Nepřímý imunofluorescenční test na malárii

Existuje mnoho sérologických diagnostických metod pro malárii, tato část představuje pouze běžně používaný nepřímý imunofluorescenční test. Lidé, kteří musí být vyšetřeni: lidé se zjevnou zimnicí, chvěním těla, bledou pletí, cyanotickými rty, suchou pokožkou, podrážděností, bolestmi hlavy, nepohodlí, anorexií a dalšími příznaky. Základní informace Specializovaná klasifikace: Vyšetření a klasifikace infekčních chorob: vyšetření krve Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: půst Výsledky analýzy: Pod normální: Normální hodnota: Ne Nad normální: Negativní: Negativní <1:20, což naznačuje, že nedošlo k infekci malárií. Pozitivní: Rychlost pozitivní detekce metody fluorescenční protilátky je obecně vyšší než rychlost detekce protozoálů. Titr protilátek u pacientů s malárií falciparum je 1:80 nebo vyšší a lze jej považovat za marker nosičů nebo nedávné infekce malárií. Tipy: Nejezte příliš mastné potraviny s vysokým obsahem bílkovin den před odběrem krve, vyhněte se silnému pití. Obsah alkoholu v krvi bude mít přímý vliv na výsledky testu. Po 20:00 v den před lékařským vyšetřením by mělo být zahájeno hladovění po dobu 12 hodin, aby nedošlo k ovlivnění výsledků testu. Normální hodnota Negativní <1:20. Klinický význam Rychlost pozitivní detekce metody fluorescenční protilátky je obecně vyšší než rychlost detekce protozoálů. Titr protilátek u pacientů s malárií falciparum je 1:80 nebo vyšší a lze jej považovat za marker nosičů nebo nedávné infekce malárií. Pozitivními výsledky mohou být nemoci: malárie, mozková malárie, plicní malárie, malárie Před prohlídkou: 1, nejíst příliš mastné jídlo s vysokým obsahem bílkovin den před krví, aby nedošlo k silnému pití. Obsah alkoholu v krvi přímo ovlivňuje výsledky testu. 2. Po 20:00 v den před lékařským vyšetřením byste měli začít půst 12 hodin, abyste se vyhnuli ovlivnění výsledků testu. 3, měl by při odběru krve relaxovat, aby se zabránilo kontrakci cév způsobených strachem, zvýšit obtížnost odběru krve. Po prohlídce: 1. Po odebrání krve je nutné na dírce po dobu 3-5 minut provést místní kompresi, aby se zastavilo krvácení. Poznámka: Netřete, abyste nezpůsobili podkožní hematom. 2, doba lisování by měla být dostatečná. Pro každou osobu je rozdíl v době srážení a někteří lidé potřebují ke srážení trochu déle. Proto, když se zdá, že povrch kůže krvácí, je komprese okamžitě zastavena a krev může být infiltrována do kůže v důsledku neúplné hemostázy. Proto je doba komprese delší, aby se úplně zastavilo krvácení. Pokud existuje tendence ke krvácení, měla by být doba komprese prodloužena. 3, poté, co krev odebrat příznaky mdloby, jako jsou: závratě, závratě, únava atd. By měl okamžitě lehnout, vypít malé množství sirupu a poté, co zmírní příznaky, podstoupit fyzické vyšetření. 4. Pokud dojde k lokálnímu přetížení, použijte po 24 hodinách teplý ručník, aby se zvýšila absorpce. Proces inspekce 1. Princip nepřímého imunofluorescenčního testu na malárii Anti-Plasmodium protilátka v testovaném séru je kombinována s Plasmodium antigenem na krevním řezu, následuje fluorescenčně značená anti-lidská IgG protilátka, která působí na lidský IgG na krevním řezu a vykazuje fluorescenci v místě antigenu. 2, činidla (1) Antigenní krevní film je tenký krevní film Plasmodium cynomolgus a tenký krevní film Plasmodium falciparum. K dispozici jsou profesionální výzkumné instituce. Uchovávejte při 4 ° C nebo mrazničce při nízké teplotě. (2) Fluorescenčně značený anti-lidský IgG, který je v zemi komerčně dostupný. 3, provozní metoda (1) Sérum bylo odebráno obvyklým způsobem nebo byla na filtrační papír lisována zkumavka ze skleněné (železné) zkumavky o průměru 1,2 cm. Krev se odebere z ucha nebo prstu subjektu a naplní se kruhem. Objem krve je asi 20 μl (asi 10 μl séra). Po vysušení čísla se umístí do uzavřeného plastového sáčku s vysoušedlem a převede se do laboratoře při 4 ° C. Až na půl roku lze -20 ° C skladovat po dobu 2 let. Během testu byly sušené krevní kapky nařezány do jamek reakční destičky, bylo přidáno 0,2 ml (pH 7,2) 0,01 mol / l fosfátového pufru a ředění séra odpovídající 1:20 bylo získáno namáčením přes noc při 4 ° C. (2) Odstraňte antigenní krevní film z chladničky a okamžitě jej vysušte elektrickým ventilátorem. Rozdělte každou vrstvu antigenu do několika malých buněk pomocí speciální pastelky. Zkuste 1 vzorek nebo 1 titr na buňku a přidejte 1 sérum na buňku. Kapky. Negativní, pozitivní referenční sérum a PBS slepé kontroly byly vyžadovány pro každou šarži pokusů. Bezprostředně po přidání séra byla směs přenesena do vlhkého boxu a po inkubaci při 37 ° C po dobu 30 minut byla pomalu promyta 0,01 mol / l PBS (pH 7,2) a potom ponořena do PBS válce po dobu 5 až 10 minut. (3) Nařeďte fluorescenční protilátku proti lidskému IgG zředěnou 1:10 pomocí 0,01 mol / l PBS (pH 7,2) a umístěte ji do vlhké komory při 37 ° C na 30 minut. Po promytí stejným způsobem přidejte do každé buňky glycerol a PBS. Na krycí fólie bylo naneseno stejné množství směsného roztoku nebo destilované vody a výsledky reakce byly zkoumány pod fluorescenčním mikroskopem. (4) Interpretace výsledků: Intenzita fluorescence a jasnost struktury schizontové a trofosoitové cytoplazmy se rozlišují, žádná fluorescence není (-), fluorescence je slabá, morfologická struktura je nejasná (±), fluorescence je slabá a morfologická struktura Je stále jasný (+) a dále se dělí na (2+) až (4+) podle zvýšení jasu fluorescence a strukturní definice. Obecně je intenzita fluorescence (+) nebo vyšší považována za pozitivní při ředění séra 1:20. Nevhodné pro dav Ti, kteří nemají indikaci ke zkoušce, by tuto kontrolu neměli provádět. Nežádoucí účinky a rizika Obecně žádné komplikace a poškození.