Test immunologici per l'infertilità

Gli esami immunologici di infertilità includono infertilità autoimmune antitrasmo maschile, infertilità allogenica anti-sperma femminile e infertilità anti-zona pellucida femminile. Dieta di controllo: 1, la maggior parte degli elementi del test richiedono il prelievo di sangue a stomaco vuoto al mattino, dovrebbero essere caffè a digiuno, tè forte, zucchero e bevande a base di cola; 2, funzionalità epatica, lipidi nel sangue, coagulazione del sangue e altri elementi richiedono il digiuno per 12-16 ore e La cena con un giorno di anticipo dovrebbe evitare di bere alcolici, vietare una dieta ricca di grassi e ricca di proteine; 3, la dieta ha un impatto significativo sul test dei lipidi nel sangue, almeno entro 3 giorni prima che il sangue si attiri per prestare attenzione a mantenere una dieta normale. Informazioni di base Classificazione specialistica: classificazione dell'esame dell'eugenetica e della superiorità: esame del fluido corporeo Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Valore normale: no Sopra normale: negativo: Il risultato del test negativo dovrebbe essere normale. positivo: Un test positivo indica una malattia che può essere sterile. Suggerimenti: interrompi i rapporti sessuali per 4-7 giorni. Testosterone propionato, testosterone fenilacetato e nantrolone fenilpropionato non potevano essere utilizzati 1 settimana prima del test. Valore normale I risultati di vari test immunologici erano normali e negativi. Significato clinico Risultati anomali Test immunologici multipli indicano infertilità. È necessario esaminare la sterilità maschile e la sterilità femminile. I risultati positivi possono essere malattie: infertilità, infertilità maschile, pseudohermaphroditism femminile, precauzioni di malformazione genitale maschile Persone inadatte: non ancora conosciute. Tabù prima dell'ispezione: Innanzitutto, quando si raccolgono gli spermatozoi: 1. Prima di lasciare lo sperma, il paziente deve interrompere i rapporti sessuali per 4-7 giorni. Testosterone propionato, testosterone fenilacetato e nantrolone fenilpropionato non potevano essere utilizzati 1 settimana prima del test. Bere dovrebbe essere interrotto entro 1 mese prima del test. 2, quando si assumono sperma, sapone morbido o olio di paraffina per il massaggio del pene, i campioni vengono raccolti in provette sterili; i preservativi possono essere usati (lavati puliti, senza spermicidi) o lo sperma può essere raccolto da rapporti sessuali, ma in questo modo L'importo raccolto è spesso piccolo. 3. Se lo sperma non è ottenuto con il metodo sopra, la vescicola seminale e l'estremità del dotto deferente possono essere massaggiate attraverso il retto e l'urina può essere raccolta per verificare se vi sono spermatozoi nei sedimenti. 4. Non esporre lo sperma ad ambienti surriscaldati e freddi. Consegnalo al medico per riferimento, non più di 30 minuti. Resta caldo quando fa freddo e tienilo nella tasca della biancheria intima quando lo invii. 5. Se si deve effettuare una coltura batterica, l'apertura uretrale deve essere risciacquata e disinfettata e lo sperma deve essere raccolto in una provetta sterile. In secondo luogo, prima dei requisiti di raccolta del siero: (1) Controllo della dieta 1. La maggior parte degli articoli da ispezione richiedono prelievi di sangue a stomaco vuoto al mattino e caffè, tè, zucchero e bevande a base di cola devono essere a digiuno. 2, funzionalità epatica, lipidi nel sangue, coagulazione del sangue e altri elementi richiedono il digiuno per 12-16 ore e un giorno prima della cena dovrebbe evitare di bere, vietando una dieta ricca di grassi e ricca di proteine. 