Apolipoproteina CI

L'apolipoproteina C è la principale apolipoproteina del colesterolo lipoproteico a bassissima densità. È presente anche nel colesterolo lipoproteico ad alta densità e nel colesterolo lipoproteico a bassa densità. Esistono 3 diverse apolipoproteine ​​C, vale a dire ApoCI, ApoCII, ApoCIII, che è una piccola quantità di proteine ​​strutturali di CM, VLDL e HDL. Informazioni di base Classificazione specialistica: classificazione dell'esame cardiovascolare: esame biochimico Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Suggerimenti: collaborare attivamente con il medico durante l'esame. Valore normale Il saggio immunoenzimatico è compreso tra 37 e 99 mg / L. Significato clinico Gli effetti della lipoproteina esterasi attivata e della lecitina estere colesterolo aciltransferasi sono importanti per chiarire la funzione della lipoproteina C, il metabolismo delle lipoproteine ​​e le cause dell'iperlipidemia e delle malattie cardiovascolari. precauzioni Prima dell'esame, prestare attenzione al riposo e vietare la dieta. Processo di ispezione (1) Immunoturbidimetria: 1 Riguardo all'antisiero: il dosaggio turbidimetrico ha requisiti di antisiero più elevati rispetto ad altri metodi. Il metodo turbidimetrico è preferibilmente un anticorpo policlonale. L'anti-siero deve essere privo di anti-siero. È necessario prestare grande attenzione all'apo-I estratto dal siero umano per ottenere immunopurità, purezza cromatografica e purezza dell'elettroforesi, cosa impossibile nel laboratorio generale. Il titolo dell'antisiero (titolo) non deve essere inferiore a 16. Al momento, in alcuni reagenti commerciali nazionali, l'antisiero apoA-I ha un titolo molto basso, quindi è necessario prestare attenzione quando si acquista il kit. Se non si ha esperienza nell'identificazione della qualità degli antisieri prima dell'acquisto, è necessario chiedere all'unità qualificata di identificarla. 2 Il campione standard superiore (siero) viene diluito 200 volte per il funzionamento manuale (100 μl di campione) e, se esiste un campionatore di precisione, può essere diluito 20 volte (usando 10 μl). Al fine di adattarsi alle condizioni di diversi laboratori (come diversi tipi di strumenti automatizzati), è necessario prestare attenzione alla proporzione di antigene-anticorpo quando si apportano le opportune modifiche. Va notato che non dovrebbe esserci un eccesso di antigene nel sistema di reazione e il limite superiore lineare non deve essere inferiore a 2,5 g / L. In altre parole, la quantità di antisiero deve essere sufficiente, altrimenti i risultati sono bassi quando l'apoA-I è alto nel campione. Allo stato attuale, alcuni kit di farmaci domestici non hanno solo un basso titolo anti-siero, ma il dosaggio dei campioni nell'operazione è troppo grande (come 3 ~ 5μl), l'anticorpo è ovviamente insufficiente e i risultati misurati sono inevitabilmente inaccurati. 3 Per ottenere una misurazione accurata, i risultati del calcolo della curva di calibrazione devono essere eseguiti nei test turbidimetrici apoA-I e B (metodo endpoint). Una certa concentrazione di intervallo (basso dosaggio del campione) (X) è sostanzialmente lineare con torbidità (Y) e la regressione lineare calcola una certa intercettazione sull'asse Y (valore A <0,1), quindi la deviazione del risultato del calcolo viene calcolata mediante calibrazione a punto singolo. Più grande, i risultati misurati non possono riflettere accuratamente il livello di alto (alto basso, basso alto). Non trascurare l'accuratezza della misurazione a causa della semplicità del metodo a punto singolo. Indipendentemente dal tipo di strumento automatizzato, devi prima provare la curva di calibrazione. Se il test viene ripetuto nelle condizioni dello strumento e nelle condizioni specifiche, l'intercettazione della linea di regressione non è evidente, quindi è possibile utilizzare il metodo di calibrazione a punto singolo. Quando la quantità del campione è compresa tra 3 e 5 μl, anche se la quantità di antisiero viene aumentata, la concentrazione e la torbidità non sono lineari e possono essere calcolate solo dopo la conversione lineare della curva. 