fibrinopeptid A

Fibrinopepid-A (FPA) je štěpení peptidového řetězce mezi sperminem-16 a glycinem-17 a (A) řetězce fibrinogenu působením trombinu a skládá se z 1 až 16 aminokyselin. Fibrinový peptid A. Je to spolehlivý indikátor koagulační aktivity v těle a konečné tvorby trombu ve fibrinu. Zvýšené plazmatické hladiny FPA odrážejí aktivaci koagulačního systému a tvorbu trombinu. Proto se nachází v hyperkoagulačním stavu a trombotickém onemocnění, identifikaci primární a sekundární fibrinolýzy a monitorovacích ukazatelích během antikoagulační terapie. Základní informace Specializovaná klasifikace: klasifikace vyšetření růstu a vývoje: vyšetření krve Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: půst Tipy: Odběr krve by neměl být> 45 s a první 2 ml by měly být zlikvidovány. Stříkačka by měla být silikonová nebo plastová. Normální hodnota 1,2 ± 0,8 μg / l Klinický význam Zvýšené plazmatické hladiny FPA odrážejí aktivaci koagulačního systému a tvorbu trombinu. Proto se nachází v hyperkoagulačním stavu a trombotickém onemocnění, identifikaci primární a sekundární fibrinolýzy a monitorovacích ukazatelích během antikoagulační terapie. Vysokými výsledky mohou být nemoci: diseminovaná intravaskulární koagulace u dětí, těhotenství s trombotickým onemocněním, diseminovaná intravaskulární koagulace u seniorů (1) Odběr krve by měl být plynulý a neměl by být> 45 s, první 2 ml by se mělo zlikvidovat. Stříkačka by měla být silikonová nebo plastová. (2) Ihned po odběru krve vstříkněte do zkumavky obsahující antikoagulanty a rychle ji promíchejte v ledové vodě. Je-li třeba ji uchovat, je po adsorpční léčbě bentonitem vhodnější při -20 ° C. Proces inspekce (1) Odběr vzorků plazmy: 4,5 ml žilní krve bylo hladce odebráno plastovou injekční stříkačkou (první 2 ml bylo vyřazeno) a byla přidána zkumavka obsahující 0,5 ml antikoagulantu (heparin sodný 500u a aprotinin 5000u) a okamžitě promíchán. Centrifugujte při 3000 r / min po dobu 20 minut, oddělte plazmu a natáhněte horní plazmu do jiné zkumavky pro okamžité ošetření nebo skladování při -20 ° C. (2) Bentonitová adsorpční úprava vzorků plazmy: účelem je úplné odstranění fibrinogenu. 40 mg bentonitu bylo přidáno do 45 ml polypropylenové plastové centrifugační zkumavky, bylo přidáno 0,5 ml adsorpčního pufru a směs byla důkladně promíchána, byl přidán 1 ml plazmy, protřepán a smíchán v cyklónovém mixéru a pomalu protřepáván po dobu 10 minut. Centrifugujte při 5000 r / min po dobu 15 minut, odsajte supernatant do jiné zkumavky a poté jej jednou ošetřete bentonitem, jak je popsáno výše. Poté byl 1 ml supernatantu odsát a přidán do testovací zkumavky obsahující 50 ul 20 g / LTween 20 roztoku a smíchán. Konečný vzorek byl zředěn 20krát. (3) Povlak FPA: 1 ug / ml FPA byl rozpuštěn v potahovacím pufru, byla přidána polystyrenová reakční destička, 200 ul / jamka, uzavřena a přes noc při 37 ° C. Díra byla vyřazena další den. Destička byla 5krát promyta promývacím roztokem, pokaždé 3 minuty, sušena a ušetřena. (4) FPA standard: 6 druhů různých koncentrací, jako je 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 ng / ml. 0,9 ml bylo odděleně aspirováno do řady malých zkumavek a do každé zkumavky bylo přidáno 0,1 ml pracovní koncentrace králičí anti-lidské FPA. Vzorky plazmy, které mají být testovány adsorpcí bentonitu, byly provozovány jako výše a koncentrace 1: 2, 1: 4krát byly jako výše. Každá z výše uvedených zkumavek reagovala při 37 ° C po dobu 3 hodin. (5) 200 μl každé z výše uvedených zkumavek po inkubaci bylo pipetováno do každé jamky potaženého FPA a destička byla inkubována při 37 ° C po dobu 2 hodin, promyta 5krát a sušena. (6) Každá jamka byla přidána s HRP-kozím anti-králičím IgG (zředěným na pracovní koncentraci standardním ředěním) 200 ul / jamku a destička byla inkubována při 37 ° C po dobu 2 hodin, promyta 5krát a sušena. (7) Přidejte 200 μl čerstvě připraveného roztoku substrátu do každé jamky a přesně reagujte při 37 ° C po dobu 3 minut ve tmě a okamžitě do každé jamky přidejte 3 mol / l H2S04 450 μl, aby se reakce ukončila. Hodnota A (492 nm) každé jamky byla stanovena na enzymové značce. Nevhodné pro dav Hemofilie a difúzní intravaskulární koagulace. Nežádoucí účinky a rizika Riziko infekce: Používáte-li nečistou jehlu, můžete být vystaveni riziku infekce.