Enzymově vázaný imunosorbentní test

Enzymaticky vázaný imunosorbentový test je enzymově vázaný imunosorbentový test. Používá se k detekci testovaného antigenu (nebo protilátky), který je potažen v jamce destičky na pevné fázi. To znamená, že protilátka je značena enzymem a známý antigen nebo protilátka je adsorbována na povrchu nosiče pevné fáze a reakce antigen-protilátka je prováděna na povrchu nosiče pevné fáze a volná složka v kapalné fázi je odplavena promytím a nakonec působí enzymem. Barva se vyvíjí po substrátu pro posouzení výsledku. Hloubka barevné reakce je úměrná množství odpovídající protilátky nebo antigenu ve vzorku. Tato barevná reakce může být kvantitativně stanovena detektorem ELISA, který kombinuje citlivost enzymové chemické reakce se specificitou reakce antigen-protilátka, což z metody ELISA činí specifickou i citlivou detekční metodu. Základní informace Odborná klasifikace: klasifikace růstu a vývoje: imunologické vyšetření Použitelné pohlaví: zda muži a ženy používají půst: ne půst Výsledky analýzy: Pod normální: Normální hodnota: Ne Nad normální: Negativní: Normální. Pozitivní: Lidské tělo je v dynamické rovnováze a nezdravém stavu. Tipy: Při kontrole relaxujte. Normální hodnota Druh a podíl flóry v těle jsou normální a lidské tělo je ve stavu dynamické rovnováhy a zdraví. Klinický význam Enzymaticky vázaný imunosorbentový test je nejrozšířenější technikou v enzymatickém imunotestu. Mezi běžně používané metody ELISA patří sendvičová metoda s dvojitou protilátkou a nepřímá metoda, první metoda pro detekci makromolekulárních antigenů a druhá metoda pro měření specifických protilátek. Z hlediska parazitárních nemocí se používá pro sérologickou diagnostiku Plasmodium, Améba, Liegemann, Trypanosoma, Schistosomiasis, cysticercosis, Toxoplasma, Schistosomiasis, Fluorescens, Bloodworm, Trichinosis To je důležité jak pro lékaře, tak pro veterináře. Používá se k detekci protilátek proti Streptococcus, Salmonella, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus, Vibrio cholerae, Neisseria gonorrhoeae, Candida atd. A lze jej také použít pro tetanický antitoxin a Vibrio cholerae antitoxin. Stanovení a detekci protilátek proti rickettsiové infekci rickettsií lze diagnostikovat. Rickettsia lze také použít k identifikaci blízce příbuzných druhů. Existují také zprávy o vyšetřování protilátek proti Chlamydia psittaci. Virus chřipky, virus příušnic, spalničky, zarděnky, rotaviry, herpes virus, cytomegalovirus, EB virus, adenovirus, enterovirus, virus encefalitidy, virus žluté zimnice, vzteklina Toxické a poliovirus atd. Jsou citlivější než dosud používané kontrolní metody. U imunologických onemocnění existují testy pro detekci autoimunitních onemocnění a diagnostiku alergií, jako jsou protilátky proti různým alergenům, DNA protilátky a tyreoglobulinové protilátky, erytematosové protilátky a podobně. V hygieně může být použit k detekci stafylokokového enterotoxinu a toxinu salmonel v potravinách. Pozitivními výsledky mohou být nemoci: získaná bulózní epidermolýza, trypanosomiáza, schistosomiáza a hepatobiliární onemocnění, toxoplasmózová skleritida, Gestmanův syndrom, novorozená vrozená toxoplasmóza, jaterní motolice, Sibiřská rickettsie pozorovaná horečka, střevní piriflagelát, turistická průjemová opatření 1. Substrát: Různé enzymy mají specifičnost pro substrát, takže použití různých typů enzymů vyžaduje různé substráty. Jakmile byl enzymový konjugát stanoven (např. AP nebo HRP), rozsah substrátů dostupných pro selekci je velmi omezený. Jak vybrat vhodný substrát v rámci tohoto omezeného substrátu by měl být vybrán podle následujících podmínek: (1) Substrát by měl být bez katalyzátoru enzymem bezbarvý a po katalýze enzymem by měl mít zřejmou barvu. Změnit tak, aby bylo možné výsledky jasně rozlišit; (2) barva je snadno zasychatelná a eluována; (3) produkt musí být po vývoji barvy stabilní, barevná látka vyrobená v kvantitativním stanovení by měla být rozpustná; (4) cena Levné, snadno dostupné a netoxické. Proto se pro AP enzymový konjugát obvykle používá nitrofenylfosfát a barva je oranžová po vývoji barvy a barva je stabilní. Reakce je ukončena 2 mol / l NaOH a hodnota OD může být měřena při vlnové délce 403 nm. 2. Prací prostředek a ředidlo: Aby se maximalizovalo množství specificky vázané protilátky, měl by být antigen potažený v jamce mikrodestičky mírně nadbytek. Během inkubace nebo promývání však může být část adsorbovaného antigenu vymyta z pevného podkladu. Proto je pravděpodobné, že protein jiný než specifická protilátka přidaná do testovaného séra adsorbuje na blank původní jamky potažené antigenem, zvyšuje barvu pozadí a vytváří falešně pozitivní reakci, což je faktor omezující specificitu testu ELISA. Mnoho vědců přidalo různá ochranná činidla k ředidlům a detergentům k inhibici kompetitivní adsorpce nespecifických proteinů. Proces inspekce Základní metodou je adsorpce známého antigenu nebo protilátky na povrch nosiče v pevné fázi (polystyrenová mikrotitrační destička), reakce enzymem značené reakce antigen-protilátka na povrchu pevné fáze a promytí volných složek v kapalné fázi promytím. Kromě. Podle nosiče pevné fáze použitého v testu ELISA je rozdělen do tří typů: jedním je ELISA používající jako nosič polystyrenovou mikrodestičku, což je obvykle ELISA (mikrotitrační destička ELISA), druhý používá jako nosič nitrocelulózovou membránu. ELISA se nazývá spotová ELISA (Dot-ELISA), druhou je ELISA používající hydrofobní polyesterovou tkaninu jako nosič, nazývanou tkanina ELISA (C-ELISA). V mikrotitrační destičce ELISA se dále dělí na nepřímou ELISA, sendvičovou ELISA s dvojitou protilátkou, ELISA s dvojitým sendvičem, konkurenční ELISA, blokující ELISA a ELISA pro zachytávání protilátek podle svých vlastností. Nevhodné pro dav Neexistují žádná zvláštní tabu. Nežádoucí účinky a rizika Nejsou žádné související komplikace a rizika.