Método de peroxidasa de rábano picante-peroxidasa de rábano picante

Las características del complejo PAP están relacionadas con el método de preparación del reactivo. HRP se usa primero para inmunizar a los animales para producir anticuerpos anti-HRP altamente específicos y de alto título, y luego se usa HRP para unirlos, porque el complejo HRP anti-HRP preparado in vitro es diferente de otras reacciones antígeno-anticuerpo . Cuando el antígeno es ligeramente excesivo, todos los anticuerpos anti-HRP participan en la formación de complejos de PAP solubles, dejando solo un poco de HRP libre. Sin embargo, la mayoría de las reacciones antígeno-anticuerpo requieren un exceso absoluto de antígeno para formar un complejo soluble. La forma del complejo PAP es bastante estable y no se ve afectada por la cantidad de antígeno. Independientemente de la adición inicial de antígenos y anticuerpos, la relación HRP / anti-HRP del complejo PAP resultante es mayormente 3; 2. Se aplica sedimentación centrífuga. Los métodos de difusión en fase líquida y observación con microscopio electrónico mostraron que el complejo PAP tiene una estructura de anillo pentagonal, tres esquinas son HRP, y las otras dos esquinas son anticuerpos anti-HRP con una masa molecular de 400-430 kDa, y esta estructura es muy estable.