Essai de formation de guirlande d'érythrocytes de rat

Les lymphocytes B participent à la synthèse des anticorps et sont des cellules effectrices de réponses immunitaires humorales. La surface des cellules B porte l'immunoglobuline de surface membranaire (SmIg), les récepteurs Fc et les récepteurs du complément. Il se lie fortement à la partie Fc du complexe antigène-anticorps. Les globules rouges de poulet ou de mouton sont sélectionnés et sensibilisés dans des complexes EA avec les anticorps anti-érythrocytes correspondants Le récepteur Fc des cellules B peut former une guirlande avec EA, appelée couronne EA. Si le complexe EA est ajouté au complément et se lie au récepteur du complément des cellules B, une rosette EAC est formée. Il existe des récepteurs de RBC murins à la surface des cellules B, qui peuvent se lier aux RBC de souris pour former des rosettes d'érythrocytes de souris (M-RFC), qui se lient principalement aux cellules B avec des récepteurs d'IgM, et les M-RFC sont principalement des cellules B naïves. Ce test est principalement utilisé pour détecter le nombre de lymphocytes B et pour déterminer le niveau d'immunité humorale. Informations de base Classification de spécialiste: classification de l'examen: examen du sang Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Cependant, le pourcentage de rosettes de ME était réduit ou absent sans agammaglobulinémie ni déficit immunitaire combiné sévère. Valeur normale: Pourcentage de ME dans le sang périphérique féminin: 5% à 10% Au-dessus de la normale: Le pourcentage de couronnes de ME dans le sang périphérique de patients atteints de leucémie lymphoïde chronique peut atteindre 60 à 80%. Négatif: Positif: Conseils: S'il vous plaît se détendre lors de la vérification. Valeur normale Résultats On a compté 200 lymphocytes au microscope, les lymphocytes ayant adsorbé 3 globules rouges de souris ou plus étaient des lymphocytes B, et le pourcentage de guirlandes de cellules de souris (couronnes ME) a ​​été calculé. Le pourcentage de rosette de ME dans le sang périphérique humain normal est compris entre 5% et 10%. Signification clinique Le pourcentage de couronnes de ME dans le sang périphérique de patients atteints de leucémie lymphoïde chronique va de 60% à 80%, mais il n’ya pas de gamma-globulinémie, d’immunodéficience combinée grave, etc., et le pourcentage de guirlandes de ME est réduit ou absent. Les résultats faibles peuvent être des maladies: pas de gammaglobulinémie liée à l'X chez l'enfant, incidence élevée de déficit immunitaire secondaire chez l'enfant peut être une maladie: précautions à prendre pour la leucémie lymphoïde chronique (1) Temps d’incubation: Le pourcentage de ME augmentait progressivement avec la durée d’incubation, après une incubation de 1 h, il était de 7,4 ± 3,1% et augmentait à 18,3 ± 3,8% après 18 h. Après 72 h d’incubation, le nombre de couronnes augmentait. Il est progressivement tombé à 3,4 ± 7,1%. (2) Solution de culture: Il est préférable d’utiliser une solution de culture Tc199, et les résultats et la répétabilité sont bons. Le lavage et la remise en suspension des lymphocytes et des globules rouges avec le milieu RPM11640 tamponné par Hepes ont eu pour résultat que les cellules ont tendance à s'agréger et à former de grandes cellules, ce qui a entraîné des résultats peu fiables. (3) Lorsque le rapport optimal entre globules rouges et lymphocytes est d'environ 35: 1, le rapport est> 60: 1 ou <25: 1, le nombre de couronnes en ME peut être réduit. (4) Préservation de la solution de culture MRBC: dans la solution Alsever, la MRBC stockée à 4 ° C pendant 1 semaine produit toujours un nombre stable de guirlandes, tandis que la MRBC stockée dans du PBS, du sérum physiologique ou du milieu de culture Tc199, avec une durée de stockage prolongée, le nombre de couronnes Peu à peu, après 72 heures de stockage, seules des cellules de petite taille ou en guirlande sont visibles. Processus d'inspection (1) Prendre 1 ml de la suspension de globules rouges de souris ci-dessus, ajouter 3 ml de solution saline physiologique, bien mélanger, 1 500 tr / min, centrifuger pendant 10 min, laver 3 fois au total et enfin préparer une suspension à 1% de globules rouges de souris avec du sérum physiologique (environ 1,4 × 108). Cellule / ml). (2) 1,5 ml d'héparine ont été prélevés pour l'anticoagulation, les lymphocytes ont été séparés par stratification lymphocytaire et la concentration cellulaire a été ajustée à 2x10 7 / ml avec une solution de Hank à 20% de sérum de veau. (3) Prendre 0,1 ml de suspension de lymphocytes, ajouter une quantité égale de suspension de globules rouges de souris à 1%, mélanger et placer dans un bain-marie à 37 ° C pendant 10 min, à 500 tr / min, centrifuger pendant 10 min, mettre au réfrigérateur à 4 ° C pendant 2 ~ 3 h. (4) Pipeter 0,05 ml de surnageant, ajouter 1 goutte de solution bleue à 2 g / L, faire pivoter doucement pour mélanger, prendre 1 goutte du mélange sur la lame, recouvrir la lamelle couvre-objet après que les cellules s’enfoncent, Vérifiez avec un microscope à haute puissance. Ne convient pas à la foule Il n'y a pas de foule inappropriée. Effets indésirables et risques C'est un chèque sûr et sans danger pour le corps.