Prueba de neutralización

La prueba de neutralización se basa en la determinación de la infectividad del virus y la capacidad del suero inmune para neutralizar el virus en base a la comparación de la infectividad residual del virus después de la neutralización por el suero inmune. Cuando un animal se infecta con un virus, se produce un anticuerpo neutralizante específico en el cuerpo y se une específicamente al virión correspondiente, evitando así que el virus se adsorba a la célula sensible o inhiba su invasión, de modo que el virus pierde su capacidad de infectar. Información básica Clasificación de especialistas: examen de enfermedades infecciosas y clasificación: examen inmunológico Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican en ayunas: no en ayunas Resultados de análisis: Debajo de lo normal: Valor normal: No Por encima de lo normal: Negativo: Menos de 10 es negativo y no tiene virus. 10 a 49 son sospechosos. Positivo: En general, un índice de neutralización superior a 50 se considera positivo y hay un virus presente. Consejos: preste atención a los hábitos alimenticios normales y preste atención a la higiene personal. Valor normal Método del virus de dilución de suero fijo: para los virus, generalmente el índice de neutralización es mayor que 50, y de 10 a 49 son sospechosos, y menos de 10 es negativo. Prueba de neutralización valor normal: el cuerpo humano se encuentra en un equilibrio dinámico y en un estado saludable. Importancia clínica Esta prueba se utiliza principalmente para detectar anticuerpos del suero a analizar, o para detectar virus del material de la enfermedad, diagnosticando infecciones virales; 2 para verificar las toxinas en los materiales con suero antitoxina o para identificar el tipo de toxinas en la bacteria; Suero viral o título de antitoxina; 4 Identificación y tipificación de virus recién aislados, la prueba de neutralización se puede llevar a cabo no solo en animales experimentales susceptibles, sino también en cultivos celulares o embriones de pollo. Los métodos de prueba incluyen principalmente una prueba cualitativa simple, un método de virus de dilución de suero fijo, un método de suero de dilución de virus fijo y un método de reducción de placa. Los resultados positivos pueden ser enfermedades: paperas, SIDA, fiebre del dengue, encefalitis japonesa, exantema del virus Coxsackie, fiebre aftosa, precauciones contra la rabia Prohibido antes del examen: Preste atención a los hábitos alimenticios normales y preste atención a la higiene personal. Requisitos para la inspección: cooperar activamente con el médico. Proceso de inspección (1) Prueba de neutralización cualitativa simple Este método se utiliza principalmente para detectar el virus en el material de la enfermedad, y también se puede identificar o finalizar inicialmente. Los animales de prueba (o embriones de pollo, cultivo celular) y las rutas de inoculación se seleccionan primero en función de la susceptibilidad viral. El material se muele y se diluye a una cierta concentración (aproximadamente 100 LD50 ~ 1000 LD50 o TCID50). Los materiales contaminados deben agregarse antibióticos (200 a 1000 unidades de penicilina y estreptomicina), o filtrarse con un filtro bacteriano, mezclarse con antisuero conocido (diluido de manera apropiada o no) y diluirse con suero normal. Para la comparación. Después de mezclar, las células se inocularon a 37 ° C durante 1 h, y al menos 3 animales en cada grupo. Alimentación por aislamiento, observación de morbilidad y mortalidad. Los animales de control murieron, mientras que los animales del grupo de neutralización no murieron, lo que confirmó que la enfermedad contenía el virus correspondiente al antisuero. Este método también se puede utilizar para la identificación y tipificación de toxinas (como las toxinas). (2) Método fijo de virus de dilución de suero En este método, el virus se diluyó 10 veces en incrementos, y se colocaron dos tubos, se añadió la primera columna con suero normal (grupo de control) y la segunda columna con suero para analizar (grupo de prueba). Después de mezclar, las células se inocularon a 37 ° C durante 1 h, y cada mezcla de tubos se inoculó por separado en los animales de prueba seleccionados, y se usaron de 3 a 5 animales para cada dilución. Después de la inoculación, observe diariamente y registre el número de muertes. Después de la observación, calcule la DL50 y el índice de neutralización (Tabla 7-1, Tabla 7-2). Este método es aplicable a la detección de una gran cantidad de muestras. Este método se usa principalmente para detectar anticuerpos neutralizantes en el suero que se va a analizar. Para los virus, el índice de neutralización suele ser mayor que 50 y es positivo, 10 a 49 es sospechoso y menos de 10 es negativo. (3) Método de suero de dilución de virus fijo Este método se utiliza para determinar el precio de neutralización del suero antiviral. El suero a analizar se diluye 2 veces y se agrega la solución de virus con el mismo valor tóxico (mezclado con suero, cada dosis contiene el virus 100LD50), agite bien. Los animales de prueba se inocularon a 37 ° C durante 1 h. Nota: [1] Dosis de inoculación 0.1 ml, que contiene virus 100LD50. [2] se refiere a la dilución después de mezclar con el virus. [3] El denominador es el número de inoculaciones, y el numerador es el número de protección. [4] PD50 es media protección, y su método de cálculo es el mismo que el cálculo de LD50. (4) método de reducción de placa La prueba de neutralización del virus se realizó en cultivo celular, y en los últimos años, el método de reducción de la placa se utilizó con frecuencia. Primero, el virus se diluye a una concentración apropiada, de modo que se mezclan 80 a 100 UFP (unidad formadora de placa) por 0.2 ml con las diferentes diluciones del suero a analizar, y se coloca a 37 ° C durante 1 ha 2 h para medir la UFP, respectivamente. Una dilución del suero al 50% de la placa es el precio de neutralización del suero. Ver Tabla 7-4. Tabla 7-4 Ejemplo de prueba de neutralización para el método de reducción de placa Nota: [1] El suero se diluyó en incrementos de 4 veces. [2] La placa se reduce en un 50% de la dilución del suero, y el método de cálculo es el mismo que el cálculo de LD50. No apto para la multitud. Las personas con función hematopoyética reducida, como leucemia, varias anemia, síndrome mielodisplásico o personas con trombocitopenia, deben prestar atención a la extracción de sangre y no deben tomar más o más sangre. Reacciones adversas y riesgos 1. Después de extraer la sangre, no presione el agujero de la aguja para evitar el hematoma subcutáneo. Si hay un pequeño hematoma en la sangre, es ligeramente sensible, no se preocupe, puede hacer una compresa caliente después de 24 horas para promover la absorción de sangre. La pequeña cantidad general de congestión se absorberá gradualmente en 3 a 5 días y el color se aclarará y volverá a la normalidad. 2. Después de la extracción de sangre, los síntomas como mareos, vértigo, fatiga, etc. deben ser inmediatamente en decúbito supino, beber una pequeña cantidad de jarabe y luego someterse a un examen físico después de que se alivien los síntomas.