3, la dieta ha un impatto significativo sui test dei lipidi nel sangue, almeno entro 3 giorni prima che il sangue si attiri per prestare attenzione a mantenere una dieta normale. (B) per evitare effetti farmacologici Gli effetti dei farmaci sui test biochimici e sulla coltura batterica sono complessi. Pertanto, se possibile, il soggetto dovrebbe interrompere l'assunzione di tutti i farmaci 1-2 giorni prima del test. Se il trattamento è necessario per il trattamento, gli effetti del farmaco devono essere considerati durante l'analisi dei risultati del test. (3) Evitare l'impatto dell'esercizio 1, un intenso esercizio fisico può far cambiare molti componenti del sangue, anche per più di 24 ore, quindi dopo un intenso esercizio fisico non si dovrebbe immediatamente prendere il sangue e camminare rapidamente, almeno 10-15 minuti dopo il riposo, quindi prendere il sangue. 2, dovrebbe essere in uno stato di calma per attirare sangue, per evitare l'eccitazione emotiva. Requisiti per l'ispezione: 1. Al fine di assicurarsi di poter comprendere accuratamente i risultati dell'esame fisico dopo l'esame medico, compilare il modulo di esame medico e ogni foglio di prova con attenzione prima dell'esame medico. La scrittura deve essere chiara, in particolare il nome. 2, dopo aver assunto il siero, è necessario rimanere fermi per 15-20 minuti. Processo di ispezione -, controllo dell'infertilità immunitaria anti-sperma L'immunità antisperma comprende l'immunità umorale anti-sperma (anticorpi anti-sperma) e l'immunità cellulare anti-sperma. (1) Rilevazione di anticorpi anti-sperma 1. Test post-rapporto: Prendi il muco cervicale entro 6 ~ 24 ore dopo il rapporto sessuale e osserva il numero di spermatozoi contati al microscopio ad alta potenza. In ogni campo ad alta potenza, ci sono ≥ 21 fattori specifici di sperma estremamente vivaci. Se il titolo sierico è ≥1: 32, si può considerare che contenga anticorpi dello sperma. Altri hanno agglutinazione capillare e agglutinazione a placche, che sono meno utilizzate. 2. Test di citotossicità dipendente dal complemento e test di frenata dello sperma: l'anticorpo dello sperma si lega all'antigene dello sperma, attiva il sistema del complemento e provoca danni alla permeabilità e all'integrità della membrana cellulare. Se si tratta di un anticorpo del freno, perde la sua attività e i suoi freni. Un valore ≥ 2 è positivo; se si tratta di un anticorpo citotossico, è positivamente colorato con alcuni coloranti, che richiede una motilità degli spermatozoi> 70%. Il micro metodo richiede solo pochi microlitri di campione: per i campioni con un basso tasso di attività dello sperma, lo sperma vivo può essere estratto con il metodo a monte e il tasso di sopravvivenza può raggiungere oltre il 90%. La pratica può rilevare solo anticorpi che agiscono sulla coda dello sperma. Forte specificità, scarsa sensibilità e alto tasso di falsi negativi. 3. Metodo di emoagglutinazione passiva: i globuli rossi trattati vengono sensibilizzati con l'estratto di sperma e il plasma seminale e i globuli rossi sensibilizzati vengono fatti reagire con il siero diluito per essere testati sulla piastra di micro-reazione e l'agglutinazione dei globuli rossi è positiva. Questo metodo non è influenzato dalla vitalità degli spermatozoi, dal conteggio, dai frammenti microbici o di tessuto negli spermatozoi.I ricercatori ritengono che questo metodo sia specifico e sensibile, ma ci sono pochi rapporti e la sua affidabilità e praticabilità devono ancora essere confermate. 4. Saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) e saggio di immunosorbente biotina-avidina (BA-ELISA): applicazione di portatore di fase solida con rivestimento di antigene spermatozoo intatto o membrana di sperma intatta, anticorpo di sperma nel campione da testare e coltivare Può quindi legarsi alla superficie dell'antigene. Successivamente, il secondo anticorpo dell'etichetta enzimatica può anche legarsi alla superficie, quindi viene aggiunto il substrato enzimatico e il risultato viene valutato in base allo sviluppo del colore del substrato. Può essere osservato ad occhio nudo, può anche essere misurato con un lettore di micropiastre, quest'ultimo obiettivo e preciso, generalmente più di un gruppo di densità ottica sierica negativa più 2 volte la deviazione standard è positiva. Poiché lo sperma intatto viene facilmente assorbito in modo non specifico, se è rivestito con l'antigene della membrana spermatica solubile, il metodo è sensibile, specifico, obiettivo e quantitativo e può determinare il tipo di anticorpo ed è facile da usare. BA-ELISA è una nuova generazione di saggi quantitativi sviluppati sulla base dell'ELISA convenzionale, che presenta una maggiore sensibilità e specificità rispetto ai metodi convenzionali. 