Tests immunologiques pour l'infertilité

Les examens immunologiques de l'infertilité comprennent l'infertilité auto-immune anti-spermatozoïde masculine, l'infertilité allogénique anti-sperme féminine et l'infertilité anti-Zona pellucida féminine. Régime de contrôle: 1, la plupart des tests nécessitent un prélèvement sanguin le matin à jeun, un café à jeun, du thé fort, des boissons à haute teneur en sucre et en cola, 2, une fonction hépatique, des lipides sanguins, la coagulation du sang et autres Le dîner un jour à l’avance devrait éviter de boire de l’alcool, interdire les régimes riches en graisses et en protéines; 3, le régime a un impact important sur le bilan lipidique, au moins 3 jours avant que le sang n’attire pour que le régime soit sain. Informations de base Classification de spécialiste: examen eugénique et de supériorité Classification: examen des fluides corporels Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Valeur normale: Non Au-dessus de la normale: Négatif: Le résultat du test négatif devrait être normal. Positif: Un test positif indique une maladie qui peut être stérile. Conseils: Arrêtez les rapports sexuels pendant 4 à 7 jours. Le propionate de testostérone, le phénylacétate de testostérone et le phénylpropionate de nantrolone ne pouvaient pas être utilisés une semaine avant le test. Valeur normale Les résultats de divers tests immunologiques étaient normaux et négatifs. Signification clinique Résultats anormaux Plusieurs tests immunologiques indiquent une infertilité. Les patients d'infertilité masculine et d'infertilité féminine doivent être examinés. Des résultats positifs peuvent être des maladies: infertilité, infertilité masculine, pseudohermaphrodisme féminin, précautions contre la malformation génitale masculine Personnes inappropriées: pas encore connues. Tabou avant inspection: Tout d'abord, lors de la collecte de sperme: 1. Avant de quitter le sperme, le patient doit arrêter les rapports sexuels pendant 4 à 7 jours. Le propionate de testostérone, le phénylacétate de testostérone et le phénylpropionate de nantrolone ne pouvaient pas être utilisés une semaine avant le test. La consommation d'alcool doit être arrêtée 1 mois avant le test, ce qui doit être fait. 2, lorsqu’on prend du sperme, on peut utiliser du savon noir ou de l’huile de paraffine pour le massage pénien, les échantillons sont recueillis dans des éprouvettes stériles; on peut utiliser des préservatifs (lavés, pas de spermicides) ou le sperme par des rapports sexuels. Le montant collecté est souvent petit. 3. Si le sperme n'est pas obtenu par la méthode ci-dessus, la vésicule séminale et l'extrémité du canal déférent peuvent être massées à travers le rectum et l'urine peut être collectée pour vérifier s'il y a du sperme dans les sédiments. 4. N'exposez pas le sperme à des environnements surchauffés et froids. Remettez-le au médecin pour référence, pas plus de 30 minutes. Restez au chaud par temps froid et conservez-le dans la poche de votre sous-vêtement lorsque vous l'envoyez. 5. Si une culture bactérienne doit être réalisée, l'ouverture de l'urètre doit être rincée et désinfectée et le sperme doit être collecté dans un tube à essai stérile. Deuxièmement, avant les exigences de collecte de sérum: (1) régime de contrôle 1. La plupart des objets à inspecter nécessitent un prélèvement de sang l'estomac vide le matin, le café, le thé, les boissons à haute teneur en sucre et en cola doivent être pris à jeun. 2, la fonction hépatique, les lipides sanguins, la coagulation sanguine et d'autres éléments nécessitent un jeûne de 12 à 16 heures, et un jour avant le dîner, il convient d'éviter de boire, interdisant les régimes riches en graisses et en protéines. 