テロメラーゼ活性

テロメアは、真核生物の染色体の末端にある特別な構造であり、グアニンとその関連タンパク質が豊富な反復DNAシーケンスで構成されています。 テロメアは染色体末端の安定性に不可欠です。 テロメア長の維持には、テロメラーゼ活性の存在が必要です。 内因性サイトカインは、不死化細胞および腫瘍細胞の長期生存に重要な役割を果たします。 テロメラーゼはRNAとタンパク質の複合体であり、特定のRNA依存性逆転写酵素であり、染色体の末端で自身のRNAからテロメアDNAを合成し、細胞分裂中にテロメアを補うことができます。 DNAの損失、テロメアの長さの維持、染色体の動的バランスの維持、細胞の不死化。 テロメラーゼを検出するための高感度PCRベースの方法の確立以来、テロメラーゼは広く注目を集めています。 テロメラーゼは細胞の増殖、分化、不死と密接な関係があり、腫瘍と老化に関する基礎研究のホットスポットの1つになっていることがわかっています。 基本情報 専門家分類：腫瘍学検査分類：免疫検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食をしない 分析結果： 通常以下： 通常値： いや 通常以上： マイナス： 通常の値は負です。 ポジティブ： （1）肝がん患者はテロメラーゼ陽性率が高い（85％）。 （2）テロメラーゼは、神経芽細胞腫（94％）、乳がん（93％）、大腸がん（93％）、胃がん（85％）、前立腺がんなど、ほとんどの悪性腫瘍組織で高発現しています。 （84％）、肺がん（80％）など。 テロメラーゼ活性は、腫瘍の臨床病期と予後と密接に関連しています。 （3）少数の良性病変（肝炎、肝硬変、良性髄膜腫など）に弱いテロメラーゼ活性がある場合があります。 ヒント：少数の良性病変（肝炎、肝硬変、良性髄膜腫など）にテロメラーゼ活性が弱い場合があります。 正常値 負。 臨床的意義 1、肝癌患者はより高いテロメラーゼ陽性率（85％）、テロメラーゼ活性陽性AFPレベルはテロメラーゼ活性陰性よりも有意に高い。 テロメラーゼ活性は、腫瘍サイズ、組織学的悪性度、および腫瘍転移と有意に関連していませんでした。 テロメラーゼは、肝臓癌の診断のための腫瘍マーカーであり得る。 2.テロメラーゼは、神経芽細胞腫（94％）、乳がん（93％）、大腸がん（93％）、胃がん（85％）、前立腺がん（ 84％）、肺癌（80％）など。 テロメラーゼ活性は、腫瘍の臨床病期と予後と密接に関連しています。 したがって、テロメラーゼは現在、最も特異的で普遍的な腫瘍マーカーです。 3.少数の良性病変（肝炎、肝硬変、良性髄膜腫など）にテロメラーゼ活性が弱い場合があります。 肯定的な結果は病気かもしれません： 神経芽細胞腫、結腸直腸癌、乳癌、胃癌、肝臓癌、前立腺癌、結腸癌、腎細胞癌、甲状腺癌 近年、「テロメア、テロメラーゼ仮説」は、腫瘍診断のバイオマーカーおよび予後指標としてテロメラーゼ活性レベルを使用して、ますます多くの研究によって確認されています。 1.実験室の汚染と偽陽性または偽陰性を防ぐために注意を払ってください。 2.偽陰性を減らすために、組織標本に含まれるポリメラーゼ阻害剤を除去するよう注意してください。 3.シンチレーション分析技術、ELISA法、in situハイブリダイゼーション法は、TRAP法よりも信頼性が高い。 検査プロセス 動作確認： ゲノムDNAは0.1μg、50 mmol / L塩化カリウム、10 mmol / LTris-HCl（pH 8.4）、1.5 mmol / L塩化マグネシウム、100μgゼラチンを含むバッファー、各プライマーは0.25μmol/ L、dATP、dCTP、dGTP dTIPはそれぞれ200μmol/ Lで、DNAポリメラーゼは2.5 Uで、最終容量は100μlでした。 蒸発を防ぐために、流動パラフィンを数滴加えます。 反応サイクル：1変性：90°C 30〜60秒; 2プライマーおよびテンプレートアニーリング温度：40〜60°C 30〜60秒; 3伸長：72°C 1-2分 30〜40回のサイクルを繰り返した後、最後の7°72°Cプライマー伸長を7分間停止しました。 流動パラフィンを除去した後、製品を分析に使用できます。 アガロースゲルでの電気泳動後、エチジウムブロマイドで染色され、UVランプでの照射により予想される増幅長の蛍光ストリップが観察されました。 産物は、放射標識または非放射標識オリゴヌクレオチドプローブでサザンブロットまたはスポットブロットにハイブリダイズさせることもできます。 PCR自動装置を使用する方が便利です。反応試薬、DNAテンプレート、Taq-DNAポリメラーゼを試験管に加えた後、調整された手順、つまり、必要な温度、時間、およびそれぞれの温度と時間とサイクル数の延長が行われます。反応は、満足のいく増幅産物を得るために自動装置で行われます。 群衆に適していない 適切な検査を受けていない人は検査すべきではありません。 副作用とリスク 1.感染：採血時には無菌操作に注意し、局所感染を避けるために採血部位での水や他の部分の汚染を避けます。 2、出血：血液が完全な圧縮時間、特に凝固障害、出血傾向を与えられた後、局所的な皮下へのにじみ、あざ、腫れを避けます。