4 Il principale fattore di interferenza è la torbidità del siero stesso (come siero ad alto contenuto di grassi) e i metodi di pretrattamento come ultracentrifugazione o idrolisi della lipasi non sono pratici. Anche l'effetto della torbidità con i tensioattivi è limitato, quindi nel test deve essere realizzato un tubo bianco. Oltre al metodo a due punti utilizzato nell'analisi automatizzata, è un errore utilizzare manualmente un singolo reagente senza sottrarre il bianco del campione. Al fine di ridurre l'effetto degli effetti della matrice sulla risposta alla torbidità, è necessario utilizzare un siero a valore fisso come calibratore. Inoltre, è necessario escludere interferenze quali particelle di polvere e graffi di piatti torbidi. 5 Alcuni kit commerciali (inclusi alcuni prodotti importati) con valori di sieri di calibrazione imprecisi sono un'importante fonte di errore. (2) Metodo di elettroforesi del razzo: 1 Il rapporto di diluizione dell'antigene e la quantità di antisiero devono essere selezionati in modo tale che il picco del razzo sia chiaro, l'inclinazione della curva di calibrazione sia moderata e la linea sia adatta. Il metodo misura contemporaneamente apoA-I e apoB e la quantità dei due antisieri deve essere regolata in modo tale che le altezze dei picchi dei due siano diverse e l'altezza del picco apoB non sia inferiore a 1 cm. 2 Diversi tipi di antisieri (come conigli e pecore) vengono testati a un prezzo equivalente e i risultati saranno diversi. Il saggio apoA-I è preferibilmente un antisiero di coniglio. Quando si usa il siero di coniglio, la forma del picco è nitida e il picco prodotto dal siero di pecora è spesso, la punta del picco è rotonda e smussata, e talvolta appare un'immagine fantasma prima del picco. Anche la pendenza della curva di calibrazione per il siero di calibrazione è diversa. Tuttavia, indipendentemente dall'antisiero utilizzato, i risultati quantitativi non sono molto diversi. 3 Elettroforesi in determinate condizioni, l'altezza di picco del siero di calibrazione di diverse diluizioni non cambierà in modo significativo e l'inclinazione della curva di calibrazione è sostanzialmente la stessa. Se l'altezza del picco del campione supera l'intervallo della curva di calibrazione, è necessario regolare e ripetere il test del fattore di diluizione del campione. Il CV inter board è in genere inferiore al 5%. 4 I risultati dell'elettroforesi del razzo possono essere osservati mediante colorazione o osservazione visiva diretta del picco del razzo. Il primo usa meno campioni e salva l'antisiero, ma se i campioni e l'antisiero vengono opportunamente aumentati, è più conveniente non macchiare. L'agarosio utilizzato dovrebbe essere elettroosmotico o ipotonico standard L'aggiunta di una quantità adeguata di destrano o glicole polietilenico al gel renderà più chiaro il picco del razzo. 5 La misurazione del picco del razzo può calcolare l'area o l'altezza del picco e l'area è l'altezza del picco moltiplicata per la larghezza del picco (la larghezza a metà altezza del picco). L'accuratezza della misurazione è preferibilmente fino a 0,1 mm. Devono essere utilizzate apparecchiature di amplificazione meccaniche o elettroniche. L'altezza del picco nell'intervallo della curva standard è preferibilmente da 1 a 4 cm. 6 Questo metodo è applicabile all'analisi di una piccola quantità di campioni. Adatto anche per la determinazione di apoAII, CI, CII, CIII, D, E e Lp (a). Non adatto alla folla Generalmente nessuna folla. Reazioni e rischi avversi 1. Infezione: prestare attenzione all'operazione asettica durante la raccolta del sangue, evitare la contaminazione di acqua e altre parti nel sito di raccolta del sangue per evitare l'infezione locale. 2, sanguinamento: dopo che al sangue è stato concesso un tempo di compressione completo, in particolare coagulopatia, tendenza al sanguinamento, per evitare trasudazioni, ecchimosi e gonfiore sottocutaneo locale.