3, le régime alimentaire a un impact significatif sur le dosage des lipides dans le sang, au moins dans les 3 jours qui suivent l'attribution de sang pour faire attention à maintenir un régime alimentaire normal. (B) pour éviter les effets des médicaments Les effets des médicaments sur les tests biochimiques et la culture bactérienne sont complexes. Par conséquent, si possible, le sujet doit cesser de prendre tous ses médicaments 1 à 2 jours avant le test. Si la médication est nécessaire pour le traitement, les effets du médicament doivent être pris en compte lors de l'analyse des résultats du test. (3) éviter l'impact de l'exercice 1, un exercice intense peut modifier de nombreux composants sanguins, même pendant plus de 24 heures. Par conséquent, après un exercice vigoureux, il ne faut pas prendre de sang immédiatement et marcher rapidement, au moins 10-15 minutes après le repos, puis prendre du sang. 2, devrait être dans un état calme pour prélever du sang, pour éviter l'excitation émotionnelle. Conditions d'inspection: 1. Afin de vous assurer que vous pouvez comprendre avec précision les résultats de votre examen physique après l'examen médical, veuillez remplir soigneusement le formulaire d'examen médical et chaque feuille de test avant l'examen médical, en précisant clairement le nom, notamment. 2, après avoir pris du sérum, vous devez rester immobile pendant 15 à 20 minutes. Processus d'inspection -, contrôle d'infertilité immunitaire anti-sperme L'immunité anti-sperme comprend l'immunité humorale anti-sperme (anticorps anti-sperme) et l'immunité anti-spermatozoïde. (1) Détection des anticorps anti-spermatozoïdes 1. Test après le rapport sexuel: Prenez le mucus cervical dans les 6 à 24 heures qui suivent le rapport sexuel et observez le nombre de spermatozoïdes comptés au microscope à haute puissance. Dans chaque champ de haute puissance, il existe ≥ 21 facteurs spécifiques au sperme extrêmement actifs. Si le titre du sérum est ≥1: 32, on peut considérer qu'il contient des anticorps anti-sperme. D'autres ont une agglutination capillaire et une agglutination sur plaque, qui sont moins utilisées. 2. Test de cytotoxicité et de freinage du sperme dépendant du complément: l'anticorps du sperme se lie à l'antigène du sperme, active le système du complément et endommage la perméabilité et l'intégrité de la membrane cellulaire. S'il s'agit d'un anticorps de frein, il perd son activité et freine. Une valeur ≥ 2 est positive: s'il s'agit d'un anticorps cytotoxique, il est coloré positivement avec certains colorants, nécessitant une motilité du sperme> 70%. La micro-méthode ne nécessite que quelques microlitres d’échantillon: pour les échantillons à faible taux d’activité des spermatozoïdes, le sperme vivant peut être extrait par la méthode en amont et le taux de survie peut atteindre plus de 90%. La pratique ne peut détecter que les anticorps agissant sur la queue du sperme. Forte spécificité, faible sensibilité et taux de faux négatifs élevé. 3. Méthode d'hémagglutination passive: les globules rouges traités sont sensibilisés à l'extrait de sperme et au plasma séminal. Les globules rouges sensibilisés réagissent avec le sérum dilué à tester sur la microplaque, et l'agglutination des globules rouges est positive. Les chercheurs pensent que cette méthode est spécifique et sensible, mais que peu de rapports ont été rapportés et que sa fiabilité et sa praticabilité n’ont pas été confirmées. 4. Test immuno-absorbant lié à une enzyme (ELISA) et dosage immuno-absorbant lié à une enzyme biotine-avidine (BA-ELISA): application d'un support intact en phase solide de sperme ou de membrane de sperme recouverte d'antigène, anticorps anti-sperme dans l'échantillon à tester et à cultiver Il peut ensuite se lier à la surface de l'antigène. Ensuite, le second anticorps du marqueur enzymatique peut également se lier à la surface, puis le substrat enzymatique est ajouté et le résultat est jugé en fonction du développement de la couleur du substrat. Peut être observé à l'œil nu, peut également être mesuré avec un lecteur de microplaque, ce dernier objectif et précis, généralement supérieur à un groupe de densité optique de sérum négatif plus 2 fois l'écart type est positif. Etant donné que le sperme intact est facilement adsorbé de manière non spécifique, s'il est recouvert d'un antigène de membrane de sperme soluble, le procédé est sensible, spécifique, objectif et quantitatif, et peut déterminer le type d'anticorps et est facile à utiliser. BA-ELISA est une nouvelle génération de tests quantitatifs développés sur la base des tests ELISA conventionnels, qui ont plus de sensibilité et de spécificité que les méthodes conventionnelles. 