Ensayo de sorción combinado de enzimas

El ensayo de inmunosorbente ligado a enzimas (en lo sucesivo denominado ELISA) es la técnica más utilizada en inmunoensayo enzimático. Se utiliza para detectar el antígeno (o anticuerpo) a analizar que está recubierto en el pozo de la placa de fase sólida. Es decir, el anticuerpo se marca con una enzima, y ​​el antígeno o anticuerpo conocido se adsorbe en la superficie del vehículo en fase sólida, y la reacción antígeno-anticuerpo se lleva a cabo en la superficie del vehículo en fase sólida, y el componente libre en la fase líquida se lava mediante lavado, y finalmente la enzima actúa sobre él. El color se desarrolla después del sustrato para juzgar el resultado. Información básica Clasificación de especialistas: clasificación de verificación de crecimiento y desarrollo: examen bioquímico Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican el ayuno: ayuno Consejos: obedezca las instrucciones del médico al verificar. Valor normal La proporción del suero a analizar con respecto al suero negativo conocido (P / N) fue <2.1, y el valor de OD del suero a analizar fue <0.4, que se consideró negativo. Importancia clínica Resultados anormales: la relación del suero a analizar con el suero negativo conocido (P / N) ≥ 2.1, y el valor de OD del suero a analizar es ≥ 0.4, se considera positivo. Necesidad de verificar la multitud: detectar antígeno y anticuerpo. Precauciones Contraindicaciones antes de la inspección: Prepare varias soluciones de envasado y establezca la concentración. Tabú al verificar: 1. Controlar estrictamente los factores que afectan la eficiencia del etiquetado, como la temperatura, el tiempo, el pH, la cantidad de enzimas y anticuerpos. 2. Al instalar la columna, haga que la columna sea uniforme, la superficie del cilindro es plana, sin burbujas ni grietas. Proceso de inspección Los métodos ELISA de uso común incluyen un método sandwich de doble anticuerpo y un método indirecto, el primero para detectar antígenos macromoleculares y el segundo para medir anticuerpos específicos. ELISA indirecto Este método se usa principalmente para detectar anticuerpos. El procedimiento para ELISA indirecto es el siguiente. (1) Materiales 1 líquido de recubrimiento, líquido de lavado, líquido de conservación de calor, líquido de sustrato y líquido de parada. Antígeno recubierto con 2DVH, anti-anticuerpo marcado con enzima, suero de referencia DVH negativo y positivo. 3 Detector ELISA, muestra, microplaca de poliestireno. (2) Pasos del método 1 recubrimiento de antígeno más → 4 ° C durante la noche, lavar tres veces, secar. Suero 2 plus a analizar → 37 ° C durante 2 horas, lavar tres veces, secar. 3 Añadir el anticuerpo marcado con enzima → 37 ° C durante 2 horas, lavar tres veces, secar. 4 Agregue la solución de sustrato → 37 ° C durante 30 minutos, agregue la solución de parada. 5 El valor de OD se midió mediante un detector ELISA y se calculó la relación P / N. 2. ELISA sandwich de doble anticuerpo Este método se utiliza principalmente para detectar antígenos macromoleculares. 1 Añadir recubrimiento de anticuerpo → 4 ° C durante la noche, lavar tres veces, secar. 2 Agregue el antígeno a analizar → 37 ° C durante 30 minutos, lave tres veces y seque. 3 Agregue el anticuerpo marcado con enzima → 37 ° C durante 30 minutos, lave tres veces y seque. 4 Agregue la solución de sustrato → 37 ° C durante 15 minutos, agregue la solución de parada. 5 El valor de OD se midió mediante un probador de ELISA. No apto para la multitud. No apto para la multitud: no. Reacciones adversas y riesgos No hay complicaciones o riesgos relacionados.