カイロミクロン

カイロミクロンはヒト血漿中の最大のリポタンパク質粒子であり、CMは小腸吸収部位から全身循環に送達される食事性TGの大部分です。 CM除去速度は速く、半減期は10分で、通常の人は12時間の絶食後にそれを検出できません。リポタンパク質が電気泳動されると、CMは原点になります。 サンプルは、血清リポタンパク質電気泳動中は新鮮でなければならず、凍結保存しないでください。 基本情報 専門家分類：消化器検査分類：血液検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食 分析結果： 通常以下： 通常値： いや 通常以上： マイナス： 普通。 ポジティブ： 高リポタンパク血症I型、高リポタンパク血症V型。 ヒント：検査前の食事は軽く、アルコールは禁止されています。 正常値 負。 臨床的意義 陽性の高リポタンパク血症I型、高リポタンパク血症V型。 肯定的な結果は病気かもしれません： 高リポタンパク血症I型、高リポタンパク血症V型の予防策 1.免疫比濁法：濁度法： （1）抗血清について：比濁法は、他の方法よりも抗血清の要件が高い。 比濁法は、好ましくはポリクローナル抗体である。 抗血清には抗血清が含まれていてはなりません。 一般血清では不可能な免疫純度、クロマトグラフィー純度、電気泳動純度を達成するために、ヒト血清から抽出されたapoA-Iに大きな注意を払う必要があります。 抗血清力価（力価）は16以上でなければなりません。 現在、国内の市販試薬の中には、apoA-I抗血清の力価が非常に低いため、キットを購入する際に注意が必要です。 購入前に抗血清の品質を識別した経験がない場合は、資格のあるユニットに識別を依頼してください。 （2）上のメソッド（血清）の検体は、手動操作のために200倍に希釈され（サンプル100μl）、精密サンプラーの場合は20倍に希釈できます（10μlを使用）。 異なる検査室（異なるタイプの自動化機器など）の条件に適応するために、適切な修飾を行う際に抗原抗体の割合に注意を払う必要があります。反応系に過剰な抗原があってはならず、直線の上限は2.5g / Lを下回らないように注意する必要があります。 言い換えれば、抗血清の量は十分でなければならず、そうでなければ、検体中のapoA-Iが高い場合、結果は低い。 現在、一部の家庭用医薬品キットは抗血清力価が低いだけでなく、手術中の検体の投与量が大きすぎ（3〜5μlなど）、抗体が明らかに不十分であり、測定結果が不可避的に不正確です。 （3）正確な測定を行うには、検量線の計算結果をapoA-IおよびB濁度測定で行う必要があります（終点法）。 特定の範囲（低サンプル投与量）濃度（X）は基本的に濁度（Y）に対して線形であり、線形回帰はY軸上の特定の切片（A値<0.1）を計算するため、計算結果の偏差はシングルポイントキャリブレーションによって計算されます。大きくすると、測定結果は高レベル（高低、低高）を正確に反映できません。 シングルポイント法は単純であるため、測定の精度を無視しないでください。 自動機器の種類に関係なく、最初に検量線を試す必要があります。 機器の条件と特定の条件でテストが繰り返される場合、回帰直線の切片は明らかではないため、単一点のキャリブレーション方法を使用できます。 サンプルの量が3〜5μlの場合、抗血清の量を増やしても、濃度と濁度は線形ではなく、曲線が線形に変換された後にのみ計算できます。 （4）主な干渉因子は血清自体の濁度（高脂肪血清など）であり、超遠心分離やリパーゼ加水分解などの前処理方法は実用的ではありません。 界面活性剤による濁度の影響も制限されるため、アッセイではブランクチューブを作成する必要があります。 自動分析で使用される2点法に加えて、検体ブランクを差し引くことなく単一の試薬を手動で使用するのは間違いです。 濁度応答に対するマトリックス効果の影響を減らすために、固定値の血清をキャリブレーターとして使用する必要があります。 さらに、ほこりの粒子や濁った皿の傷などの干渉を排除する必要があります。 （5）一部の市販キット（一部の輸入製品を含む）には、重要なエラーの原因となる不正確な校正血清値があります。 2.