ensayo de fijación del complemento

La determinación del complemento incluye la determinación del complemento total, la actividad hemolítica, los componentes del complemento individual y el tamaño del fragmento del complemento, y la participación del complemento en el ensayo. El complejo antígeno-anticuerpo se combina con el complemento, y el fenómeno de que la concentración en la solución de reacción del complemento que contiene la concentración conocida se consume para reducir la concentración para detectar el antígeno o el anticuerpo es uno de los métodos para detectar la alta sensibilidad, especialmente de acuerdo con el método. Este método también se puede usar cuando la reacción antígeno-anticuerpo no se puede observar mediante una reacción de precipitación o una reacción de aglutinación. Información básica Clasificación de especialistas: inspección y clasificación de enfermedades infecciosas: inspección de microorganismos patógenos Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican el ayuno: ayuno Resultados de análisis: Debajo de lo normal: Valor normal: No Por encima de lo normal: Negativo: Valor normal, negativo, es decir, de 0 a 1:10. Aviso no infectado con un virus infeccioso. Positivo: Una indicación positiva está infectada por un virus infeccioso. Consejos: los pasos de la operación son complicados y los requisitos son muy estrictos. Si usted es ligeramente negligente, obtendrá resultados incorrectos. Valor normal Valor normal: 0 a 1:10. Importancia clínica Resultados anormales:> 1:10 fue positivo, y la tasa de coincidencia para el diagnóstico de brucelosis fue del 97,96%. Los ensayos de unión de complemento se pueden aplicar de las siguientes maneras: 1 diagnóstico de enfermedad infecciosa. Detección de antígenos patógenos y anticuerpos correspondientes. 2 detección de otros antígenos. Por ejemplo, antígenos asociados a tumores, identificación de proteínas en sangre, tipificación de HLA y similares. 3 detección de autoanticuerpos. Precauciones La operación debe ser cuidadosa y precisa; el equipo de vidrio debe estar muy limpio; los ingredientes conocidos involucrados en la prueba deben titularse por adelantado y usarse a la concentración especificada para garantizar resultados confiables. Proceso de inspección (1) Titulación de sangre: 1 Tome 1 ml de complemento, agregue 9 ml de BBS y luego diluya a 1:20, 1:30, 1:40, 1:50, 1:60, 1:80, 1: 100, 1: 200, 1: 400 y tome 50 0.2 ml de hemolisina, agregue 9.8 ml de BBS, que es hemolisina 1: 100, y luego continúe diluyéndose a 1: 800, 1: 1600, 1: 3200, 1: 6400. 2 Tome la matriz cuadrada de tubos de ensayo, agregue longitudinalmente 0.1 ml de diferentes concentraciones de complemento y agregue 0.1 ml de hemolisina en cada fila (todos deben agregarse desde la dilución más alta), luego agregue BBS0.2 ml, complemento y Los tubos de control de hemolisina se añadieron cada uno con BBS 0,3 ml, y finalmente se añadieron 2% de glóbulos rojos de oveja a cada tubo. La cantidad total de cada tubo fue de 0,5 ml, se agitó, se colocó en un tanque de agua a 37 ° C durante 30 minutos, y se observaron los resultados. La dilución más alta del complemento hemolizado completo y la hemolisina es la unidad respectiva. En aplicaciones prácticas, la hemolisina se usa en 2U (3200 ÷ 2 = 1600) y el complemento se usa en 2.5U (80 ÷ 2.5 = 32). (2) Prueba formal: 1 Opere con una microplaca tipo V y realice una prueba para cada muestra. Un control de suero bien. Se añadió BBS0.025ml a cada pocillo. 2 Sumerja el suero (0,025 ml) con una barra de dilución en el primer pocillo, gírelo y transfiéralo al segundo pocillo para un total de ocho pocillos, obteniendo así una dilución 1: 2 a 1: 256. Se describe un ejemplo de un ensayo de unión del complemento para medir anticuerpos en una pequeña cantidad. Agregue gradualmente varios reactivos, observe los diversos tubos de control después de la incubación y debe ser consistente con los resultados esperados. Los tubos de control negativo y positivo deben estar claramente hemolizados y no hemolizados; los tubos de control de anticuerpos o antígenos, los tubos de control de suero a analizar y los tubos de control de controles positivos y negativos deben estar completamente hemolizados. La hemólisis espontánea no debe ocurrir en tubos de control de glóbulos rojos de oveja. El tubo de control del complemento debe mostrar 2U para la disolución total, 1U para la disolución total con un poco de glóbulos rojos y 0.5U debe ser insoluble. Por ejemplo, la disolución completa del control de complemento de 0.5U indica que la cantidad de complemento es excesiva; si el tubo de control de 2U no muestra hemólisis, lo que indica que la cantidad de complemento es insuficiente, los resultados se ven afectados y la prueba debe repetirse. Los resultados de la prueba de fijación del complemento mostraron que el suero de prueba no estaba hemolizado y que la hemólisis era negativa. No apto para la multitud. Aquellos que no tienen una indicación para el examen no deben hacer esta verificación. Reacciones adversas y riesgos En general no hay complicaciones y daños.