5. Test Immunobath (1mmunbeadTest, IBT): le microsfere di poliacrilammide rivestite con anticorpo anti-immunoglobulina umana possono legarsi alla superficie dello sperma legata all'anticorpo spermatico e le immunobead possono essere osservate con lo sperma sotto microscopio a contrasto di fase o microscopio elettronico. Esegui, se la percentuale di spermatozoi combinata con uno o più immunobead è ≥lo% positiva. Questo metodo determina il sito, il tipo e la proporzione di sperma legato e può rilevare gli anticorpi legati alla superficie dello sperma vivo. La sua sensibilità, specificità e riproducibilità sono buone, l'operazione è leggermente ingombrante e i campioni richiesti per il test sono pochi e può essere utilizzato per la rilevazione di campioni in tracce come muco cervicale e liquido delle tube di Falloppio. 6. Immunoglobulina o proteina radiomarcata A Metodo: immunoglobulina anti-umana marcata con isotopo o piantina di uva Una proteina è legata agli anticorpi dello sperma legati alla superficie dello sperma e la radioattività della superficie è misurata da un contatore x. Se lo sperma vivo viene utilizzato come antigene, la sua specificità e sensibilità sono elevate e il tipo di anticorpo può essere determinato. Tuttavia, a causa delle diverse fonti di spermatozoi vivi in ​​ciascun esperimento, i risultati sono meno riproducibili e l'apparecchiatura è costosa, l'operatore è suscettibile al danno radioattivo, quindi questo metodo è meno riportato. 7. Test di immunofluorescenza indiretta: dopo che la superficie è legata all'antigene, può legarsi al secondo anticorpo marcato con fluoresceina e la percentuale di spermatozoi positivi che mostrano fluorescenza è osservata al microscopio a fluorescenza. Poiché il test richiede la fissazione del metanolo per causare danni alla membrana, viene esposto l'antigene interno e l'anticorpo contro l'antigene interno è onnipresente nelle persone ridondanti, quindi il falso positivo è troppo alto e non ha valore clinico pratico. Negli ultimi anni, la cultura della fase liquida non è stata corretta durante l'esperimento e il valore d'uso di questo metodo è stato ridefinito. 8. Ispezione diretta dell'interazione fine delle uova (1) Test di legame o penetrazione della banda trasparente agli spermatozoi: l'uovo umano ottenuto dalla laparoscopia è migliore degli spermatozoi dopo l'incubazione in determinate condizioni e se lo sperma può passare attraverso la zona pellucida nello spazio attorno alla cellula uovo, se lo sperma non può essere indossato Passare la zona pellucida e considerare la presenza di un anticorpo del freno. Questo test è anche interferito da altri fattori. (2) test di penetrazione dell'uovo di criceto spermatozoo trasparente (SPA): lo sperma vivo estratto ottimizzato viene miscelato con le uova senza criceto e osservato al microscopio a contrasto di fase. Se l'uovo contiene una testa di sperma gonfia (con coda) penetrare. La SPA può essere utilizzata per determinare: 1 la capacità di fecondazione degli spermatozoi con anticorpi del plasma seminale; 2 l'importanza di vari anticorpi nella prevenzione della gravidanza. Questo test può anche essere influenzato da una varietà di fattori. (due) rilevazione dell'immunità cellulare anti-sperma Esistono pochi studi sull'immunità anti-sperma mediata dalle cellule e ogni conclusione è diversa. Esperimenti su animali e test sull'uomo hanno dimostrato che l'immunità cellulare anti-senso può essere una delle cause dell'infertilità. I saggi per rilevare le risposte immunitarie anti-senso mediate dalle cellule comprendono il test di trasformazione dei linfociti, il test