5. Test Immunobath (1mmunbeadTest, IBT): Les microsphères de Polyacrylamide revêtues d'anticorps anti-immunoglobuline humaine peuvent se lier à la surface du sperme liée à un anticorps spermatozoïde et les immunobilles peuvent être observées avec le sperme au microscope à contraste de phase ou au microscope électronique. Exécuter si la proportion de spermatozoïde associée à une ou plusieurs immunobilles est ≥lo% positive. Cette méthode détermine le site, le type et la proportion de sperme lié et permet de détecter les anticorps liés à la surface du sperme vivant. Sa sensibilité, sa spécificité et sa reproductibilité sont bonnes, l’opération est légèrement fastidieuse et les échantillons nécessaires aux tests sont peu nombreux, ce qui permet de détecter des traces d’échantillons tels que le mucus cervical et le liquide de la trompe de Fallope. 6. Immunoglobuline ou protéine radiomarquée Méthode: Immunoglobuline humaine anti-isotope ou pépin de raisin Une protéine est liée à des anticorps anti-spermatozoïdes liés à la surface du sperme et la radioactivité de cette surface est mesurée par un compteur x. Si le sperme vivant est utilisé comme antigène, sa spécificité et sa sensibilité sont élevées, et le type d'anticorps peut être déterminé. Toutefois, en raison des différentes sources de spermatozoïdes vivants dans chaque expérience, les résultats sont moins reproductibles et le matériel est coûteux. L’opérateur est susceptible de subir des dommages radioactifs, de sorte que cette méthode est moins signalée. 7. Test d'immunofluorescence indirecte: une fois que la surface est liée à l'antigène, elle peut se lier au deuxième anticorps marqué à la fluorescéine et la proportion de spermatozoïdes positifs présentant une fluorescence est observée au microscope à fluorescence. Comme le test nécessite une fixation de méthanol pour endommager la membrane, l'antigène interne est exposé et l'anticorps anti-antigène interne est omniprésent chez les personnes redondantes. Le faux positif est donc trop élevé et n'a aucune valeur clinique. Au cours des dernières années, la culture en phase liquide n’a pas été fixée au cours de l’expérience et la valeur d’utilisation de cette méthode a été redéfinie. 8. Inspection directe de l'interaction de l'œuf fin (1) Liaison au sperme transparente ou test de pénétration: L'oeuf humain obtenu par laparoscopie est meilleur que le spermatozoïde après une incubation dans certaines conditions, et si le sperme peut passer à travers la zone pellucide dans l'espace autour de l'ovule, si le sperme ne peut pas être porté Passez la zone pellucide et envisagez la présence d’un anticorps de frein. Ce test est également perturbé par d'autres facteurs. (2) Test de pénétration de l'ovule de hamster (SPA) sans sperme: le sperme vivant, extrait optimisé, est mélangé aux œufs exempts de hamster et observé au microscope à contraste de phase, s'il contient une tête de spermatozoïde enflée (avec la queue). Pénétration. La SPA peut être utilisée pour déterminer: 1 la capacité de fécondation des spermatozoïdes avec des anticorps plasmatiques séminaux; 2 l’importance de divers anticorps pour prévenir la grossesse. Ce test peut également être affecté par divers facteurs. (deux) détection de l'immunité anti-spermatozoïde Il existe peu d'études sur l'immunité anti-spermatozoïde à médiation cellulaire et chaque conclusion est différente. Des expériences sur des animaux et des tests sur l'homme ont montré que l'immunité cellulaire anti-sens pouvait être l'une des causes de l'infertilité. Les tests permettant de détecter les réponses immunitaires anti-sens à médiation cellulaire incluent le test de transformation lymphocytaire, le test d'inhibition de l'adhésion des leucocytes, le