Test di immunofluorescenza indiretta contro la malaria

Esistono molti metodi sierologici diagnostici per la malaria: questa sezione introduce solo il test di immunofluorescenza indiretta comunemente usato. Persone che devono essere esaminate: persone con evidenti brividi, tremore del corpo, carnagione pallida, labbra cianotiche, pelle secca, irritabilità, mal di testa, disagio, anoressia e altri sintomi. Informazioni di base Classificazione specialistica: esame delle malattie infettive e classificazione: esame del sangue Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Valore normale: no Sopra normale: negativo: Negativo <1:20, che indica nessuna infezione da malaria. positivo: La velocità di rilevazione positiva del metodo dell'anticorpo fluorescente è generalmente superiore alla velocità di rilevazione protozoica. Il titolo anticorpale per i pazienti con malaria da falciparum è 1:80 o superiore e può essere considerato un marcatore per portatori o recenti infezioni da malaria. Suggerimenti: non mangiare cibi troppo grassi e ricchi di proteine ​​il giorno prima del prelievo del sangue, evitare di bere pesantemente. La gradazione alcolica nel sangue influirà direttamente sui risultati del test.Dopo le 20:00 del giorno prima dell'esame medico, il digiuno dovrebbe essere iniziato per 12 ore per evitare di influenzare i risultati del test. Valore normale Negativo <1:20. Significato clinico La velocità di rilevazione positiva del metodo dell'anticorpo fluorescente è generalmente superiore alla velocità di rilevazione protozoica. Il titolo anticorpale per i pazienti con malaria da falciparum è 1:80 o superiore e può essere considerato un marcatore per portatori o recenti infezioni da malaria. I risultati positivi possono essere malattie: malaria, malaria cerebrale, malaria polmonare, malaria Prima dell'ispezione: 1, non mangiare cibi troppo grassi e ricchi di proteine ​​il giorno prima del sangue, per evitare di bere pesantemente. La gradazione alcolica nel sangue influenza direttamente i risultati del test. 2. Dopo le 20:00 del giorno prima dell'esame medico, è necessario iniziare il digiuno per 12 ore per evitare di influenzare i risultati del test. 3, dovrebbe rilassarsi durante l'assunzione di sangue, per evitare la contrazione dei vasi sanguigni causata dalla paura, aumentare la difficoltà di raccolta del sangue. Dopo l'ispezione: 1. Dopo aver prelevato il sangue, è necessario comprimere localmente in corrispondenza dell'oblò per 3-5 minuti per interrompere l'emorragia. Nota: non strofinare, in modo da non causare ematoma sottocutaneo. 2, il tempo di pressatura dovrebbe essere sufficiente. C'è una differenza nel tempo di coagulazione per ogni persona e alcune persone hanno bisogno di un po 'più di tempo per la coagulazione. Pertanto, quando la superficie della pelle sembra sanguinare, la compressione viene interrotta immediatamente e il sangue può essere infiltrato nella pelle a causa di emostasi incompleta. Pertanto, il tempo di compressione è più lungo per interrompere completamente il sanguinamento. Se c'è una tendenza al sanguinamento, il tempo di compressione dovrebbe essere prolungato. 3, dopo che il sangue disegna sintomi di svenimento come: vertigini, vertigini, affaticamento, ecc. Dovrebbero immediatamente sdraiarsi, bere una piccola quantità di sciroppo e quindi sottoporsi a un esame fisico dopo che i sintomi sono stati alleviati. 4. In caso di congestione localizzata, utilizzare un asciugamano caldo dopo 24 ore per favorire l'assorbimento. Processo di ispezione 1. Principio del test di immunofluorescenza indiretta per la malaria L'anticorpo anti-Plasmodium nel siero del test è combinato con l'antigene Plasmodium sulla fetta di sangue, seguito dall'anticorpo IgG anti-umano marcato in modo fluorescente, che agisce sulle IgG umane sulla fetta di sangue e mostra fluorescenza nel sito dell'antigene. 2, reagenti (1) Il film ematico dell'antigene è un sottile film ematico di Plasmodium cynomolgus e un sottile film ematico di Plasmodium falciparum. Sono disponibili istituti di ricerca professionali. Conservare in congelatore a bassa temperatura a 4 ° C. (2) IgG anti-umane marcate in modo fluorescente, disponibile in commercio nel paese. 3, il metodo operativo (1) Il siero è stato raccolto con un metodo convenzionale o una macchia circolare è stata premuta sulla carta da filtro con un tubo di un tubo di vetro (ferro) di 1,2 cm di diametro. Il sangue viene prelevato dall'orecchio o dal dito del soggetto e riempito con un cerchio. Il volume del sangue è di circa 20 μl (circa 10 μl di siero). Dopo che il numero è stato essiccato, viene posto in un sacchetto di plastica sigillato con essiccante e trasportato in laboratorio a 4 ° C. Risparmia per un anno e mezzo, -20 ° C può essere conservato per 2 anni. Durante il test, le gocce di sangue essiccato sono state tagliate nei pozzetti della piastra di reazione, sono stati aggiunti 0,2 ml (pH 7,2) di tampone fosfato 0,01 mol / L e la diluizione sierica corrispondente a 1:20 è stata ottenuta immergendo per una notte a 4 ° C. (2) Rimuovere il film di sangue di antigene dal frigorifero e asciugarlo immediatamente con una ventola elettrica. Dividere ogni foglio di antigene in diverse piccole cellule con un pastello speciale. Provare 1 campione o 1 titolo per cella e aggiungere 1 siero per cella. gocce. Sono stati richiesti siero di riferimento negativo e positivo e controlli in bianco di PBS per ogni lotto di prove. Immediatamente dopo l'aggiunta di siero, la miscela è stata trasferita in una scatola bagnata e dopo l'incubazione a 37 ° C per 30 minuti, è stata lavata lentamente con 0,01 mol / L PBS (pH 7,2) e quindi immersa in un cilindro PBS per 5-10 minuti. (3) Diluire l'anticorpo fluorescente IgG umano diluito 1:10 con 0,01mol / L PBS (pH 7,2) e posizionarlo nella camera umida a 37 ° C per 30 minuti Dopo aver lavato con lo stesso metodo, aggiungere glicerolo e PBS a ciascuna cellula. Una quantità uguale di soluzione miscelata o acqua distillata è stata applicata ai fogli di copertura e i risultati della reazione sono stati esaminati al microscopio a fluorescenza. (4) Interpretazione dei risultati: l'intensità della fluorescenza e la chiarezza della struttura del citoplasma schizonte e trofozoite sono distinte, nessuna fluorescenza è (-), la fluorescenza è debole, la struttura morfologica non è chiara (±), la fluorescenza è debole e la struttura morfologica È ancora chiaro (+) ed è ulteriormente suddiviso in (2+) a (4+) in base all'aumento della luminosità della fluorescenza e alla definizione strutturale. Generalmente, l'intensità della fluorescenza (+) o più viene giudicata positiva alla diluizione sierica di 1:20. Non adatto alla folla Coloro che non hanno un'indicazione per l'esame non dovrebbero fare questo controllo. Reazioni e rischi avversi Generalmente nessuna complicazione e danno.