นาที Centrifuge ที่ 3.2500r / min เป็นเวลา 10 นาทีทิ้ง supernatant เพิ่ม 5ml fixative ให้กับ pellet และปล่อยให้มันยืนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที Centrifuge ที่ 4.2500 r / min เป็นเวลา 10 นาทีทิ้ง supernatant ทิ้งเซลล์ pelleted 0.2 ml สำหรับ tableting แล้วเป่าให้แห้งอย่างรวดเร็ว 5. น้ำยาย้อมสี Giemsa ย้อมไว้ 10-20 นาทีล้างด้วยน้ำแล้วตากให้แห้ง 6. Oil Mirror นับจำนวนเซลล์ที่ถูกเปลี่ยนเป็น 200 ลิมโฟไซต์และคำนวณอัตราการแปลง ผลการตัดสิน: 1. เกณฑ์ทางสัณฐานวิทยาของ lymphoblasts: ขนาดของนิวเคลียส, อัตราส่วนของนิวเคลียสต่อไซโตพลาสซึม, การย้อมสีของไซโตพลาสซึมและโครงสร้างของนิวเคลียสและการมีหรือไม่มีนิวเคลียส (1) เซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดเล็กที่เป็นผู้ใหญ่: ขนาดของเซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดเล็กที่ไม่ได้รับการเพาะพันธุ์คือ 6-8 ไมครอน, การย้อมด้วยนิวเคลียร์มีความหนาแน่นสูง, ไม่มีนิวเคลียส, อัตราส่วนของนิวเคลียสต่อไซโตพลาสซึมมีขนาดใหญ่, และไซโทพลาสซึม (2) เซลล์เม็ดเลือดขาวในระยะเปลี่ยนผ่าน: มีขนาดใหญ่กว่าเซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดเล็กประมาณ 10 ~ 20μm, การย้อมสีนิวเคลียร์มีความหนาแน่นสูง แต่นิวเคลียสปรากฏซึ่งเป็นจุดสำคัญสำหรับการระบุของเซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดเล็กที่เป็นผู้ใหญ่ (3) lymphoblasts: ปริมาณเซลล์เพิ่มขึ้นประมาณ 20 ~ 30μmรูปร่างไม่เรียบร้อยมักจะยื่นออกมาขนาดเล็กมักจะขยายขนาดใหญ่นิวเคลียร์ย้อมสีนิวเคลียร์นิวเคลียร์หลวมมี 1 หรือ 2 นิวเคลียสพลาสซึมของนิวเคลียสมักจะ cytoplasm ฟองที่ว่างเปล่า (4) เซลล์อื่น ๆ : ตัวอย่างเช่นหลังจากเพาะเลี้ยงนิวโทรฟิลเป็นเวลา 72 ชั่วโมงส่วนใหญ่ของการสลายตัวหรือตายคือการแยกส่วน 2. การคำนวณอัตราการเปลี่ยนแปลงของเม็ดเลือดขาวหัวร่างกายและหางได้รับการตรวจสอบในการจำแนกประเภทข้างต้นและ 200 เซลล์เม็ดเลือดขาวถูกนับเพื่อคำนวณเปอร์เซ็นต์ ลิมโฟซัยต์ที่ได้รับการเปลี่ยนรูป ได้แก่ ลิมโฟไบลาสต์และลิมโฟไซท์ในระยะเปลี่ยนผ่านและลิมโฟไซต์ที่ยังไม่แปลรูปหมายถึงเซลล์เม็ดเลือดขาวขนาดเล็กที่โตเต็มที่ ภายใต้สถานการณ์ปกติอัตราการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เม็ดเลือดขาวที่เกิดจาก PHA คือ 60 ถึง 80% และถ้าเป็น 50 ถึง 60% จะต่ำและเมื่อเป็น 50% หรือน้อยกว่านั้นจะลดลง ตามผลการตัดสินที่ถูกต้องจะได้รับ ไม่เหมาะกับฝูงชน ฝูงชนที่ไม่เหมาะสม: ไม่รู้จักชั่วคราว ปฏิกิริยาและความเสี่ยงที่ไม่พึงประสงค์ ไม่มีภาวะแทรกซ้อนและอันตรายที่เกี่ยวข้อง