komplementfikseringsassay

Bestemmelsen af ​​komplement inkluderer bestemmelse af total komplement, hæmolytisk aktivitet, individuelle komplementkomponenter og komplementfragmentstørrelse og komplementdeltagelse i assayet. Antigen-antistofkomplekset kombineres med komplement, og det fænomen, at koncentrationen i komplementreaktionsopløsningen indeholdende den kendte koncentration forbruges for at reducere koncentrationen til at detektere antigenet, eller antistoffet er en af ​​metoderne til at detektere den høje følsomhed, især ifølge fremgangsmåden. Denne metode kan også anvendes, når antigen-antistofreaktionen ikke kan observeres ved en præcipiteringsreaktion eller en agglutineringsreaktion. Grundlæggende information Specialistklassificering: Inspektion og klassificering af infektionssygdomme: Pathogen mikroorganismekontrol Gældende køn: om mænd og kvinder anvender faste: faste Analyseresultater: Under det normale: Normal værdi: ingen Over normal: Negativ: Normal værdi, negativ, dvs. 0 til 1:10. Spørg ikke inficeret med en infektiøs virus. positiv: En positiv indikation er inficeret af en infektiøs virus. Tip: Betjeningstrinnene er komplicerede, og kravene er meget strenge. Hvis du er lidt uagtsom, får du forkerte resultater. Normal værdi Normal værdi: 0 til 1:10. Klinisk betydning Unormale resultater:> 1:10 var positive, og sammenfaldshastigheden for diagnose af brucellose var 97,96%. Supplerende bindende assays kan anvendes på følgende måder: 1 diagnose af infektionssygdomme. Påvisning af patogene antigener og tilsvarende antistoffer. 2 påvisning af andre antigener. F.eks. Tumorassocierede antigener, proteinidentifikation i blod, HLA-typning og lignende. 3 registrering af autoantistof. Forholdsregler Funktionen skal være omhyggelig og nøjagtig; glasudstyret skal være meget rent; de kendte ingredienser, der er involveret i testen, skal titreres på forhånd og bruges til den specificerede koncentration for at sikre pålidelige resultater. Inspektionsproces (1) Titrering af blod: 1 Tag 1 ml komplement, tilsæt 9 ml BBS, og fortynd derefter til 1:20, 1:30, 1:40, 1:50, 1:60, 1:80, 1: 100, 1: 200, 1: 400, og tag 50 0,2 ml hæmolysin, tilsæt 9,8 ml BBS, som er 1: 100 hæmolysin, og fortsæt derefter med at fortynde til 1: 800, 1: 1600, 1: 3200, 1: 6400. 2 Tag den firkantede række prøverør, tilsæt i længderetningen 0,1 ml forskellige koncentrationer af komplement, og tilsæt 0,1 ml hemolysin i hver række (alt skal tilsættes fra den højeste fortynding), tilsæt derefter BBS0,2 ml, komplement og Hemolysin-kontrolrørene blev hver tilsat BBS 0,3 ml, og til sidst blev 2% får røde blodlegemer sat til hvert rør. Den samlede mængde af hvert rør var 0,5 ml, rystet, anbragt i en 37 ° C vandtank i 30 minutter, og resultaterne blev observeret. Den højeste fortynding af komplet hæmolyseret komplement og hemolysin er den respektive enhed. I praktiske anvendelser bruges hemolysin i 2U (3200 ÷ 2 = 1600), og komplement bruges i 2,5U (80 ÷ 2,5 = 32). (2) Formel test: 1 Brug en V-type mikroplade, og lav en testbrønd til hvert prøve. En serumkontrolbrønd. BBS0.025ml blev tilsat til hver brønd. 2 Dyp serum (0,025 ml) med en fortyndingspind til den første brønd, drej og overfør til den anden brønd i alt otte brønde, hvorved der opnås en fortynding på 1: 2 til 1: 256. Et eksempel på et komplementbindingsassay til måling af antistoffer med en lille mængde er beskrevet. Tilsæt gradvist forskellige reagenser, observer de forskellige kontrolrør efter inkubation og skal være i overensstemmelse med de forventede resultater. Negative og positive kontrolrør skal tydeligt hæmolyseres og ikke-hæmolyseres; antistof- eller antigenkontrolrør, serumkontrolrør, der skal testes, og kontrolrør med positive og negative kontroller bør være fuldstændigt hæmolyseret. Spontan hæmolyse bør ikke forekomme i fårrøde blodlegemer. Komplementkontrolrøret skal vise 2U for total opløsning, 1U for total opløsning med lidt røde blodlegemer, og 0,5U skal være uopløseligt. F.eks. Indikerer den komplette opløsning af 0,5U-komplementkontrol, at mængden af ​​komplement er for høj; hvis 2U-kontrolrøret ikke viser hæmolyse, hvilket indikerer, at mængden af ​​komplement er utilstrækkelig, påvirkes resultaterne, og testen skal gentages. Resultaterne af komplementfikseringstesten viste, at testserumet ikke var hæmolyseret og hæmolysen var negativ. Ikke egnet til mængden De, der ikke har en indikation til undersøgelse, bør ikke foretage denne kontrol. Bivirkninger og risici Generelt ingen komplikationer og skade.