di inibizione dell'adesione dei leucociti, il test di inibizione della migrazione dei leucociti o dei macrofagi, il test cutaneo e il test dell'attività di procoagulante dei leucociti nel sangue periferico. Gli antigeni utilizzati sono diversi, come lo sperma appena lavato, lo sperma congelato e scongelato, lo sperma semi-purificato e simili. Allo stato attuale, poiché gli antigeni utilizzati non sono uniformi, i metodi di rilevazione sono diversi, il numero di casi di ricerca è piccolo, la specificità di ciascun metodo è difficile da valutare e i risultati sono difficili da confrontare. In secondo luogo, il rilevamento dell'infertilità immunitaria anti-trasparente La fonte della zona pellucida umana è limitata e difficile da ottenere, ma la zona pellucida umana e la zona pellucida suina presentano antigenicità crociata, pertanto, nella pratica attuale, la zona pellucida suina viene utilizzata al posto della zona pellucida umana per rilevare l'anticorpo della zona pellucida nel siero umano. Poiché la presenza di lectina eterologa (principalmente IgM) in alcuni sieri umani normali interferisce con i risultati sperimentali, è necessario che i globuli rossi suini freschi assorbano il siero del test prima del test. 1. Reazione di precipitazione con banda scotch: dopo che la superficie della zona pellucida si lega all'anticorpo, l'indice di rifrazione cambia al microscopio ottico o al microscopio a campo oscuro. Questo metodo viene utilizzato principalmente per identificare il siero, ha una bassa sensibilità ed è difficile da usare nella pratica clinica. 2. Saggio radioimmunologico: dopo aver testato l'antigene suino pellucida di zona pellucida radioattivo e il siero, il complesso antigene-anticorpo viene isolato e viene misurata la sua radioattività. Questo metodo può essere quantitativo, specifico e sensibile, ma a causa del danno radioattivo e i rapporti non sono molti, questo metodo è ancora difficile da affermare. 3. Saggio di immunofluorescenza indiretta: dopo che l'anticorpo umano anti-Zona pellucida si lega alla superficie dell'uovo suino, l'anticorpo anti-immunoglobulina umana marcato con fluoresceina si lega alla superficie della zona pellucida e presenta evidenti peri-fluorescenza al microscopio a fluorescenza. L'affidabilità di questa legge dipende da altri metodi oggettivi. 4. Metodo ELISA e BALISA: il veicolo in fase solida è rivestito con l'antigene zona pellucida suina e vengono aggiunti il ​​siero, il secondo anticorpo e il substrato da testare e il lavaggio viene eseguito passo dopo passo e infine il risultato viene valutato in base al cambiamento di colore del substrato. Questo metodo richiede una dimensione del campione inferiore, non richiede attrezzature speciali, è facile da usare, può determinare quantitativamente gli anticorpi e determinare il tipo di anticorpo e ha una buona specificità e sensibilità. BA-ELISA ha i vantaggi di un ELISA convenzionale e la sua sensibilità è notevolmente migliorata. 5. Metodo di emoagglutinazione passiva L'antigene purificato della zona pellucida porcina viene utilizzato per rivestire i globuli rossi di altre specie come bersaglio dell'antigene e, in presenza dell'anticorpo della zona pellucida, i globuli rossi sensibilizzati si agglutinano. Esistono pochi rapporti su questo metodo ed è difficile valutarne la sensibilità e la specificità. 6. Test di penetrazione o penetrazione della banda trasparente per lo sperma: questo metodo può essere positivo se esiste un anticorpo zona pellucida o un anticorpo anti-sperma. Poiché il test è fortemente influenzato dai fattori ambientali della cultura, i risultati della ricerca di diversi laboratori sono difficili da confrontare. Questo metodo può essere applicato insieme ad altri metodi per completarsi a vicenda per garantire l'affidabilità dei risultati. Non adatto alla folla L'esame è meno invasivo e generalmente non ha controindicazioni. Reazioni e rischi avversi Questo test è meno invasivo e generalmente non causa gravi complicazioni o altri pericoli.