test d'inhibition de la migration des leucocytes ou des macrophages, le test cutané et le dosage de l'activité procoagulante des leucocytes dans le sang périphérique. Les antigènes utilisés sont différents, tels que le sperme fraîchement lavé, le sperme congelé-décongelé, le sperme semi-purifié, etc. À l'heure actuelle, comme les antigènes utilisés ne sont pas uniformes, les méthodes de détection sont différentes, le nombre de cas de recherche est faible, la spécificité de chaque méthode est difficile à évaluer et les résultats sont difficiles à comparer. Deuxièmement, la détection de l'infertilité immunitaire anti-transparente La source de la zona pellucida humaine est limitée et difficile à obtenir, mais la zona pellucida humaine et la zona pellucida porcine ont une antigénicité croisée, de sorte que, dans la pratique actuelle, la zona pellucida porcine est utilisée à la place de la zona pellucida humaine pour détecter l'anticorps de zona pellucida dans le sérum humain. Étant donné que la présence de lectine hétérologue (principalement des IgM) dans certains sérums humains normaux interfère avec les résultats expérimentaux, des globules rouges frais de porc doivent absorber le sérum avant l’épreuve. 1. Réaction de précipitation sur bande de Scotch: après que la surface de la zone pellucide se lie à l'anticorps, l'indice de réfraction change au microscope optique ou au microscope à fond noir. Cette méthode est principalement utilisée pour identifier le sérum, a une faible sensibilité et est difficile à utiliser en pratique clinique. 2. Dosage radioimmunologique: Après avoir analysé l'antigène et le sérum à zona pellucida porcine radiomarqués, le complexe antigène-anticorps est isolé et sa radioactivité est mesurée. Cette méthode peut être quantitative, spécifique et sensible, mais en raison de dommages radioactifs et de rapports peu nombreux, cette méthode reste difficile à affirmer. 3. Essai d'immunofluorescence indirecte: après que l'anticorps humain anti-Zona pellucida se lie à la surface de l'œuf porcin, l'anticorps anti-immunoglobuline humaine marqué à la fluorescéine se lie à la surface de la zona pellucida et présente une péri-fluorescence évidente au microscope à fluorescence. La fiabilité de cette loi dépend d'autres méthodes objectives. 4. Méthode ELISA et BALISA: le support en phase solide est recouvert de l'antigène de zona pellucida de porc, et le sérum, le deuxième anticorps et le substrat à tester sont ajoutés et le lavage est effectué étape par étape. Le résultat est jugé en fonction du changement de couleur du substrat. Cette méthode nécessite une taille d'échantillon moins importante, ne nécessite aucun équipement spécial, est facile à utiliser, peut déterminer quantitativement les anticorps et déterminer le type d'anticorps, et présente une bonne spécificité et une bonne sensibilité. Le test BA-ELISA présente les avantages d'un test ELISA conventionnel et sa sensibilité est grandement améliorée. 5. Méthode d'hémagglutination passive L'antigène porcin de zona pellucida purifié est utilisé pour enrober les globules rouges d'autres espèces en tant que cible de l'antigène et, en présence de l'anticorps de zona pellucida, les globules rouges sensibilisés s'agglutinent. Il existe peu de rapports sur cette méthode et il est difficile d’évaluer sa sensibilité et sa spécificité. 6. Liaison à la bande transparente au sperme ou test de pénétration: Cette méthode peut être positive s'il existe un anticorps anti-zona pellucida ou anti-sperme. Le test étant fortement influencé par les facteurs de l'environnement de culture, les résultats de recherche de différents laboratoires sont difficiles à comparer. Cette méthode peut être appliquée conjointement avec d'autres méthodes pour se compléter afin d'assurer la fiabilité des résultats. Ne convient pas à la foule L'examen est moins invasif et ne présente généralement pas de contre-indications. Effets indésirables et risques Ce test est moins invasif et ne provoque généralement pas de complications graves ni d’autres risques.