マラリア間接免疫蛍光検査

マラリアには多くの血清学的診断法がありますが、このセクションでは、一般的に使用されている間接免疫蛍光検査のみを紹介します。 検査が必要な人：明らかな悪寒、体の震え、顔色の悪化、チアノーゼ唇、乾燥肌、いらいら、頭痛、不快感、食欲不振などの症状がある人。 基本情報 専門分類：感染症検査および分類：血液検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食 分析結果： 通常以下： 通常値： いや 通常以上： マイナス： ネガティブ<1:20、マラリアに感染していないことを示します。 ポジティブ： 蛍光抗体法の陽性検出率は、一般に原虫の検出率よりも高いです。 熱帯熱マラリア患者の抗体価は1:80以上であり、保因者または最近のマラリア感染のマーカーとみなすことができます。 ヒント：採血の前日に脂ぎった高タンパク質食品を食べないでください。 血液中のアルコール含有量は検査結果に直接影響しますので、健康診断の前日の午後8時以降は、検査結果に影響を与えないように12時間絶食を開始する必要があります。 正常値 負の<1:20。 臨床的意義 蛍光抗体法の陽性検出率は、一般に原虫の検出率よりも高いです。 熱帯熱マラリア患者の抗体価は1:80以上であり、保因者または最近のマラリア感染のマーカーとみなすことができます。 肯定的な結果は病気かもしれません： マラリア、脳マラリア、肺マラリア、マラリア 検査前： 1、大量の飲酒を避けるために、血の前日に脂っこい高タンパク質食品を食べないでください。 血液中のアルコール含有量は、テスト結果に直接影響します。 2.健康診断の前日の午後8時以降、試験結果に影響を与えないように、12時間の絶食を開始する必要があります。 3、血液を採取するときにリラックスする必要があります、恐怖による血管の収縮を避けるために、採血の難しさを増やします。 検査後： 1.採血後、出血を止めるためにピンホールで3〜5分間局所圧迫が必要です。 注：皮下血腫を引き起こさないように、こすらないでください。 2、プレス時間は十分でなければなりません。 各人の凝固時間には違いがあり、一部の人は凝固に少し時間が必要です。 したがって、皮膚の表面が出血しているように見えると、圧迫はすぐに停止し、止血が不完全なために血液が皮膚に浸透する可能性があります。 したがって、出血を完全に止めるには、圧迫時間が長くなります。 出血する傾向がある場合は、圧縮時間を延長する必要があります。 3、めまい、めまい、疲労などの失神の症状を採血した後、すぐに横になり、少量のシロップを飲んで、症状が緩和された後に身体検査を受けます。 4.局所的な混雑がある場合は、24時間後に温かいタオルを使用して吸収を促進します。 検査プロセス 1.マラリアの間接免疫蛍光検査の原理 試験血清中の抗プラスモジウム抗体は、血液スライス上のプラスモジウム抗原と結合し、その後、血液スライス上のヒトIgGに作用し、抗原部位で蛍光を示す蛍光標識抗ヒトIgG抗体と結合します。 2、試薬 （1）抗原血液膜は、マラリア原虫カニクイザルの薄い血液膜と熱帯熱マラリア原虫の薄い血液膜です。 専門の研究機関が利用可能です。 4°Cまたは低温冷凍庫で保管してください。 （2）国内で市販されている蛍光標識抗ヒトIgG。 3、操作方法 （1）血清を従来の方法で採取するか、直径1.2 cmのガラス（鉄）チューブのチューブで濾紙に円形ブロットを押し付けた。 血液は被験者の耳または指から採取され、円で満たされます。血液量は約20μl（血清約10μl）です。数値が乾燥した後、乾燥剤付きの密閉されたビニール袋に入れられ、4°Cで実験室に運ばれます。半年間保存すると、-20°Cを2年間保存できます。 試験中、乾燥した血液滴を反応プレートのウェルに切り取り、0.01 mol / Lリン酸緩衝液0.2 ml（pH 7.2）を加え、4°Cで一晩浸漬することで1:20に相当する血清希釈液を得ました。 （2）抗原血液フィルムを冷蔵庫から取り出し、すぐに扇風機で乾かします。各抗原シートを特別なクレヨンでいくつかの小さなセルに分割します。細胞ごとに1検体または1タイターを試し、細胞ごとに1血清を加えます。落ちます。 試験の各バッチには、陰性の陽性参照血清とPBSブランク対照が必要でした。 血清を加えた直後、混合物を湿った箱に移し、37°C​​で30分間インキュベートした後、0.01 mol / L PBS（pH 7.2）でゆっくり洗浄し、PBSシリンダーに5〜10分間浸しました。 （3）0.01mol / L PBS（pH 7.2）で1:10に希釈した抗ヒトIgG蛍光抗体を希釈し、37°C​​の湿度の高いチャンバーに30分間置きます。同じ方法で洗浄した後、各細胞にグリセロールとPBSを加えます。等量の混合溶液または蒸留水をカバーシートに塗布し、反応の結果を蛍光顕微鏡で調べました。 （4）結果の解釈：シゾントとトロホゾイトの細胞質の蛍光強度と構造の明瞭さは区別され、蛍光はない（-）、蛍光は弱い、形態学的構造は不明確（±）、蛍光は弱い、および形態学的構造それはまだ明確（+）であり、蛍光輝度の増加と構造的定義に従って（2+）から（4+）にさらに分けられます。 一般に、蛍光強度（+）以上は1:20血清希釈で陽性と判断されます。 群衆に適していない 検査の適応がない場合は、このチェックを行うべきではありません。 副作用とリスク 通常、合併症や害はありません。