ロケット電気泳動： （1）抗原希釈係数と抗血清の量の選択は明確である必要があり、検量線の傾きは中程度であり、アライメント曲線は適切です。 この方法では、apoA-IとapoBを同時に測定し、2つの抗血清の量を調整して、2つのピークの高さが異なり、apoBのピークの高さが1 cm以上になるようにします。 （2）異なるタイプのソース（ウサギや羊など）からの抗血清を同等の価格でテストすると、結果は異なります。 アポＡ−Ｉアッセイは、好ましくはウサギ抗血清である。 ウサギの血清を使用すると、ピークの形状がシャープになり、ヒツジの血清によって生成されるピークが厚くなり、ピークの先端が丸く鈍くなり、ピークの前にゴースト画像が現れることがあります。 較正血清の較正曲線の傾きも異なります。 ただし、どのような抗血清を使用しても、定量的な結果に大きな違いはありません。 （3）特定の条件下での電気泳動では、異なる希釈のキャリブレーション血清のピーク高さは大幅に変化せず、キャリブレーション曲線の勾配は基本的に同じです。 試料のピーク高さが検量線範囲を超える場合、試料希釈係数を調整して再テストする必要があります。 ボード間CVは通常5％未満です。 （4）ロケット電気泳動の結果は、ロケットピークの染色または直接目視により確認できます。 前者は使用する検体が少なく、抗血清を節約しますが、検体と抗血清を適切に増やした場合、染色しない方が便利です。 使用するアガロースは、標準的な電気浸透圧または低張である必要があり、適切な量のデキストランまたはポリエチレングリコールをゲルに加えると、ロケットのピークがより明確になります。 （5）ロケットピークの測定では、面積またはピーク高さを計算できます。面積は、ピーク高さにピーク幅（ピークの半分の高さでの幅）を掛けた値です。 測定精度は0.1mmまでが望ましい。 機械的または電子的な増幅装置を使用する必要があります。 標準曲線の範囲内のピーク高さは、好ましくは1〜4cmである。 （6）この法律は、少数の標本の分析に適用されます。 apoAII、CI、CII、CIII、D、E、およびLp（a）の測定にも適しています。 検査プロセス 1.免疫比濁法：濁度法： （1）検体は時間的に分離できる高速分離血清でなければならず、2〜6°Cの冷蔵庫に保存し、1週間以内に測定し、-20°Cで半年間保存できます。 （2）全自動分析装置を使用する場合、抗原に対する抗体の比率および反応時間は、異なる機器設計パラメーターに従って合理的に選択する必要があります。 また、Beckman濁度計ICSやproteinarrayシステムなどの速度散乱比濁法CMとしても使用できます。 （3）手動方式で使用される機器：340nmフィルター（またはスプリッター）を備えた精密光度計、サンプル量は好ましくは0.5ml（抗血清を節約するため）、フローカップを使用し、サンプル希釈は最適サンプラーを修正。 （4）検体処理：血清サンプルと品質管理血清をサンプル希釈液で1：200に希釈します。つまり、最初に1:20に希釈し（血清5.0μl+希釈液95μl）、次に1:10に希釈します（ apoBの測定のための過剰な1:20血清）。 混合後、25〜37°Cで30分間放置し、340 nmの波長で濁った結果をU-UBのA値に従って標準曲線で読み取った。 このメソッドのCVは5％未満です。 （5）検量線：手動および半自動操作の各バッチには、検量線が必要です。また、検量線は、検体と同じ1：100、1：200、1：300、1：400の4つの濃度に希釈できます。操作、固定値に従って各標準チューブのCM濃度を計算し、濃度（X）とそれに対応するA値（Y）（線形回帰で計算）をプロットします。これは基本的に直線ですが、Y軸に特定の切片があります。したがって、単一ポイント標準を使用することはできません。 操作が正確な場合、濃度とA値の相関係数は0.985を超えている必要があります。 高濃度、中濃度、低濃度のキャリブレーション血清が3つある場合、検体と同じように操作でき、3点キャリブレーションに使用できます。5点キャリブレーションにも使用できます（つまり、高中濃度の血清の混合、中、低）血清の濃度を等量混合して、他の2つの較正血清にした）。 この方法の線形範囲：0.4〜2.5g / L 2.