telomeráza

Telomeráza je speciální reverzní transkriptáza sestávající z RNA a proteinu zapojeného do syntézy telomer (specifická nukleotidová sekvence a struktura) na koncích DNA eukaryotických buněk. Délka telomery u normálních somatických buněk se při dělení buněk postupně zkracuje a zvyšuje se aktivita telomerázy a délka telomery se může udržovat bez zkrácení, takže buňky se mohou množit a stát se rakovinovými. Detekci telomerázy a její inhibitory lze proto použít k diagnostice a léčbě nádorů. Základní informace Specializovaná klasifikace: Klasifikace onkologických vyšetření: imunitní vyšetření Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: ne půst Výsledky analýzy: Pod normální: Normální hodnota: Ne Nad normální: Negativní: Normálně negativní. Pozitivní: Drobný karcinom plic má zvýšenou aktivitu telomerázy v časném stádiu a nemalobuněčný karcinom plic má více změn aktivity než ve středním stádiu. Tipy: Udržujte normální myšlení. Normální hodnota Negativní. Klinický význam Je vhodný pro diagnostiku a diferenciální diagnostiku různých nádorových onemocnění. Nadmořská výška: rakovina jater (93,88 OD / 30 μg protein), tkáň obklopující rakovinu (24,09 OD / 30 μg protein). Drobný karcinom plic má zvýšenou aktivitu telomerázy v časném stádiu a nemalobuněčný karcinom plic má více změn aktivity než ve středním stádiu. Pozitivními výsledky mohou být onemocnění: preventivní opatření proti rakovině pankreatu a štítné žlázy 1. Dávejte pozor, abyste zabránili laboratorní kontaminaci a falešně pozitivní nebo falešně negativní. 2. Dávejte pozor, abyste odstranili inhibitor polymerázy obsažený ve vzorku tkáně, abyste snížili falešné negativy. 3. Technologie scintilační analýzy, metoda ELISA, metoda hybridizace in situ jsou spolehlivější než metoda TRAP. Proces inspekce Ihned po odběru vzorků krve jsou tyto vzorky odeslány k vyšetření a imunotestu na nádor. Detekční operace: Genomická DNA byla 0,1 μg, pufr obsahující 50 mmol / L chloridu draselného, ​​10 mmol / LTris-HCI (pH 8,4), 1,5 mmol / L chloridu hořečnatého, 100 μg želatiny, každý primer byl 0,25 μmol / l; dATP, dCTP, dGTP DTIP byl každý 200 μmol / l, DNA polymeráza byla 2,5 U a konečný objem byl 100 μl. Přidejte několik kapek tekutého parafinu, abyste zabránili odpařování. Reakční cyklus: 1 Denaturace: 90 ° C po dobu 30-60 s, teplota žíhání 2 primerů a templátu: 40-60 ° C 30-60 s, 3 prodloužení: 72 ° C 1-2 min. Po opakovaných cyklech 30 až 40krát bylo poslední prodloužení primeru 7 ° 72 ° C ukončeno po dobu 7 minut. Po odstranění tekutého parafinu je produkt k dispozici pro analýzu. Po elektroforéze na agarózovém gelu bylo barveno ethidiumbromidem a ozářením UV lampou byl pozorován fluorescenční proužek očekávané délky amplifikace. Produkt může být také hybridizován s Southern blot nebo spot blot s radioaktivně značenou nebo neradioaktivně značenou oligonukleotidovou sondou. Je vhodnější použít automatický přístroj PCR Po přidání reakčního činidla, templátu DNA a Taq-DNA polymerázy do zkumavky se provede upravený postup, tj. Požadovaná teplota, čas a prodloužení příslušné teploty a času a počet cyklů. Reakce se provádí v automatickém přístroji, aby se získal uspokojivý produkt amplifikace. Nevhodné pro dav Ti, kteří nemají indikaci ke zkoušce, by neměli být testováni. Nežádoucí účinky a rizika 1. Infekce: Při odběru krve věnujte pozornost aseptickým operacím, vyhněte se kontaminaci vody a dalších částí v místě odběru krve, abyste zabránili místní infekci. 2, krvácení: poté, co je krvi dána plná doba komprese, zejména koagulopatie, sklon ke krvácení, aby nedošlo k lokálnímu subkutánnímu vytekání, tvorbě modřin a otokům.