ロケット電気泳動： （1）プレートを注ぐ：プレートあたり10g / Lアガロース10ml、沸騰水浴で溶かし、よく混ぜ、50〜55°Cに冷えたらCM抗血清とapoB抗血清8μlを加えます（量は抗血清力価に依存します） ）、水プラットフォームに事前に設定されたガラスプレートにすばやく混ぜて注ぎ、冷却してから4°Cに置き、20分後にパンチ穴を開けます。穴はプレートのカソード端にあり、穴の直径は3 mm、穴の間隔は少なくとも5 mm、穴の容量は5μlです。 プレートを電気泳動タンクに入れ、ろ紙でブリッジします。 （2）抗原の希釈：キャリブレーション血清を0.15 mol / L NaCl溶液で1：100、1：150、1：200、1：300、1：400（検量線用）に希釈し、血清サンプルを1倍にしました。 200倍に希釈し、冷蔵庫を4℃で3日間以内に置きます。 （3）ローディング：5μl（正確）の希釈血清と検体を低電流状態（10 mA /プレート）で採取し、アガロースゲルサンプルに加えました。 各ボードは一連の標準を実行する必要があります。 （4）電源オン：定常流24 mA /プレート、端子電圧6〜8 V / cm、アガロースを15°Cに維持するために流水で冷却、電気泳動3〜4時間。 （5）除タンパクと乾燥フィルム：電気泳動後のアガロースプレートを0.15mol / LのNaClに30分間浸漬し、フィルムをポリエステルフィルム上に置き、多層ろ紙の下で軽い圧力で乾燥させた。接着剤中の水分は、ろ紙、フィルム、ポリエステルフィルムで自然に乾燥するか、熱風送風機で乾燥し、乾燥後、ろ紙およびポリエステルフィルムから自然に分離されます。 （6）染色：アガロースフィルムを染色液に20〜30分間浸漬した。 （7）脱色：ロケットのピークが透明になり、背景が基本的に無色になるまで、染色したフィルムを脱色液に浸します。 水中の2つのセロファンで固定でき、乾燥後も長期間保存できます。 また、流水に浸して背景を除去することもできます。 注： 1抗原の希釈率と抗血清の量は、ロケットのピークがはっきりし、検量線の勾配が中程度で、線が適切になるように選択する必要があります。 この方法では、apoA-IとapoBを同時に測定し、2つの抗血清の量を調整して、2つのピークの高さが異なり、apoBのピークの高さが1 cm以上になるようにします。 2異なる種類の抗血清（ウサギや羊など）は同等の価格でテストされ、結果は異なります。 アポＡ−Ｉアッセイは、好ましくはウサギ抗血清である。 ウサギの血清を使用すると、ピークの形状がシャープになり、ヒツジの血清によって生成されるピークが厚くなり、ピークの先端が丸く鈍くなり、ピークの前にゴースト画像が現れることがあります。 較正血清の較正曲線の傾きも異なります。 ただし、どのような抗血清を使用しても、定量的な結果に大きな違いはありません。 3特定の条件下での電気泳動では、さまざまな希釈のキャリブレーション血清のピーク高さは大幅に変化せず、キャリブレーション曲線の勾配は基本的に同じです。 試料のピーク高さが検量線範囲を超える場合、試料希釈係数を調整して再テストする必要があります。 ボード間CVは通常5％未満です。 4ロケット電気泳動の結果は、染色またはロケットピークの直接的な目視観察によって観察できます。 前者は使用する検体が少なく、抗血清を節約しますが、検体と抗血清を適切に増やした場合、染色しない方が便利です。 使用するアガロースは、標準的な電気浸透圧または低張である必要があり、適切な量のデキストランまたはポリエチレングリコールをゲルに加えると、ロケットのピークがより明確になります。 5ロケットピークの測定では、面積またはピークの高さを計算できます。面積は、ピークの高さをピークの幅（ピークの半分の高さでの幅）で乗算したものです。 測定精度は0.1mmまでが望ましい。 機械的または電子的な増幅装置を使用する必要があります。 標準曲線の範囲内のピーク高さは、好ましくは1〜4cmである。 6この方法は、少量の検体の分析に適用できます。 apoAII、CI、CII、CIII、D、E、およびLp（a）の測定にも適しています。 群衆に適していない いや 副作用とリスク いや